黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1/NO的影响

目的 探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV-304)的一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)的影响.方法 用DMEM培养液在37℃、5％ CO2条件下对ECV304细胞株进行扩增至足够数量后,调细胞密度为1×105,并分为7组:A组:空白组,不加任何诱导剂;B组:TNF-α(40ng/ml)诱导组;C组:TNF-α(40ng/ml)+氯沙坦钾(105 mol/l);D组:TNF -α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml);E组:TNF -α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(1mg/ml);F组:TNF-α(40ng/ml)+毛蕊异黄酮(10mg/ml);G组:TNF-α (40ng/ml)+毛蕊异黄酮(20mg/ml).分别于孵育6小时、24小时后时收集上清液,用ELISA检测上清液中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的含量.结果 ①与空白组比较,TNF-α降低了ECV-304NO水平(P＜0.001)、提高了ET-1水平(P＜0.001);②氯沙坦钾提高了ECV-304NO水平(P ＜0.001)、降低了ET-1水平(P＜0.001);③毛蕊异黄酮(0.1 mg/ml～10mg/ml)能够促进ECV-304细胞NO的产生(P＜0.001)、降低ET -1的产生(P＜0.001);④氯沙坦钾和毛蕊异黄酮(20mg/ml)对ECV-304细胞ET-1和NO水平的影响无明显差异((P＞0.05);⑤毛蕊异黄酮浓度(在0.1 mg/ml ～20mg/ml内)与ECV-304 ET-1的分泌呈负相关性(r=-0.02、P＜0.001);与ECV-304NO的分泌呈正相关性(r=0.0075、P ＜0.001).结论 黄芪毛蕊异黄酮单体可以促进TNF-α诱导的内皮细胞NO分泌,抑制ET-1分泌,并在一定浓度内(0.1 mg/ml～20mg/ml)呈浓度依赖性.     

黄芪单体毛蕊异黄酮对血管内皮细胞前列环素和血栓素A2的影响

目的 观察黄芪单体毛蕊异黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)合成前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)的影响.方法 以HUVECs为研究对象,用L-DMEM培养基在5%CO2、37℃条件下对HUVECs进行传代培养,至足够数量后对其进行分组处理:(1)空白对照组(不加入任何干预因素);(2)AngⅡ组(加入AngⅡ至终浓度为 1×10-6 mol/L);(3)AngⅡ+毛蕊异黄酮不同剂量组(10、1、0.1 mg/L),分别培养0、6、12、18、24 h后收集细胞上清进行PGI2、TXA2的检测,检测方法采用ELISA.结果 (1)与空白对照组比较,AngⅡ可以诱导HUVECs合成PGI2和TXA2,并且都具有时间依赖性(r=0.891,P=0.043;r=0.95,P=0.013);(2)与AngⅡ组比较,毛蕊异黄酮0.1 mg/L可以抑制AngⅡ诱导PGI2和TXA2的合成(P<0.05);1 mg/L可以促进AngⅡ诱导的PGI2合成,抑制TXA2合成(P<0.05);10 mg/L可以促进AngⅡ诱导的PGI2和TXA2合成(P<0.05).结论 黄芪单体毛蕊异黄酮可以影响AngⅡ所诱导的HUVECs PGI2和TXA2的合成.     

黄芪毛蕊异黄酮对转化生长因子β1诱导内皮细胞转分化的影响

目的:探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人脐静脉内皮细胞转分化的影响,以阐明黄芪毛蕊异黄酮对肾脏纤维化的保护作用。方法:人脐静脉内皮细胞系ECV-304为研究对象,体外培养ECV-304细胞株,分为正常对照组,TGF-β1组(10μg/L),TGF-β1+毛蕊异黄酮低、中、高剂量组(0.1、1、10mg/L)。各组细胞培养72h后,采用荧光倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,Western Blot检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果:与正常对照组相比,TGF-β1组细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞形态,TGF-β1明显促进α-SMA蛋白的表达(P<0.01);毛蕊异黄酮与TGF-β1共培养后可明显抑制TGF-β1诱导的细胞形态学改变及α-SMA的表达(P<0.05),高剂量组比低、中剂量组有更强的抑制效应,低剂量组抑制效应最弱。结论:黄芪单体毛蕊异黄酮可以抑制TGF-β1诱导的内皮细胞(ECV-304)向肌成纤维细胞转化,具有保护内皮细胞的作用,从而为防治慢性肾脏病提供了依据。     

冠状动脉右室瘘一例

患者女性 ,5岁 ,出生后 3个月时因咳嗽在当地县医院就诊。体检 :发育正常 ,皮肤黏膜无紫绀 ,颈静脉无怒张 ,心前区无明显隆起 ,心浊音界向两侧扩大 ,心前区可闻及响亮、浅表的连续性杂音 ,以舒张期为显著 ,双肺正常 ,无周围血管征。心电图正常。彩色多普勒检查 :左房、左室、右室均扩大 ,右冠状动脉内径增宽约 0 .86ｃｍ ,其内有红色为主的花色湍流束 ,流速约 2 .91ｍ/ｓ,左冠状动脉内径正常 ;心尖 5腔切面显示 :右室侧壁可探及一回声缺损 ,内径约 0 .67ｃｍ ,并可见一管状结构由缺损口起向房室沟延续 ,彩色血流观察缺损口可探及一鲜明的多…     

羧基肽酶E (CPE)在人乳腺腺癌中的表达和功能

 【摘要】目的 观察乳腺腺癌中羧基肽酶E(carboxypeptidase E,CPE)介导的神经内分泌肽加工和表达。方法 使用RT PCR、免疫组化、ELISA和Western blot等方法,比较CPE和生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,GHRH)基因和蛋白质水平在42例乳腺癌和21例癌旁正常组织中的表达。结果 乳腺癌组织中的CPE基因表达水平为1 024±237,而癌旁正常组织中CPE基因表达水平为805±83 (P<0.01)。与乳腺癌旁正常组织比较,癌组织中CPE蛋白质显示了较高的表达 (P<0.01)。乳腺癌组织中的GHRH基因表达水平为1 522±457,而癌旁正常组织中为1 067±437,差异有统计学意义(P<0.01)。与乳腺癌旁正常组织比较,癌组织中GHRH蛋白表达被上调 (P<0.01)。结论 癌组织中CPE和GHRH高表达提示癌细胞中存在较强的由CPE酶介导的神经内分肽转录后加工能力。