外周血原发性肝癌细胞检测的临床研究

目的探讨检测肝癌患者外周血中肝癌细胞ＡＦＰｍＲＮＡ，以动态观察原发性肝癌的转移状况。方法采用套式逆转录聚会酶联反应及ｃＤＮＡ定量等方法对３０例外周血肝癌细胞ＡＦＰｍＲＮＡ进行了检测。结果外周血肝癌细胞ＡＦＰｍＲＮＡ检出率与肝癌的肝内转移、肝内静脉癌栓形成、ｎｍ２３－Ｈ１表达以及细胞分化程度等密切相关。结论外周血ＡＦＰｍＲＮＡ可能是肝癌细胞入侵体循环，即将或已经开始转移的标记之一。     

免疫与呼吸系统疾病

呼吸器官一向被看作是气体交换的脏器,近年来,它作为代谢器官以及免疫器官而日益受到重视。由于各种微生物、异物、化学刺激物质经常被吸入肺部,目前发现越来越多的肺部疾病与免疫有关。本文仅就与免疫密切相关的几种肺部疾病,对其发病机制、临床和X线表现综述如下。     

应用基因芯片检测喉鳞状细胞癌甲醛固定石蜡包埋组织microRNA表达谱

目的 建立以甲醛固定石蜡包埋组织为材料、基于基因芯片技术的microRNA(miRNA)表达谱的分析方法 ;筛选与喉鳞状细胞癌(简称喉癌)生物学特征密切相关的差异表达miRNA.方法 从喉癌甲醛固定石蜡包埋组织中制备总RNA,经质量鉴定后进行荧光标记.采用Agilent公司的容纳723条人类miRNA探针的基因芯片完成杂交实验,以获得喉癌的miRNA表达谱.以GeneSpring GX和R-Project软件处理分析基因芯片实验数据,筛选与喉癌转移相关的差异表达miRNA.结果 从24例甲醛固定石蜡包埋组织标本中获得了符合基因芯片实验质量标准的RNA样品,并完成了基因芯片杂交及数据分析.从中共鉴定到319个miRNA,有96个miRNA在24例喉癌中均有表达,其中与淋巴结转移密切相关的(检错率<0.05)差异表达miRNA有5个,分别为miR-23a* 、miR-28-5p、miR-15a、miR-16和miR-425.结论 甲醛固定石蜡包埋组织可以提供符合基因芯片分析质量要求的miRNA,是研究miRNA的重要样品资源.从喉癌的miRNA表达谱中筛选出的转移相关差异表达miRNA(miR-23a*、miR-28-5p、miR-15a、miR-16和miR-425)有可能成为评估喉癌转移风险的新型分子标志.     

辐射诱发细胞恶性转化时Smad7基因表达对细胞生长抑制效应的调节

背景细胞逃避转化生长因子-β(TGF-β)诱导的对细胞生长、增殖的抑制是许多肿瘤发生的一个重要机制.Smad7是TGF-β信号转导通路的抑制型Smads,它可阻断TGF-β信号在胞浆内的传导,其紊乱是TGF-β信号转导通路紊乱的机制之一.目的研究在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中,Smad7过表达是否可通过抑制TGF-β信号转导通路来拮抗TGF-β对细胞的生长抑制效应.设计自身对照前瞻性研究.地点和对象研究在军事医学科学院放射医学研究所完成.实验对象为永生化人支气管上皮细胞BEP2D及辐射诱发恶性转化的人支气管上皮细胞BERP35T2.干预以外源性TGF-β1作为刺激因子,用Northem blot检测永生化BEP2D及辐射诱发恶性转化的BERP35T2细胞中Smad7基因的表达水平;用Smad7真核表达载体PCISmad7.neo稳定转染永生化及恶性化的人支气管上皮细胞系,筛选G418抗性克隆,用Western blot加以验证.用MTT法检测Smad7基因转染前后TGF-β对永生化及恶性化细胞的生长抑制效应.主要观察指标Smad7转染前后BEP2D及BERP35T2细胞Smad7表达水平及TGF-β1作用于Smad7转染前后细胞的增殖能力变化.结果辐射诱发恶性转化的BERP35T2细胞中Smad7表达水平高于永生化BEP2D细胞,相同浓度的TGF-β1对BERP35T2细胞的生长抑制效应较BEP2D细胞弱;BEP2D和BERP35T2细胞转染Smad7基因后,各筛选到2个稳定表达SMAD7蛋白的细胞克隆,同对照细胞比,TGF-β1对稳定表达Smad7基因的细胞生长抑制能力显著减弱.结论在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中,Smad7基因表达增高,其过表达可降低TGF-β对细胞的生长抑制作用.     

