单纯疱疹病毒Ⅰ型糖蛋白B基因疫苗的构建及细胞免疫学研究

目的：构建、制备单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)糖蛋白BDNA疫苗，检测其诱导机体产生的细胞免疫应答。方法：PCR扩增编码HSV-Ⅰ gB去除N端部分信号肽序列(39bp)的基因片段(2673bp)，定向插入pcDNA3载体中，构建pcDNA3-gB基因疫苗并对其进行PCR、酶切及测序鉴定。于BALB／c小鼠注射免疫3次，观察小鼠CD4^ 、CD8^ T细胞亚群的变化，CFSE／PI双标记的流式细胞计数法检测CTL活性。结果：双酶切分析结果为目的基因(2．7kb)和线性质粒pcDNA3(5．4kb)；PCR扩增结果为特异产物(2．7kb)；测序结果与GenBank gB基因序列同源性达99．5％；CTL，活性增强；BALB／c小鼠脾CD4^ T细胞增加。结论：经鉴定证实了HSV-Ⅰ gB基因疫苗的构建；HSV-Ⅰ gB基因疫苗可以诱导较强的细胞免疫应答，应用于预防HSV-Ⅰ的感染具有良好的前景。     

单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B基因疫苗的构建及其诱导小鼠细胞免疫应答

目的:构建、制备单纯疱疹病毒1型截短糖蛋白B DNA疫苗，检测其诱导机体产生的细胞免疫应答效果。方法:利用PCR技术从HSV-1 SM44毒株基因组中扩增出编码HSV-1 gB14～507氨基酸序列的一段基因。定向插入真核表达质粒pcDNA₃载体中，构建出重组真核表达质粒pcDNA₃-gBt，并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。于BALB/c鼠注射免疫3次，抗体分析CD4⁺、CD8⁺T细胞亚群的变化，羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)/碘化丙碇(PI)双标记的流式细胞计数法检测CTL活性。结果:PCR及测序鉴定结果显示，插入的克隆基因与GenBank中HSV-1F株gB基因序列一致，证实了HSV-1 gBt核酸疫苗的构建；pcDNA₃-gBt免疫组BALB/c鼠的CD4⁺T细胞数较空质粒（pcDNA₃）对照组和生理盐水对照组增加，CTL活性也较对照组明显增强，但是pcDNA₃-gBt免疫组BALB/c鼠的CD8⁺T细胞、CD4⁺/ CD8⁺T细胞比值与对照组比较差异均无显著性（P＞0.05）。结论:HSV-1 gBt核酸疫苗诱导较强的细胞免疫应答。     

单纯疱疹病毒I型截短糖蛋白B基因序列的克隆及鉴定

目的构建单纯疱疹病毒I型（herpes simplex virusI，HSV—I）SM44株截短糖蛋白B基因序列，为研制联合基因疫苗奠定基础，用于角膜炎的防治。方法利用聚合酶链反应（polymerase chain response，PCR）技术从感染HSV—I SM44株的vero细胞中扩增出HSV-gBt编码基因，经双酶切鉴定后将目的基因定向插入真核表达质粒pcDNA，载体中，构建出重组真核表达质粒pcDNA3-gBt，并对其进行酶切分析和测序鉴定。结果对pcDNA3-gBt双酶切后，电泳可见目的基因（1．5kb）和线性质粒pcDNA3（5．4kb）两条带；测序结果表明，克隆基因插入方向正确，与基因库中登录的HSV-1 F株gB基因序列比较，同源性达99．5％。结论经证实成功地构建了重组真核表达质粒pcDNA3-gBt，为进一步研究其免疫学效应及构建病毒糖蛋白联合疫苗并最终用于单疱病毒角膜炎的预防和治疗奠定理论基础.     

二妙丸和三妙丸中小檗碱的含量测定

本文介绍了二妙丸、三妙丸小檗碱含量测定方法。采用薄层比色法以无水乙醇提取二妙丸、三妙丸中的小檗碱,用正丁醇一冰醋酸一水(7∶1∶2)展开,然后刮取小檗碱斑点进行比色测定,以标准曲线求得小檗碱含量。     

青光眼患者的心理护理

目的青光跟患者的心理护理时机和方法的选择。方法对36例虽青光跟患者的心理护理观察其疗效及并发症。结果随访3～24个月（平均9．4个月）术后疗效较好，无并发症。结论青光眼患者经过术前术后的心理护理治疗将有助于提高手术成功率。     

