HeLa和SiHa细胞中Skp2、p27和C-myc的表达

目的:检测S期激酶相关蛋白2(Skp2)、C-myc、p27在宫颈癌HeLa及SiHa细胞系中的表达,明确这些指标在宫颈癌细胞系表达的意义。方法:通过细胞免疫组化、Westernblot、RT-PCR技术分析Skp2、p27和C-myc在蛋白和mRNA水平表达的差异。结果:免疫组化显示:He-La细胞中Skp2和C-myc表达强度高于SiHa细胞(P=0.032和P=0.026),而HeLa细胞中p27蛋白表达弱于SiHa细胞(P=0.035)。Westernblot显示:在HeLa细胞中Skp2和C-myc蛋白表达分别是SiHa细胞表达量的2.8倍和1.5倍;而SiHa细胞中的p27蛋白的表达水平是HeLa细胞中表达的2.7倍。RT-PCR结果显示:HeLa细胞中内源Skp2和C-myc的mRNA表达水平高于SiHa细胞(P=0.034和P=0.028),而SiHa细胞中的p27的mRNA表达水平高于HeLa细胞的表达水平(P=0.002)。结论:Skp2及C-myc在HeLa细胞中的表达水平高于SiHa细胞中的表达水平,而p27在HeLa细胞中的表达水平低于SiHa细胞中的表达水平。     

黄芩素对miR-183/Kif2a介导乳腺癌细胞增殖和凋亡的机制研究

目的探讨黄芩素对miR-183/Kif2a介导的乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的作用及可能机制。方法噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测黄芩素对乳腺癌细胞增殖活性的影响,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测细胞中miR-183和Kif2a信使RNA的表达,在线靶基因预测软件预测miR-183和Kif2a的靶向关系。转染miR-183抑制剂和pcDNA 3.1-Kif2a,黄芩素处理细胞后,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术测定细胞凋亡,蛋白质免疫印记技术(western blot,WB)检测细胞中G1/S-特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)、p21、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(C-Caspase-3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(C-Caspase-9)蛋白表达。结果经黄芩素处理后的乳腺癌细胞增殖能力下降(P<0.05),细胞中miR-183水平升高(P<0.05),Kif2a信使RNA水平降低(P<0.05)。miR-183靶向结合Kif2a并负向调控Kif2a的表达(P<0.05)。miR-183抑制剂或pcDNA 3.1-Kif2a转染可以逆转黄芩素对乳腺癌增殖、凋亡以及C-Caspase-3、C-Caspase-9、Cyclin D1、p21蛋白表达的作用。结论黄芩素通过miR-183/Kif2a调控乳腺癌细胞增殖和凋亡。     

绝经前、后EP中ER、PR、Bcl-2、Ki-67蛋白表达特点

目的:探讨绝经前、绝经后子宫内膜息肉(EP)中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、B-细胞淋巴瘤基因蛋白(Bcl-2)、细胞核相关抗原(Ki-67)的表达,为研究EP形成机制提供思路。方法:随机选取绝经前、绝经后EP标本各15例,及绝经前正常增生期子宫内膜和绝经后正常萎缩型子宫内膜各10例,共50例标本。用生物素蛋白免疫组化法(SP法)检测各组织上EP、PR、Bcl-2、Ki-67的表达情况,并进行统计分析。结果:①绝经前组:PR在EP腺体和间质的表达均低于其在正常增生期子宫内膜中的表达(P<0.05),Bcl-2在EP腺体和间质的表达均高于其在正常增生期子宫内膜中的表达(P<0.05),ER、Ki-67在EP和正常增殖期子宫内膜中的表达无差异(P>0.05);②绝经后组:ER、PR、Bcl-2在EP间质和腺体中的表达均高于三者在绝经后正常萎缩型子宫内膜中的表达(P<0.05),Ki-67在EP和绝经后正常萎缩型内膜中的表达没有差异;③PR在绝经后EP腺体及间质的表达显著高于其在绝经前EP中的表达(P<0.05),ER、Bcl-2、Ki-67在绝经前、后EP中的表达没有显著性差异(P>0.05)。结论:子宫内膜局部ER、PR的分布不均和功能改变在EP的形成中可能起到一定作用;局部细胞凋亡的异常在EP的形成中可能起到一定作用。     

