一种分离提取非实体瘤凋亡细胞的方法

分离提取凋亡细胞对许多研究有重要意义 ,我们参考Ｍａｒｔｉｎ等[1] 的方法 ,建立了一种简便易行的非实体瘤凋亡细胞分离提取方法。1　材料和方法1 1　细胞培养　ＨＬ 6 0细胞株 (本院血液病研究室提供 ) ,常规ＲＰＭＩ 16 40培养基 (Ｇｂｉｃｏ产品 )培养 ,隔天换液 ,所有用于实验的细胞均处于对数生长期。1 2　凋亡细胞诱导　调整细胞浓度至 10 6/ｍｌ,加入以二甲基亚砜 (ＤＭＳＯ)溶解的抗癌药物ＶＰ 16 (Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ ,Ｓｉｇｍａ产品 )至所需浓度 (0、5、10、2 0、40 μｇ/ｍｌ)作用 3 5ｈ ,ＰＢＳ(ｐＨ 7 2 ,不含Ｃａ+ 、Ｍｇ2…     

DPA法检测细胞凋亡及其在白血病中的应用

目的建立一种检测白血病细胞凋亡的新方法。方法高速离心将DNA样品区分为小分子量DNA片段及高分子量DNA(分别来自凋亡和未凋亡细胞)两部分,二苯胺(DPA)法测定各部分DNA含量,计算DNA片段率,从而分析细胞凋亡情况。以此方法分析了白血病细胞株HL-60受不同剂量抗癌药物VP-16诱导时的凋亡情况。结果与FCM法相比,各剂量组细胞凋亡率无显著差别(P＞0.05),经密度梯度离心法分离提取的凋亡细胞,两种方法测得细胞凋亡率亦无明显差别(P＞0.05)。结论二苯胺法测定DNA片段是分析白血病细胞凋亡的一种简单有效方法。     

rTNF_(-α)、IFN_(γ)对人脐静脉内皮细胞表达粘附分子的影响

为了研究细胞因子ｒＴＮＦ α、ＩＦＮγ对内皮细胞表达粘附分子的影响,及ｒＩＦＮγ对ＴＮＦ α的协同效应。采用ｒＴＮＦ α、ＩＦＮγ诱导培养的人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）,以Ｃｅｌ ＥＬＩＳＡ法检测粘附分子ＩＣＡＭ １、ＥＬＡＭ １和ＶＣＡＭ １的表达。结果表明,ｒＴＮＦ α以浓度和时间依赖的方式诱导ＨＵＶＥＣ表达ＩＣＡＭ １、ＥＬＡＭ １和ＶＣＡＭ １,ＩＦＮγ促进ｒＴＮＦ α诱导的ＶＣＡＭ １表达。ＩＦＮ α对ｒＴＮＦ α诱导效应无影响。提示ｒＴＮＦ α可诱导ＨＵＶＥＣ表达粘附分子,而ＩＦＮγ可促进ｒＴＮＦ α诱导的ＨＵＶＥＣ表达ＶＣＡＭ １。     

食管癌血清肿瘤标志物诊断价值的研究

为探讨肿瘤标志物联合检测在食管癌诊断中的临床意义,分别用酶免法（EIA）、酶法、高效液相色谱法（HPLC）等测定了49例食管癌及272例非肿瘤患者的29种血清肿瘤标志物,应用特异性、阳性预期值、敏感性、阴性预期值、总有效率、5项平均值6个指标综合评价各种肿瘤标志物的价值。结果29种肿瘤标志物中,平均排序前6位的是糖类抗原242（CA^242)、精眯（SPM）、腐胺（PU）、肿瘤相关物质群（TSGF）、谷胱甘肽转移酶（GST）、角蛋白－19（CYFRA211）,TSGF、GST和癌胚抗原（CEA）的敏感性为84．62％。其中前二项敏感性为75．51％,三项中任一项阳性所致的特异性为48．68％。提示TSGF、GST、CEA联合检测对食管癌诊断有实用价值。     

性行为、婚姻状况及心理状态与前列腺癌发病危险的病例-对照研究

前列腺癌是欧美国家男性人口最常见的恶性肿瘤,主要危及老年,发病率和死亡率呈逐年上升趋势〔1〕。我国前列腺癌发病率较低,约为欧美国家的1/30～1/20,但近年来发病率也明显增长〔2〕。前列腺癌的病因假说较多,目前均在探讨中〔3〕。本研究试图从性行为、婚姻状况及心理状态等方面,采用1∶3匹配的病例-对照研究,探讨国人前列腺癌发病的危险因素。资料与方法搜集了1997年8月～1999年11月期间济南市五大省级医院中经临床病理组织学确诊的前列腺癌新发病例96例,按1∶3(病例∶对照)进行配比,配比条件是同性别、同民族、年龄相差不超过±5岁。对…     

