人肝细胞生长因子转染L02细胞的锌指基因差异表达筛选

目的构建人肝细胞生长因子(hHGF)真核表达载体,在L02细胞中表达hHGF并筛选其中的差异表达基因。方法构建pcDNA3.1(-)-hHGF载体,测序鉴定;其转染L02细胞后进行蛋白免疫印迹检测;将pcDNA3.1(-)-hHGF和pcDNA3.1(-)载体分别转染L02细胞后,提取总mRNA并逆转录为cDNA,运用基因表达谱芯片技术分析差异表达基因。结果构建的hHGF真核表达载体pcDNA3.1(-)-hHGF经酶切和测序鉴定正确;转染L02细胞后经蛋白免疫印迹证实hHGF存在明确表达;pcDNA3.1(-)及pcDNA3.1(-)-hHGF分别转染L02细胞后提取总RNA,经基因表达谱芯片分析发现,表达水平显著上调和下调的基因分别有404个和145个,在表达显著上调的基因中包含7种锌指基因。结论筛选出了hHGF转染L02细胞后的差异表达基因,为其作用机制及与锌指蛋白相关性的研究提供了重要依据。     

HBsAg结合胰腺细胞蛋白基因的酵母双杂交技术筛选

目的 应用酵母双杂交技术筛选胰腺细胞cDNA文库中与HBsAg相互作用的结合蛋白的基因.方法扩增人胰腺cDNA文库并纯化鉴定,将其转人酵母菌Y187;诱饵质粒PGBKT7-HBSAg转入酵母菌AH109.将以上二者进行配合,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade和X-a-Gal培养基上进行双重菌落筛选;提取阳性质粒转化大肠埃希菌DH5a并测序,在GenBank中进行生物信息学分析.结果 获得了6个与HBsAg相结合的蛋白,包括顺乌头酸酶、CDK5RAP3、羧肽酶B1、胰脂肪酶、辅脂肪酶、弹性蛋白酶.结论 筛选出的胰腺细胞蛋白与2型糖尿病等代谢性疾病有较密切关系,为进一步研究并阐明乙肝病毒(HBV)感染引发糖脂代谢紊乱机制提供了新的思路.     

Intestinal absorption of berberine and 8-hydroxy dihydroberberine and their effects on sugar absorption in rat small intestine

The intestinal absorption ofberberine （Ber） and its structural modified compound 8-hydroxy dihydroberberine （Hdber） was compared, and their effects on the intestinal absorption of sugar by per- fusion experiment were investigated in order to reveal the mechanism of low dose and high activity of Hdber in the treatment of hyperglycemia. The absorption of Hdber and Ber in rat small intestine was measured by in situ perfusion. High performance liquid chromatography （HPLC） was used to determine the concentrations of Hdber and Ber. In situ perfusion method was also used to study the effects of Hdber and Ber on sugar intestinal absorption. Glucose oxidase method and UV spectrophotometry were applied to examine the concentrations of glucose and sucrose in the perfusion fluid. The results showed that the absorption rate of Ber in the small intestine was lower than I0%, but that of Hdber was larger than 70%. Both Hdber and Ber inhibited the absorption of glucose and sucrose at the doses of 10 and 20 ~tg/mL. However, Hdber presented stronger activity than Bet （P〈0.01）. It is suggested that Hdber is ab- sorbed easily in rat small intestine and that its inhibitory effect on the absorption of sugar is better than Ber.     

人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白基因的筛选

目的 为进一步研究HCV影响糖、脂代谢机制奠定研究基础.方法 扩增人胰腺cDNA文库并经纯化鉴定后,将文库质粒转化酵母菌株Y 187.诱饵质粒pGBKT7-core转化酵母菌株AH109,在色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)上筛选阳性菌落.应用酵母双杂交系统3将阳性重组AH109菌株与重组酵母菌株Y187进行配合,在四缺培养基(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)和铺有X-α-gal的四缺培养基上进行筛选,提取蓝色酵母菌落质粒,电转化大肠埃希菌DH5α后再提取质粒测序,测序结果进行序列比对.结果 筛选出11种与HCV核心蛋白相结合的蛋白基因,包括胰凝乳蛋白酶原B1前体、羧肽酶A1,胰蛋白酶原2、胰凝乳蛋白C、胰蛋白酶1,羧肽酶B1、驱动蛋白家族3B、胰蛋白酶2,线粒体蛋白基因、弹性蛋白酶3A,辅脂肪酶.结论 在筛选出的HCV核心蛋白结合的人胰腺细胞蛋白基因中,部分与糖,脂代谢密切相关.     

儿童肺泡灌洗液RT-PCR检测对支原体感染的辅助诊断价值探讨

目的 探讨支原体感染儿童肺泡灌洗液RT-PCR检测的早期诊断和病情评估.方法 选取2016年1月至12月安徽省儿童医院收治的235例感染肺炎支原体(MP)的患儿,检测重症肺炎和轻症肺炎肺泡灌洗液MP-DNA和血清MP-IgM,根据2项指标的差异和MP-DNA拷贝量的高低,分析MP-DNA与病情的关系.结果 男患儿MP-IgM阳性率低于女患儿,>3~14岁患儿MP-DNA阳性率高于1~3岁患儿,入院前病程≤7 d患儿MP-IgM阳性率低于入院前病程>7 d患儿,差异有统计学意义(P<0.05).重症肺炎患儿中,MP-DNA高拷贝量占85.71%,高于轻症肺炎患儿,差异有统计学意义(P<0.05);重症肺炎的MP-DNA拷贝量高于轻症肺炎患儿,差异有统计学意义(P <0.05).结论 RT -PCR 法检测支原体肺炎患儿肺泡灌洗液MP-DNA拷贝量可为快速确诊和判断患儿病情提供参考.     