促宫颈成熟球囊引产疗效及对分娩与新生儿结局的影响

目的探讨促宫颈成熟球囊引产疗效及对分娩和新生儿结局的影响,为临床治疗提供一定依据。方法收集2013年6月至2015年7月西安交通大学第二附属医院收治的200例具有引产指征的孕妇作为研究对象。随机分为对照组100例和观察组100例,对照组给予控释前列腺素E2(PCE2)治疗;观察组给予促宫颈成熟球囊治疗。比较两组孕妇促宫颈成熟疗效、Bishop评分、分娩方式、剖宫产术率及分娩状况等。结果观察组患者促宫颈成熟有效率高达94.0%,明显高于对照组的有效率(83.0%),差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者Bioshop评分高达(8.39±0.92)分,明显高于对照组的(7.12±0.35)分,差异有统计学意义(P0.05)。观察组剖宫产术率仅为8.0%,明显低于对照组的19.0%,差异有统计学意义(P0.05)。观察组孕妇诱发临产时间为(14.7±2.8)h,明显少于对照组的(16.4±3.4)h,差异有统计学意义(P0.05);观察组孕妇产后出血(160.2±49.3)mL,明显少于对照组的(180.8±56.1)mL,差异有统计学意义(P0.05)。结论促宫颈成熟球囊引产疗效明显,可明显降低孕妇剖宫产术率,并减少产妇产后出血,值得在临床上进一步深入探讨研究与推广应用。     

Rab1A siRNA对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制

目的观察Rab1A对宫颈癌He La细胞增殖和凋亡的影响并探讨其分子机制。方法应用siRNA干扰Rab1A基因表达,将He La细胞分为空白对照组、阴性对照组和Rab1A siRNA组,空白对照组不做处理,阴性对照组转染阴性对照siRNA。Rab1A siRNA组转染Rab1A特异性siRNA。MTT比色法分析Rab1A对宫颈癌He La细胞增殖的影响;采用流式细胞仪分析对细胞周期和细胞凋亡的影响;Western blot观察Rab1A siRNA对Cyclin D1、GRP78、Bcl-2和Bax表达的影响。结果与阴性对照组相比,Rab1A siRNA组He La细胞的Rab1A mRNA和蛋白的表达均显著下调;Rab1A siRNA抑制宫颈癌He La细胞增殖;与阴性对照组相比,Rab1A siRNA组He La细胞的S期细胞数量显著减少(P<0.05),G1/G0期细胞数量显著增加(P<0.05),Rab1A siRNA组He La细胞的早期凋亡和晚期凋亡显著增加(P<0.01);Rab1A siRNA组与阴性对照组相比,Cyclin D1和Bcl-2在蛋白水平的表达显著下调(P<0.01),GRP78和Bax在蛋白水平的表达显著上调(P<0.01)。结论 Rab1A通过调控Cyclin D1的表达促进宫颈癌He La细胞增殖,通过调控GRP78、Bcl-2和Bax表达抑制细胞凋亡。     

