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背景:双向电泳对蛋白质混合物的分离和分析精确而有效,已成为研究蛋白质组最有价值的核心技术之一;以小鼠模型为研究对象,模拟人体疾病状态,是研究心血管疾病的重要手段之一。建立并优化小鼠心肌蛋白质组双向电泳技术将为以后的心脏疾病研究奠定基础。
目的:建立并优化小鼠心肌蛋白质组双向电泳技术。
设计:以小鼠为研究对象,观察对比研究。
单位:南方医科大学附属南方医院病理科。
材料:实验于2004—02/09在南方医科大学附属南方医院病理科完成。选取和5周龄雄性无特殊病原体级BABL/c小鼠12只,体质量12~15g,由南方医科大学动物中心提供。
方法:在麻醉状态下脱臼处死小鼠,取心脏,对不同的蛋白提取方法、上样缓冲液、范围的固相pH胶条、蛋白上样量、染色方法等进行对比分析,扫描并数字化,再进行图像分析。建立并优化实验中的各个环节。
主要观察指标:蛋白分离的效果和实验的可重复性。
结果:心肌特异的裂解方案能在pH4-7胶条上分离约910个蛋白点;银染上样量200μg,考染1000μg较为适宜;正常小鼠心肌组织在17cmpH3-10L的胶上可分离约(920&;#177;30)个蛋白点,pH4~7L的胶条上,可分离(880&;#177;30)个左右蛋白点;蛋白点平均匹配率为86.9%。
结论:实验结果显示,对小鼠心肌组织蛋白质双向电泳各方面条件进行调整和优化,建立了相对稳定的心肌蛋白分离方法。 相似文献
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背景:双向电泳对蛋白质混合物的分离和分析精确而有效,已成为研究蛋白质组最有价值的核心技术之一;以小鼠模型为研究对象,模拟人体疾病状态,是研究心血管疾病的重要手段之一。建立并优化小鼠心肌蛋白质组双向电泳技术将为以后的心脏疾病研究奠定基础。目的:建立并优化小鼠心肌蛋白质组双向电泳技术。设计:以小鼠为研究对象,观察对比研究。单位:南方医科大学附属南方医院病理科。材料:实验于2004-02/09在南方医科大学附属南方医院病理科完成。选取4~5周龄雄性无特殊病原体级BABL/c小鼠12只,体质量12~15g,由南方医科大学动物中心提供。方法:在麻醉状态下脱臼处死小鼠,取心脏,对不同的蛋白提取方法、上样缓冲液、范围的固相pH胶条、蛋白上样量、染色方法等进行对比分析,扫描并数字化,再进行图像分析。建立并优化实验中的各个环节。主要观察指标:蛋白分离的效果和实验的可重复性。结果:心肌特异的裂解方案能在pH4~7胶条上分离约910个蛋白点;银染上样量200μg,考染1000μg较为适宜;正常小鼠心肌组织在17cmpH3~10L的胶上可分离约(920±30)个蛋白点,pH4~7L的胶条上,可分离(880±30)个左右蛋白点;蛋白点平均匹配率为86.9%。结论:实验结果显示,对小鼠心肌组织蛋白质双向电泳各方面条件进行调整和优化,建立了相对稳定的心肌蛋白分离方法。 相似文献
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目的检测口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)患者外周血中白细胞介素32(interleukin-32,IL-32)的表达水平,探讨其在OSCC发病中的临床意义。方法收集55例OSCC患者(口腔癌组)及35例健康志愿者(对照组)的外周血进行检测,外周血细胞总RNA用Trizol试剂,然后将总RNA反转录为c DNA,再用real-time PCR检测IL-32 mRNA的表达水平;外周血IL-32蛋白质表达水平用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测; Pearson相关性分析IL-32表达水平与肿瘤发生、发展、转移的相关性。结果 OSCC患者外周血中IL-32 mRNA及蛋白质表达均显著高于对照组(P 0. 05)。Pearson相关性分析显示,OSCC患者外周血中IL-32表达水平分别与OSCC临床分期、淋巴结转移呈正相关(P 0. 05)。结论 OSCC患者外周血中IL-32呈明显的高表达,其可能参与OSCC的发病,是判断OSCC发生发展的重要指标之一。 相似文献
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目的系统评价亚胺水解酶法(简称紫外酶法)、肌氨酸氧化酶法(简称氧化酶法)及苦味酸法测定肌酐的分析性能。方法按美国临床和实验室标准化协会EP5-A2、EP6-A、EP9-A2、EP7-A2等文件要求,采用罗氏Cobas c702全自动生化分析仪对3种肌酐测定方法的精密度、线性范围、可报告范围、方法学比对、药物干扰、试剂稳定性等性能指标进行评价。结果紫外酶法、氧化酶法及苦味酸法的批内精密度和批间精密度分别小于1/4允许总误差(TEa)和1/3TEa。紫外酶法、氧化酶法及苦味酸法的线性范围分别为4~2 017、8~1 966、3~1 310μmol/L;可报告范围分别为4~20 160、8~51 900、3~10 080μmol/L。3种方法具有良好的相关性(R20.99)。羟苯磺酸钙≥5.24μg/mL、酚磺乙胺≥0.016g/L时氧化酶法存在负干扰;其他2种方法在药物的最大剂量下不受干扰。苦味酸法在不定标的情况下待机在控时间只有2d,随后检测结果逐日明显下降,而其他2种方法稳定性较好。结论紫外酶法是3种肌酐测定方法中最为可靠的方法。 相似文献
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目的 观察右旋美托眯定(dexmedetomidine,Dex)滴鼻在小儿腭裂整复术中对血流动力学及麻醉并发症的影响.方法 60例腭裂患者随机分为Dex组和对照组,每组30例.静脉推注咪达唑仑0.1 mg/kg、丙泊酚2.0 mg/kg、芬太尼2.0μg/kg、琥珀胆碱1.5 mg/kg快速诱导后,经口腔气管插管.气管插管后Dex组按1.0 μg/kg的剂量经鼻滴入稀释至0.4 mL的Dex,对照组滴入0.4 mL生理盐水.麻醉维持全程使用七氟醚维持至术毕.术中维持脑电双频谱指数在45 ~ 55、呼末二氧化碳分压(PETCO2) 35 ~ 50 mmHg.记录诱导完(T0基础值)、滴鼻后5 min(T1)、分离腭瓣时(T2)、手术结束时(T3)、拔除气管导管时(T4)、拔除气管导管后15 min(T5)6个时点血流动力学数据;术后睁眼时间(术毕至睁眼时间)、麻醉苏醒时间(停药至离室时间)、拔管时间(术毕至拔管时间)及拔管后不良反应发生的情况.结果 与对照组比较,Dex组的平均动脉压在T2为(8.64±0.65) kPa、T3为(8.73±0.96)kPa、T4为(9.06±0.83) kPa,各时点均明显降低(P<0.05);心率在T1、T2、L3、T4、T5点有不同程度的降低;躁动、呛咳与对照组比较均明显减少(P<0.01).结论 小儿腭裂整复术中,诱导后应用1.0 μg/kg Dex滴鼻可使患儿术中及拔管期血流动力学更平稳,躁动、呛咳发生率低,且不影响麻醉苏醒时间及拔管时间. 相似文献