薯蓣丸对化疗4T1 乳腺癌小鼠 T 淋巴细胞亚群的影响

目的 评价薯蓣丸对化疗后4T1 乳腺癌小鼠免疫功能的影响,并探讨其作用机制。方法 随机 将32 只BALB/c 小鼠分为对照组、模型组、化疗组、中药组,每组8 只。除对照组外,其余组注射4T1 细胞 悬液复制荷瘤模型。成瘤后第1 天化疗组、中药组小鼠予以多西他赛治疗,1 次/7 d,共21 d ;注射多西他赛 后第2 天对中药组小鼠行中药灌胃,1 次/d,共21 d。治疗完成后处死小鼠取脾脏研磨,用流式细胞仪检测小 鼠脾脏中CD4 ＋、CD8 ＋、CD4 ＋ CD25 ＋ Foxp3 ＋调节性T 细胞（Treg）表达水平。结果 与模型组比较,化疗 组、中药组CD4 ＋、CD8 ＋、CD4 ＋ CD25 ＋ Foxp3 ＋ Treg 细胞表达水平降低,CD4 ＋ /CD8 ＋比值升高（P <0.05）; 与化疗组比较,中药组CD4 ＋细胞表达水平、CD4 ＋ /CD8 ＋比值升高,CD4 ＋ CD25 ＋ Foxp3 ＋ Treg 细胞表达水 平降低（P <0.05）。结论 薯蓣丸能改善化疗后乳腺癌小鼠免疫功能。     

CNPY3基因变异致发育性癫痫性脑病1例报道并文献复习

目的 探讨CNPY3基因变异所致发育性癫痫性脑病60型患儿的临床特征和遗传学特点。方法 回顾性分析郑州大学第三附属医院2022年3月收治的1例CNPY3基因变异患儿的临床资料，并进行相关文献复习。结果 本例患儿，女，于2月龄以癫痫发作起病，主要临床特征为难治性癫痫、全面发育迟缓、反复肺炎，存在多种癫痫发作类型：痉挛发作、痉挛-强直发作、局灶性发作。基因检测提示存在CNPY3(NM＿006586.5)复合杂合变异c.372+2T>C和c.734＿737del/p.Gln245Argfs^*42，分别遗传自父亲和母亲，其中c.372+2T>C变异未见报道。文献检索有临床资料报道共4例，国内尚未见报道，结合本研究共5例，女4例、男1例(13月龄死亡)，起病年龄1～4月龄，随访年龄分别为10月龄、28月龄、12岁、14岁、13月龄。5例均为难治性癫痫，发作类型有痉挛发作(5/5)、肌阵挛发作(3/5)、局灶性发作(2/5)、强直发作(2/5)等；其他症状包括全面发育迟缓、脑萎缩、痉挛性截瘫、胃食管返流等，个别存在外观畸形。结论 CNPY3基因变异引起的发育性癫痫...     

COX-2/sEH双抑制剂PTUPB抑制肝星型细胞活化减轻小鼠肝纤维化

目的 探讨花生四烯酸（ARA）经细胞色素P450(CYPs)及环氧合酶2(COX-2)代谢途径在非酒精性脂肪肝（NAFLD）相关肝纤维化中的作用,并从肝星形细胞（HSC）活化的角度探讨其机制。方法采用雄性C57BL/6J小鼠为研究对象,高糖高脂饲养（HFD）诱导小鼠NAFLD相关肝纤维化模型。给予小鼠每天皮下注射COX-2/可溶性环氧化物水解酶（sEH）双抑制剂PTUPB(5 mg/kg)。12周后观察COX-2/sEH双抑制对小鼠NAFLD相关肝纤维化的影响。记录小鼠体重变化;检测小鼠葡萄糖耐受性;HE染色观察小鼠肝组织病理损伤;油红O染色观察小鼠肝组织脂质堆积;Masson染色及Western blot法检测肝组织胶原含量;Real-time PCR法检测小鼠肝组织基质金属蛋白酶抑制因子相关基因表达;Western blot法检测PTUPB对棕榈酸（PA）诱导的肝星形细胞JS1活化的影响。结果 PTUPB可显著降低HFD小鼠的体重,提高小鼠葡萄糖耐受性,减轻肝组织病理损伤、脂质堆积和胶原沉积;PTUPB亦可降低HFD小鼠肝组织基质金属蛋白酶抑制因子Timp1及Timp2的基因表达;...     

饮食因素对幽门螺旋杆菌感染防治的研究进展

幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、消化性溃疡的主要致病因素,也与胃癌和胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤（MALT）的发生密切相关.近年来,Hp耐药问题日益突出.本文综述了蜂蜜、茶叶、生姜、大蒜等饮食因素对Hp感染的防治的研究进展。     

手足口病病原体EV71和CoxA16的研究进展

正手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)是一种以手足皮肤和口腔黏膜疱疹为主要症状的小儿急性传染病[1]。自1957年新西兰的Seddon首此对该病进行报道以后[2],在美国、荷兰、瑞典等欧美国家和日本、马来西亚、新加坡等亚太地区都有不同