Skp2、C-myc、p27在宫颈癌组织中的表达及其意义

目的:探讨S期激酶相关蛋白2(Skp2)、C-myc及p27蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)、宫颈癌组织中表达及其临床意义。方法:利用免疫组化S-P法检测Skp2,p27和C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌石蜡组织中的表达情况,分析Skp2、C-myc蛋白与宫颈癌临床病理特征的关系,并且分析3者在宫颈癌组织中表达相互关系。结果:Skp2、C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中阳性表达率表达逐渐增高(Skp2:0%,15.38%,57.5%;C-myc:13.33%、15.38%、55.00%);而p27则相反(73.33%,69.23%,35.00%);Skp2的表达与临床分期,分化程度,淋巴结转移有关;C-myc的表达与肌层浸润深度有关;Skp2和p27在宫颈癌中表达呈负相关(r=-0.641,P<0.05);Skp2和C-myc在宫颈癌中表达呈正相关(r=0.646,P<0.05);C-myc和p27在宫颈癌中表达无相关性(r=0.032,P>0.05)。结论:Skp2及C-myc在正常宫颈、CIN、宫颈癌发展中表达逐渐升高,而p27表达逐渐降低;Skp2与C-myc表达呈正相关,Skp2与p27呈负相关。C-myc、Skp2、p27联合检测对判断宫颈癌的发生、发展及预后有重要意义。     

卡铂联合多西他赛化疗对宫颈癌组织中survivin蛋白表达的影响

目的:探讨卡铂联合多西他赛化疗对宫颈癌组织中survivin蛋白表达的影响。方法:对行手术治疗且临床分期为Ⅰb～Ⅱb期宫颈癌患者60例,RT-PCR检测化疗前后survivin蛋白,同时采用流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率。结果:化疗后suivivin表达明显下降,肿瘤细胞的凋亡明显增加。结论:卡铂联合多西他赛能有效治疗进展中的宫颈癌,survivin通路为其诸多作用通路中的一种。     

SiRNA-CD147降低HeLa中survivin表达的研究

目的研究下调CD147表达后宫颈癌细胞系HeLa细胞中survivin表达及凋亡的变化。方法设计、合成两对CD147编码基因的反向重复序列,运用瞬间转染方法抑制HeLa中CD147表达,应用RT-PCR、Western blotting方法检测干扰后CD147、survivin、Bim及caspase-3表达改变,流式细胞术检测干扰后肿瘤细胞的凋亡情况。结果 SiR-NA sequence 1、2均有效抑制CD147基因表达（P〈0.05）,干扰后的survivin表达明显下降,干扰后caspase-3mRNA水平升高（P〈0.05）,活性caspase-3蛋白及Bim水平增高（P〈0.05）,肿瘤细胞凋亡增加,以细胞早期凋亡改变最为明显（P〈0.05）。结论沉默CD147基因表达可下调HeLa细胞中survivin的表达,诱导肿瘤细胞凋亡。     

COX-2和MMP-9在绝经前后子宫内膜息肉中的表达及其意义

目的研究绝经前、后子宫内膜息肉(EMP)中环氧合酶-2(COX-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达及二者的相关性,为研究EMP形成机理提供线索。方法选取存档石蜡标本共150例,其中绝经前、后EMP各45例,绝经前正常增生期子宫内膜和绝经后正常萎缩型子宫内膜各30例,用免疫组化SP法检测各组COX-2、MMP-9的表达情况,并分析两指标在EMP组织中的表达及相关性。结果绝经前组COX-2、MMP-9在EMP腺体和间质的表达均显著高于二者在正常增生期子宫内膜中的表达(P<0.05)。绝经后组COX-2、MMP-9在EMP间质和腺体中的表达均高于二者在绝经后正常萎缩型子宫内膜中的表达(P<0.05)。COX-2在绝经前、后EMP腺体中的表达差异无统计学意义(P>0.05),COX-2在绝经前EMP间质中的表达高于其在绝经后EMP间质中的表达(P<0.05),MMP-9在绝经前EMP的腺体和间质中的表达高于其在绝经后的表达(P<0.05)。COX-2与MMP-9在EMP腺体和间质表达呈正相关(P<0.01)。结论 COX-2和MMP-9在EMP中高表达,且呈正相关。     

湖北海棠叶治疗2型糖尿病疗效观察

2型糖尿病应用胰岛素治疗的患者,随机抽取90例,分治疗组60例,对照组30例。应用湖北海棠叶治疗,60天为一疗程。结果：胰岛素用量显著减少,临床症状改善明显。结论：湖北海棠叶具有降低2型糖尿病患者的血糖,改善并发症的作用。