细胞因子对平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞内酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶mRNA的影响

目的研究白细胞介素(IL)1β和肿瘤坏死因子α(TNFα)对酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶(ACAT)mRNA水平的影响,探讨动脉粥样硬化形成的机制及其调节水平。方法在小鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)及肌源性泡沫细胞(FC)中分别加入IL1β和TNFα,孵育24h,用半定量RTPCR检测ACATmRNA表达。结果①无论有无细胞因子的干预,VSMC转变为FC后,ACATmRNA的表达均增加。②TNFα对VSMC和平滑肌源性FC中ACATmRNA的表达无影响。③IL1β能促使平滑肌源性FC中的ACATmRNA的表达。结论IL1β在转录水平上调ACATmRNA的表达,促使胆固醇的酯化和胆固醇的沉积,使VSMC向FC转化,参与动脉粥样硬化的形成和发展。     

替米沙坦对动脉粥样硬化的作用及高血压的疗效观察

目的探讨替米沙坦对动脉粥样硬化及高血压的治疗作用。方法 2008年1月-2010年12月临床确诊为高血压合并动脉粥样硬化56例患者为观察对象,结合临床资料分析替米沙坦药物的诊治方案及进展。结果治疗后8周,患者血压值、BMI指数、动脉硬化指数及临床症状改善均好于治疗前(P<0.05)。结论替米沙坦对动脉粥样硬化及高血压有很好的治疗效果,能显著降低血压,延缓动脉硬化的发生,具有显著临床意义。     

中磺酸抑制人单核细胞系THP-1细胞ACAT-1表达

目的观察牛磺酸对人单核细胞系THP-1细胞酰基辅酶A、胆固醇酰基转移酶-1（ACAT-1）表达的影响，以期为牛磺酸用于临床治疗动脉粥样硬化提供实验依据。方法在有或无干扰素-γ（IFN—γ）的条件下，用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续孵育不同的时间，RT-PCR检测ACAT—1mRNA水平，Western Blot检测其蛋白表达。结果牛磺酸显著下调THP-1的ACAT-1mRNA和蛋白表达水平（P〈0．05～0．0l，n=3），并呈时间和剂量依赖性效应。IFN-γ促进ACAT-1mRNA和蛋白表达（P〈0．05），该作用被牛磺酸部分抑制（P〈0．01）。结论牛磺酸抑制ACAT-1的基础表达和由IFN-γ诱导的表达，这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

人ACAT1基因P1启动子的克隆及意义

目的克隆人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT 1)基因P 1启动子。方法应用PCR方法从人单核细胞系THP-1扩增分离出ACAT 1基因P 1启动子全长片段,将PCR产物克隆入T载体,并对所获得的序列进行生物信息学分析。结果经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,克隆的ACAT 1基因P 1启动子片段碱基序列与G enB ank数据库一致,未发现突变。结论人ACAT 1基因P 1启动子克隆成功,此为动脉粥样硬化(A S)过程中ACAT 1基因转录调控机制的研究奠定了基础。     

瘦素对THP-1细胞泡沫化过程中ACAT-1表达的影响

目的：研究单核或巨噬细胞转分化和泡沫细胞形成过程中瘦素对人酰基辅酶A1胆固醇酰基转移酶(ACAT-1)表达的影响。方法：在体外模拟动脉粥样硬化(AS)形成过程中，运用放射性同位素标记底物法、逆转录聚合酶链反应、蛋白质免疫印迹法检测ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平。结果：单核或巨噬细胞转分化过程中ACAT-1酶活性、蛋白及mRNA水平均升高。巨噬细胞转变为泡沫细胞过程中ACAT-1表达水平无明显变化。高瘦素血症可明显增强单核或巨噬细胞转分化和泡沫细胞形成过程中ACAT-1表达。结论：高瘦素血症可能通过增强ACAT-1表达导致动脉粥样硬化提前发生。     

牛磺酸抑制THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达

目的:观察牛磺酸对人单核细胞系THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法:在有或无干扰素-γ(INF-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续孵育不同的时间,RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达。结果:牛磺酸显著下调THP-1的ACAT-1mRNA和蛋白表达水平(P<0.05～0.01,n=3),并呈时间和剂量依赖性效应。INF-γ促进ACAT-1mRNA和蛋白表达(P<0.05),该作用被牛磺酸部分抑制(P<0.01)。结论:牛磺酸抑制ACAT-1的基础表达和由INF-γ诱导的表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

牛磺酸下调单核-巨噬细胞ACAT-1表达

目的:观察牛磺酸对THP-1及THP-1源性巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达及活性的影响。方法:将THP-1细胞与PMA孵育48h使之分化为巨噬细胞,在有或无干扰素-γ(IFN-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续作用不同的时间,RTPCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达,并测定其酶活性。结果:牛磺酸显著下调THP1及THP1源性巨噬细胞的ACAT1mRNA和蛋白表达水平以及ACAT-1活性(P<0.05～0.01,n=3);IFNγ促进ACAT1mRNA和蛋白表达、增强ACAT-1活性(P<0.05,n=3)的作用被牛磺酸部分抑制(P<0.05,n=3)。结论:牛磺酸不但能降低单核巨噬细胞ACAT-1的基础表达和活性,而且能抑制由IFN-γ诱导的ACAT-1表达和活性,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。     

氧化低密度脂蛋白对巨噬细胞Toll样受体-4的表达效应

目的研究低密度脂蛋白(LDL)氧化对人单核细胞源巨噬细胞Toll样受体-4(TLR-4)表达的影响及其机制。方法用RPM I 1640培养基体外培养人THP-1单核细胞系,加入佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)培养48 h使其分化为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)或LDL,用免疫细胞化学、蛋白质免疫印迹和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,观察脂蛋白氧化前、后对巨噬细胞表达TLR-4蛋白及TLR-4 mRNA的影响。结果Ox-LDL可提高TLR-4蛋白及TLR-4 mRNA的表达(P<0.01);而LDL对TLR-4蛋白及其mRNA的表达无影响(P<0.05)。结论LDL的氧化可能促进THP-1源巨噬细胞TLR-4转录水平的上调,导致蛋白质的合成增加;Ox-LDL可能是动脉粥样硬化中炎症的始发原因之一。     

泡沫细胞形成过程中TOLL样受体4表达的变化

目的：研究人单核细胞系在分化为巨噬细胞及转化为泡沫细胞过程中 TOLL 样受体4(TLR-4)表达的改变及其机制。方法：体外培养人 THP-1单核细胞系,加入佛波酯(PMA)培养48h 使其分化为巨噬细胞,后者再加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)使转化为泡沫细胞,采用免疫细胞化学、蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链反应 (RT—PCR)方法,检测 TLR-4蛋白表达及 TLR-4mRNA 表达的水平。结果：在单核细胞分化为臣噬细胞的过程中 TLR-4mRNA 及蛋白水平提高,差异具有显著性(P＜0.05)；在进一步转化为泡沫细胞过程中,mRNA 及蛋白水平又增高,与巨噬细胞相比差异有显著性(P＜0.05)。结论：单核细胞分化为泡沫细胞的过程中 TLR-4转录水平上调,蛋白量合成增加,从而可能提高泡沫细胞在动脉粥样硬化中的炎性反应能力。