~(60)Coγ射线诱发小鼠DNA甲基化改变

目的探讨基因组启动子甲基化谱及DNA甲基化酶1(DNMT1)表达量在60Co-γ射线照射小鼠各组织的变化及其意义。方法 SPF级C57BL/6J雄性小鼠12只随机分为对照组和照射组,照射组小鼠接受4Gy60Co-γ射线单次全身照射后,均眼球摘除取血后处死,收集各脏器组织,进行外周血白细胞计数和骨髓嗜多染红细胞微核计数,应用甲基化DNA免疫沉淀-芯片(MeDIP-chip)杂交技术对γ射线照射小鼠肝组织基因组启动子(promoter)CpG岛甲基化改变进行分析,并采用免疫组化(SP)法和蛋白质印记(western blot)法检测小鼠各组织DNMT1的表达情况。结果与对照组比较,照射组小鼠基因组启动子甲基化谱发生了明显改变,照射组1 300个基因的启动子CpG岛发生了新的甲基化,660个基因发生去甲基化;提高筛选标准,最后可得到发生明显甲基化的基因有Trim71、Sema3f、Pcdh8、Sox4、1110034A24Rik、Limk1、Nefl、Xpr1,明显去甲基化的基因有Sfrs18、Dr1、Ankrd42、Nae1、Sfi1、Accn1、Srd5a1、Nsun2、Eif1a、Dusp5;照射组小鼠除肺组...     

6Co γ射线诱发小鼠DNA甲基化改变

目的 探讨基因组启动子甲基化谱及DNA甲基化酶1(DNMT1)表达量在60Co-γ射线照射小鼠各组织的变化及其意义.方法SPF级C57BL/6J雄性小鼠12只随机分为对照组和照射组,照射组小鼠接受4Gy60 Co-y射线单次全身照射后,均眼球摘除取血后处死,收集各脏器组织,进行外周血白细胞计数和骨髓嗜多染红细胞微核计数,应用甲基化DNA免疫沉淀-芯片(MeDIP-chip)杂交技术对y射线照射小鼠肝组织基因组启动子(promoter) CpG岛甲基化改变进行分析,并采用免疫组化(SP)法和蛋白质印记( western blot)法检测小鼠各组织DNMT1的表达情况.结果与对照组比较,照射组小鼠基因组启动子甲基化谱发生了明显改变,照射组1 300个基因的启动子CpG岛发生了新的甲基化,660个基因发生去甲基化;提高筛选标准,最后可得到发生明显甲基化的基因有Trim71、Sema3f、Pcdh8、Sox4、1110034A24Rik、Limk1、Nef1、Xpr1,明显去甲基化的基因有Sfrs18、Dr1、Ankrd42、Nae1、Sii1、Accn1、Srd5a1、Nsun2、Eif1a、Dusp5;照射组小鼠除肺组织外肝脏、肾、睾丸及脑组织的DNMT1表达量均高于对照组(P＜0.05).结论在电离辐射损伤中基因组启动子甲基化模式发生了改变,DNMT1表达增加可能是导致启动子发生甲基化的原因.     

60Co γ射线照射致小鼠肝脏的miRNAs表达改变

目的 应用miRNA芯片筛选4 Gy60Co γ射线照射后小鼠肝脏中差异表达的miRNAs,生物信息学方法探索差异表达miRNAs调控的主要功能.方法 SPF级C57BL/6J小鼠接受4 Gy60Co γ射线单次全身照射后,进行外周血白细胞计数和骨髓嗜多染红细胞微核计数.应用miRNA芯片筛选照射后小鼠肝脏中差异表达的miRNAs,用miRNA特异引物对部分差异表达miRNA进行实时定量PCR(real time PCR)验证.运用生物信息学方法,对差异miRNAs靶基因及调控功能进行预测.结果 4 Gyγ射线照射后,外周血白细胞总数与对照组相比显著减少(t=2.87,P＜0.05),而骨髓嗜多染红细胞微核率与对照组相比显著增加(t=-2.91,P＜0.05).miRNA芯片结果显示,照射组与对照组差异表达的miRNAs共17个,其中9个表达上调,8个表达下调.miR-124和miR-34a的实时荧光定量RT-PCR验证结果与芯片结果一致.GO分析发现,与黏附、细胞周期相关的通路被抑制,一些免疫相关通路被激活.结论 miR-34a和miR-194参与了急性辐射损伤的调控,起主要调控作用的miRNAs还有miR-124、miR-382和miR-92a*.