辐射诱发细胞恶性转化时Smad7基因表达对细胞生长抑制效应的调节

背景：细胞逃避转化生长因子-β(TGF-β)诱导的对细胞生长、增殖的抑制是许多肿瘤发生的一个重要机制。Smad7是TGF-β信号转导通路的抑制型Smads，它可阻断TGF-β信号在胞浆内的传导，其紊乱是TGF-β信号转导通路紊乱的机制之一。目的：研究在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中，Smad7过表达是否可通过抑制TGF-β信号转导通路来拮抗TGF-β对细胞的生长抑制效应。设计：自身对照前瞻性研究。地点和对象：研究在军事医学科学院放射医学研究所完成。实验对象为永生化人支气管上皮细胞BEP2D及辐射诱发恶性转化的人支气管上皮细胞。BERP35T2。干预：以外源性TGF-β作为刺激因子，用Northern blot检测永生化。BEP2D及辐射诱发恶性转化的BERP35T2细胞中Smad7基因的表达水平；用Smad7真核表达载体PCISmad7．neo稳定转染永生化及恶性化的人支气管上皮细胞系，筛选G418抗性克隆，用Western blot加以验证。用MTT法检测Smad7基因转染前后TGF-β对永生化及恶性化细胞的生长抑制效应。主要观察指标：Smad7转染前后BEP2D及BERP35T2细胞Smad7表达水平及TGF-β作用于Smad7转染前后细胞的增殖能力变化。结果：辐射诱发恶性转化的BERP35T2细胞中Smad7表达水平高于永生化BEP2D细胞，相同浓度的TGF-β对BERP35T2细胞的生长抑制效应较BEP2D细胞弱；BEP2D和BERP35T2细胞转染Smad7基因后，各筛选到2个稳定表达SMAD7蛋白的细胞克隆，同对照细胞比，TGF-β对稳定表达Smad7基因的细胞生长抑制能力显著减弱。结论：在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中，Smad7基因表达增高，其过表达可降低TGF-β对细胞的生长抑制作用。     

nm23-H1抑制原发性肝癌细胞转移的初步机理研究

为了更深入阐明ｎｍ２３－Ｈ１抑制原发性肝癌转移的作用机理，观察ｎｍ２３－Ｈ１表达状况对肝癌细胞浸润相关因素的影响。本实验采用基因转染手段将外源ｎｍ２３－Ｈ１全长ｃＤＮＡ导入肝癌细胞并以此观察细胞体外浸润能力，细胞内游离Ｃａ＾２＋以及Ｎ－ｒａｓ基因ｍＲＮＡ表达的变化。     

新血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证病人血浆小分子代谢产物代谢谱的影响

目的观察新血府逐瘀汤对冠心病心血瘀阻证病人血浆小分子代谢产物的影响,从代谢组学的角度探讨新血府逐瘀汤的可能作用机制。方法运用氢核磁共振(1 H-NMR)技术,检测健康对照组和冠心病心绞痛心血瘀阻证病人(冠心病组)新血府逐瘀汤治疗前后血浆小分子代谢产物的水平。两组血浆代谢产物的变化分析采用主成分分析法(PCA),差异性分析采用单因素方差分析。结果冠心病组治疗前与治疗后及健康对照组的代谢产物具有明显差异,样本分布在完全不同的区域。冠心病组病人治疗前血浆乳酸、组氨酸、丙氨酸、葡萄糖、极低密度脂蛋白的含量明显高于健康对照组、冠心病组治疗后病人(F=203.175～848.797,P<0.01),而亮氨酸、苏氨酸、柠檬酸的含量明显降低(F=183.508～1 195.695,P<0.01);健康对照组与冠心病组治疗后病人之间代谢产物差异无显著性(P>0.05)。结论新血府逐瘀汤可能通过调整糖类、脂肪、氨基酸等物质的代谢,使人体趋向于平衡,从而发挥其整体治疗作用。     

胸部疾病的B型超声诊断

在医学影象学中,由于充气肺脏对超声波的强烈反射和胸壁骨组织的干扰,使超声检查在胸部的应用受到限制。近年来,随着B 型超声实时显象技术的发展,不少作者开始将它用于胸部疾病的诊断,现就B 型超声在胸部疾病的应用综述如下。     

四氯乙烯作业工人血糖和胆酸含量的变化

对北京市某区十余家宾馆干洗部作业现场劳动卫生学调查表明，车间空气中ＰＣＥ浓度多数超过国家最高容许浓度。ＰＣＥ接触组血糖含量明显高于对照组ＰＣＥ接触组血清胆酸含量亦比对照组增高，表明ＰＣＥ对接触者糖代谢和脂代谢有影响。     

辐射诱发BEP 2 D恶性转化中Smad 7对TGF-β/SMADs信号通路的调控

目的 研究BEP2D细胞经辐射诱发恶性转化过程中，作为SMAD蛋白家族的抑制分子，Smad7对TGF-β／SMAD介导信号通路的调控。方法 用Northem blot检测TGF-β刺激之后，永生化BEP2D细胞及辐射诱发恶性转化的BERP 35T2细胞中Smad7 mRNA的表达水平。人工合成SMAD结合元件(SBE)重复序列，同报告基因碱性磷酸酶融合。构建好的载体同Smad7真核表达载体共转染，TGF-β刺激，通过报告基因的表达丰度来检测Smad7对TGF-β／SMADs介导的信号通路的调控。结果 Northern杂交结果表明，永生化细胞Smad7基因对TGF-β刺激的应答正常，恶性化细胞的应答降低。基因转染的结果表明，永生化细胞中SBE的基础活性较恶性化细胞高；TGF—β刺激之后，永生化细胞中SBE活性显著增强，恶性化细胞变化不明显；同Smad7真核表达载体共转染之后，两种细胞中SBE活性均显著降低。结论 在辐射诱发细胞发生恶性转化过程中，Smad7基因对TGF-β信号通路的反馈调节作用发生紊乱，使TGF-β信号通路持续处于抑制状态，TGF-β对细胞的负性调控作用减弱，细胞进一步向恶性化发展。