成功抢救视网膜中央动脉阻塞2例报告

病例1男性,62岁,晨起右眼突然视物不清4h来院就诊。既往有糖尿病史10年,血压120／80mmHg（1mmHg：0．133kPa）,血糖11．02mmol／L,血脂、血液流变学检查均正常。视力：右光感,左1．0;右眼角膜透明,前房正常,瞳孔4mm×4mm大小,直接光反射迟钝,眼底视乳头边界清,色泽正常,动脉纤细,视盘颞侧及鼻侧动脉呈串珠状,血液缓慢向前流动,视网膜后极部水肿,黄斑区有较淡的樱桃红斑,黄斑中心凹光反射消失。     

单纯疱疹病毒糖蛋白B的结构与功能区

单纯疱疹病毒1(HSV-1)是双链线性DNA包膜病毒,其DNA编码至少有11种特异型的糖蛋白,其中gB、gD、gH和gL是病毒复制、穿入、病毒胞间扩散和病毒囊膜与感染的细胞膜融合必须糖蛋白[1～5].gB是病毒囊膜的组成部分,是HSV-1感染晚期糖蛋白,在感染的细胞中,gB是跨膜蛋白,穿膜时是以二聚体和糖基化形式由胞外区穿向细胞膜,存在于感染细胞的胞膜上、内质网、高尔基复合体和核膜上.HSV-1 gB在疱疹病毒家族中是高度保守蛋白,各毒株间差异较小,且与所有的疱疹类病毒亚群有较大的同源性[6～9];gB是病毒复制必须的多功能蛋白,是宿主免疫反应的主要靶抗原,能诱导细胞免疫、体液免疫和细胞毒T淋巴细胞反应[10～14].鉴于gB蛋白的多种生物活性,近年来许多学者对gB的抗原和功能区进行大量研究.HSV-1 gB由UL27基因编码,全长2172bp,编码904氨基酸,由-30(有的是29)氨基酸序列组成的信号肽、-696氨基酸序列组成的在氨基端具有亲水性的胞外区、-69氨基酸序列组成的具有疏水性的跨膜区、-109氨基酸序列组成的羧基端具有极性胞内区[15].HSV-1 gB含有6个一致序列N-连接糖基化位点和10个半胱氨酸序列,在与gB同源序列中是高度保守序列,这些结构是整个分子内的重要结构[16].     

浅谈对新生儿淋菌性结膜炎的护理与预防

随着淋病率的升高，新生儿淋菌性结膜炎也随之增加。2006年1～6月，我院服科门诊确诊淋菌性结膜炎20例，为了加强对淋菌性结膜炎的分析、护理、预防与检测，并针对有关问题进行探讨，现报告如下。     

单纯疱疹病毒1型糖蛋白B基因疫苗的构建

目的：构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗,探讨单纯疱疹病毒1型糖蛋白B(HSV-1gpB)基因作为基因疫苗的可能性。方法：利用PCR技术从HSV-1 SM44毒株基因组中扩增出编码HSV-1gpB去除N端部分信号肽序列(39 bp)的基因片断（2 673 bp）,定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA-gpB,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。 结果：双酶切重组质粒pcDNA-gpB,电泳可见两条带,分别为目的基因（2 700 bp）和线性质粒pcDNA3（5 400 bp）; 以重组质粒pcDNA-gpB为模板进行PCR扩增,在2 700 bp位置扩增出特异的产物;测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与GenBank中登录的HSV-1 F株gpB基因序列比较,同源性达99.5%。 结论：利用PCR技术从HSV-1 SM44株基因组中扩增出编码HSV-1gpB去除N端部分信号肽序列（39 bp）的基因片断（2 673 bp）, 成功地构建了HSV-1基因疫苗pcDNA-gpB。     

1998年四平地區流行性角结膜炎的临床特點与治疗體會

流行性角结膜炎是由腺病毒感染引起的眼部传梁病,曾在世界各地造成暴发流行。1997年末至1998年3月四平地区出现较大规模的流行,被感染的患者病情重、病程长,常规藥物治疗无特效,使临床醫生颇感棘手。我科采用中西醫结合的综合疗法,取得较为满意的治疗效果,现总结报告如下: 1 临床资料 1.1 一般资料在 我科诊治的流行性角结膜炎患者1360例,其中男性572例(42.06％),女性788例(57.94％)。年龄最小3個月,最大66岁,20岁至45岁共1104例(83.82％)。 1.2 眼部症状 就诊患者均有眼痛、流泪、眼瞼红