Abstract：

Objective To investigate the differential expression profiles of microRNAs in the liver of 60Co γ-ray irradiated mice using microRNA microarray and to explore their main functions by bioinformatic analysis.Methods After SPF C57BL/6J mice expose to 4 Gy-single whole body radiation,total number of peripheral WBC and the fMNPCE were measured at 3 d.The differentially expressed miRNAs in mouse liver were detected with miRNA microarray,miRNA-124 and miR-34a were confirmed by real time RT-PCR assay.Bioinformatic analysis was applied to explore target genes and the main functions of the differential expressed miRNAs.Results Compared with control group,the total number of peripheral WBC decreased( t = 2.87,P ＜ 0.05 ) ,while the fMNPCE in bone marrow increased ( t =-2.91,P ＜0.05) after 4 Gy γ-ray irradiation.miRNA microarray revealed that 17 miRNAs were differentially expressed,in which 9 up-regulated,8 down-regulated.The expression levels of miR-124 and miR-34a were coincident with the result of real time RT-PCR.GO analysis showed that some pathways including adherens junction and cell cycle were suppressed,while some immune-related pathways were activated.Conclusions miR-34a and miR-194 were involved in the regulation of acute radiation damage,some other miRNAs including miR-124、miR-382 and miR-92a* also played important roles in radiation process.     

miR-34a在辐射损伤时对细胞周期的调控作用

目的探讨60Coγ射线诱发大鼠肝脏BRL细胞辐射损伤时p53激活诱导的miR-34a改变对细胞周期的调控作用。方法以大鼠BRL肝细胞为研究对象,予4 Gy60Coγ射线照射后,分别培养4、12、24、48 h。采用流式细胞技术检测各组BRL细胞周期的变化,实时定量PCR检测各组细胞中miR-34a mRNA和c-myc mRNA表达水平的变化,Western blot方法检测各组细胞中p53蛋白和Myc蛋白的表达。结果 60Coγ射线4 Gy照射后4 h即出现G2期阻滞（P〈0.05）,至照射后24 h,G2期阻滞恢复;照射后12 h起,S期细胞减少（P〈0.05）,出现G1阻滞,48 h仍未恢复。照射后4 h p53蛋白和miR-34a mRNA表达增加（P〈0.05）,12 h均有下降（P〈0.05）,24 h和48 h已基本回至正常水平,而c-myc在照射后4 h开始呈持续降低趋势,48 h有所恢复。结论细胞在电离辐射引起DNA损伤后,早期即激活了p53蛋白,p53蛋白调节miR-34a表达,可能再经由miR-34a的靶基因c-myc介导,使细胞阻滞于G1和（或）G2期进行DNA修复。     

228例肺癌脑转移患者的临床观察#br#

目的探讨肺癌脑转移患者的临床及影像学特征。 方法回顾性分析2014年1月至2016年12月江苏省肿瘤医院放疗科诊治的228例肺癌脑转移患者的临床资料。 结果228例患者中男性140例,女性88例,中位年龄60岁,腺癌171例,小细胞癌35例,鳞癌22例。有脑转移症状者93例,无症状者135例。中位脑转移瘤确诊时间为5个月,890％患者在2年内确诊脑转移。1年内有、无颅外转移患者的中位脑转移瘤确诊时间分别为30个月和60个月,差异有统计学意义（P＜005）。脑实质转移227例,单纯幕上转移149例,单纯幕下转移15例,幕上、幕下均有转移63例。累及幕上者以顶叶（528％）和额叶（448％）最常见。原发灶不同病理类型的脑转移瘤单发及多发病灶分布情况的差异有统计学意义（P＜005）。 结论肺癌确诊患者2年内脑转移高发,其中1年内发生其他脏器转移者的脑转移风险更高。肺癌脑转移瘤常多发,转移灶多位于幕上。     

电离辐射诱发的非编码小分子RNA改变

非编码小分子RNA(microRNA,miRNA)是近年来发现的一类普遍存在于动植物体内的非编码单链小分子RNA,长约19～25 nt,其通过碱基互补配对的方式作用于靶mRNA,导致靶mRNA降解或转录后翻译受抑[1].miRNA掌握真核细胞许多功能,影响基因表达、细胞周期调控和个体发育等多种行为[2].大量研究表明,miRNA与肿瘤的形成有密切的关系[3-4].细胞中miRNA的表达受多种环境因素的影响[5],电离辐射作为一种外界的损伤因素,能直接穿透组织细胞,将能量沉积在细胞中,对细胞造成损伤,是诱发肿瘤的重要因素.本文对电离辐射引起miRNA的表达改变作一综述,探讨miRNA在辐射致癌及肿瘤放射治疗中的功能研究.     