抗中性粒细胞胞浆抗体及其相关系统性血管炎的研究进展

抗中性粒细胞胞浆抗体 (anti neutrophilcytoplasmicantibody ,ANCA)是指抗中性粒细胞胞浆成份的一类。其靶抗原主要为MPO和丝氨酸蛋白酶 3(PR3)。临床上检测ANCA ,对多种血管炎性疾病有重要意义。与ANCA密切相关的系统性血管炎称之为ANCA相关系统性血管炎 ,ANCA在其发病机制中有重要作用。本文主要对ANCA相应抗原的特性及其不同相应血管炎的比较 ,ANCA在ANCA相关系统血管炎 (AASV)发病机制中的作用及其检测方法等方面进行了综述     

血清C反应蛋白测定在冠心病中的应用

C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是人体被细菌感染或者组织创伤后反应最为敏感的一种急性相蛋白.近年来发现,CRP与多种疾病有关,有学者认为它是一个未被充分利用的指标[1].为探讨血清CRP水平与冠心病(CHD)发生发展及预后的关系,我们对98例冠心病患者进行了CRP及有关血液指标的测定,现报告如下:     

VP—16对HL—60细胞凋亡的影响

为探讨ＨＬ 6 0细胞分化与凋亡的关系 ,我们在诱导ＨＬ 6 0细胞凋亡[1 ] 的基础上 ,仍以鬼臼乙叉甙 (ＶＰ 16 )为凋亡诱导剂 ,选择全反式维甲酸 (ａｌｌ ｔｒａｎｓｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ ,ＡＴＲＡ)等作为分化诱导剂 ,对经不同分化诱导剂诱导分化的ＨＬ 6 0细胞的凋亡情况进行了初步研究。1　材料和方法1 1　细胞培养 :ＨＬ 6 0细胞培养按参考文献 1的方法。1 2　药物处理 :1 2 1　诱导分化组 :调整细胞浓度至 5× 10 5 ｍＬ ,分别加入0 1ｍｇ ＬＶＰ 16 (Ｓｉｇｍａ产品 ,ＤＭＳＯ配制 )、5× 10 - 7ｍｏｌ ＬＡＴＲＡ(上海第六制药…     

检测白血病细胞凋亡的二苯胺法

现有细胞凋亡的定量方法操作复杂且需贵重试剂或仪器。定性方法又难以精细研究细胞凋亡这一现象。我们参照 Mangan等 [1]的方法 ,建立一种以二苯胺 (DPA)法测定 DNA片段率来分析细胞凋亡的简单方法 ,并以此方法分析白血病细胞株 HL- 60受抗癌药物鬼臼乙叉甙 (Etoposide)诱导时的凋亡情况。材料和方法一、细胞HL- 60细胞株 (本院血液病研究室提供 ) ,常规RPMI 1 640培养基 (Gbico产品 )培养 ,隔天换液 ,实验选用对数生长期的细胞 ,将细胞浓度调整至 1 0 6/ml,加入以二甲基亚砜 (DMSO)溶解的鬼臼乙叉甙(Sigma产品 ) ,最终浓度分别为 …     

检测白血病细胞凋亡的二苯胺法

现有细胞凋亡的定量方法操作复杂且需贵重试剂或仪器。定性方法又难以精细研究细胞凋亡这一现象。我们参照Mangan等［1］的方法，建立一种以二苯胺(DPA)法测定DNA片段率来分析细胞凋亡的简单方法，并以此方法分析白血病细胞株HL-60受抗癌药物鬼臼乙叉甙(Etoposide)诱导时的凋亡情况。 材料和方法 一、细胞 HL-60细胞株(本院血液病研究室提供)，常规RPMI 1640培养基(Gbico产品)培养，隔天换液，实验选用对数生长期的细胞，将细胞浓度调整至106/ml，加入以二甲基亚砜(DMSO)溶解的鬼臼乙叉甙(Sigma产品)，最终浓度分别为0、5、10、20、40 μg/ml，作用3.5 h，用PBS(pH 7.2，不含Ca2＋、Mg2＋，下同)洗涤收获细胞。