核糖核酸降低食管癌患者放疗期间 呕吐等不良反应的疗效观察

目的 观察注射用核糖核酸Ⅱ对食管癌患者放射治疗（放疗）期间呕吐等不良反应的临床效果和安 全性。方法 选取2014 年5 月—2017 年1 月江苏省肿瘤医院放疗科收治的食管癌患者76 例,随机分为对照组与 观察组。对照组只接受放疗;观察组在接受放疗的同时应用注射用核糖核酸Ⅱ辅助治疗。比较两组治疗前后呕 吐等不良反应、药物不良反应发生情况及免疫力。结果 与对照组比较,观察组呕吐和放射性食管炎发生率降 低（P <0.05）;观察组放疗总有效率（81.6%）较对照组（55.3%）提高（P <0.05）,红细胞、白细胞及血小板数 量升高（P <0.05）;血清中CD3+、CD4+ 水平和CD4+/CD8+ 升高（P <0.05）,而头晕发生率降低（P <0.05）。结 论 注射用核糖核酸Ⅱ具有降低食管癌放疗患者呕吐等副反应、保护血细胞及提高免疫力的作用,还能增强放 疗效果。     

血浆EB病毒DNA定量监测在局部晚期鼻咽癌治疗及随访中的临床意义

目的 探讨在局部晚期鼻咽癌患者同步放化疗综合治疗及随访中动态监测血浆EB病毒DNA（EBV-DNA）定量水平的作用。方法 采用荧光定量PCR技术检测156例局部晚期鼻咽癌患者同步放化疗综合治疗前及治疗2、4、6、8周血浆EBV-DNA定量水平,并对治疗前血浆EBV-DNA阳性且获随访的患者在治疗后6、12、18和24个月的血浆EBV-DNA定量进行检测。治疗结束后评价疗效并随访治疗后2年的复发转移情况。结果 156例患者治疗前的血浆EBV-DNA阳性率为91.0％（142／156）,治疗8周的阳性率仅9.6％（15／156）。治疗前血浆EBV-DNA阳性的142例患者中,127例血浆EBV-DNA水平从治疗2周开始下降,至治疗6周未检测出DNA复制;其余15例在治疗8周内血浆EBV DNA水平维持阳性。治疗结束后,获完全缓解119例和部分缓解37例,其治疗8周的血浆EBV-DNA阳性率分别为3.4％（4／119）和29.7％（11／37）。142例治疗前血浆EBV-DNA阳性患者中有135例获随访2年,1、2年复发转移率分别为14.1％（19／135）和23.0％（31／135）。经受试者工作特征曲线下面积（Az）法分析,1、2年血浆EBV DNA水平对分别判断1、2年复发转移率的准确性较高（Az1=0944,Az2=0925;P均＜0.05）。结论 血浆EBV DNA定量水平能够较好地反映局部晚期鼻咽癌放化疗综合治疗的近期疗效。对于治疗前血浆EBV DNA阳性的局部晚期鼻咽癌患者,综合治疗结束后2年内实时监测血浆EBV-DNA水平对判断复发转移有一定的临床价值。     

医疗照射过程中对患者的防护

随着放射医疗设备如计算机X射线断层照相术(CT)、正电子发射计算机断层(PET)、直线加速器的快速发展,加之放射医疗技术如多叶准直器、三维适形调强等的发明应用,电离辐射在医学中的应用日益广泛.     

电离辐射诱发的非编码小分子RNA改变

非编码小分子RNA(microRNA,miRNA)是近年来发现的一类普遍存在于动植物体内的非编码单链小分子RNA,长约19～25 nt,其通过碱基互补配对的方式作用于靶mRNA,导致靶mRNA降解或转录后翻译受抑[1].miRNA掌握真核细胞许多功能,影响基因表达、细胞周期调控和个体发育等多种行为[2].大量研究表明,miRNA与肿瘤的形成有密切的关系[3-4].细胞中miRNA的表达受多种环境因素的影响[5],电离辐射作为一种外界的损伤因素,能直接穿透组织细胞,将能量沉积在细胞中,对细胞造成损伤,是诱发肿瘤的重要因素.本文对电离辐射引起miRNA的表达改变作一综述,探讨miRNA在辐射致癌及肿瘤放射治疗中的功能研究.