563株肺炎克雷伯杆菌临床分布及耐药性分析

目的调查我院2006年1月至2010年12月分离的肺炎克雷伯杆菌的耐药趋势,为临床治疗提供可靠依据。方法收集送检标本中分离的肺炎克雷伯杆菌株,按全国临床检验规程分离鉴定,并采用KB法进行药敏试验,用WHONET5.4软件进行统计分析。结果本院5年间共分离出563株肺炎克雷伯杆菌,以痰标本分离率最高(64.48%)。肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为0%,对氨苄青霉素的耐药率高达98%以上;对庆大霉素、头孢呋肟钠、头孢西丁的耐药率总体上呈上升趋势。结论对肺炎克雷伯杆菌进行及时鉴定和药敏分析,把握其耐药趋势,可有效指导临床合理用药。     

抗-D抗体产生人群Rh分型与输血安全探讨

目的 探讨产生红细胞同种抗-D抗体的Rh阴性湖北汉族人群Rh分型分布特征及输血安全。方法 对968例确认为Rh阴性的人群进行抗体鉴定,对检出红细胞同种抗-D抗体的人群进行Rh分型,并分析其接受Rh阴性或Rh阳性含红细胞血制品输注时产生其他抗-Rh抗体的产生风险。结果 在确认为Rh阴性的968例人群中检出红细胞同种抗-D抗体103例,其抗-D抗体发生率为10.4%;在产生抗-D抗体人群检出ccee和Ccee两种Rh分型,以ccee为最常见,约为79.7%（82/103）;该人群接受Rh阴性或Rh阳性血制品输注导致抗-Rh类抗体产生风险最高分别为17.93%、33.89%;该人群接受Rh分型不一致血制品输注所产生的抗-Rh类抗体主要为抗-C。结论 产生红细胞同种抗-D抗体的Rh阴性人群接受Rh分型不一致血制品输注时有产生红细胞同种抗体的风险;在有条件且非紧急情况下,该人群可接受Rh分型一致的血制品输注。     

200例乙型肝炎患者HBV基因型分布及临床意义

目的探讨200例武汉地区乙型肝炎病毒（HBV）感染者病毒基因型的分布及其与肝病严重程度的相关性。方法采用半巢式PCR对200例来自武汉地区的乙肝病毒感染者血浆HBV进行扩增后,Sanger测序法进行基因分型。结果200例HBV血浆样本的基因型分布为B型142例（71．0％）,C型55例（27．5％）,D型1例（O．5％）和B／C混合型1例（O．5％）,B／F／G混合型1例（O．5％）。在基因型B和基因型C中,无症状携带HBV患者、轻中度慢性乙肝患者、重度肝炎及肝硬化患者、肝癌患者的构成比分别为：37．32％,44．37％,14．08％,4．23％和23．64％,36．36％,21．82％,18．18％,两种基因型在肝病严重程度中的构成比差异有统计学意义（P〈O．05）。结论分离的200例HBV样本基因型以B,C为优势基因型,且基因型与HBV感染者发生肝病的严重程度有显著相关性。     

EDTA抗凝标本保存条件和时间对微柱凝胶法检测血型的影响

目的 探讨不同保存条件下保存时间对微柱凝胶法检测血型的影响。方法 随机选取体检健康人群128例EDTA-K2抗凝标本室温保存,另128例EDTA-K2抗凝标本4℃保存,观察开始溶血和完全溶血时间,对未溶血标本、部分溶血和完全溶血标本分别用微柱凝胶法进行血型鉴定。结果 EDTA抗凝标本在室温和4℃条件下保存1周均无溶血发生;第14天时,常温保存标本约有1/3开始溶血,4℃保存标本只有少量发生溶血;常温保存标本第35天时均完全溶血,而4℃保存标本第77天时均完全溶血。标本未溶血时,正反定型结果均清晰可见;标本发生部分溶血时,正定型结果无影响,反定型结果有影响;标本完全溶血时,正反定型结果均有严重影响。结论 在室温和4℃条件下,EDTA抗凝标本的最佳保存时间为1周,此时用微柱凝胶法检测血型不受影响;常温标本保存35天内、4℃标本保存77天内,对反定型有影响,此时用微柱凝胶法检测血型须谨慎; 常温标本保存超过35天、4℃标本保存超过77天则不宜用微柱凝胶法检测血型。     

结核感染T细胞斑点试验对结核病治疗效果的监测价值

目的：探讨结核感染T细胞斑点试验对结核病治疗疗效的监测意义。方法本研究采用T-SPOT.TB试剂盒,检测T细胞中γ-干扰素对结核分支杆菌特异性多肽类早期分泌性抗原靶标6-kD(ESAT-6)和培养滤液蛋白(CFP-10)的应答,对比113例结核感染者治疗前与治疗后T-SPOT.TB结果的变化,其结果根据对该试验中两种抗原的联合与各自应答来分析。结果113例感染者在治疗后T-SPOT.TB结果转阴者有42例(37.2%)。其中,CFP-10转阴率占48.9%(P<0.001),ESAT-6转阴率占20.0%(P=0.238)。ESAT-6的斑点形成细胞(SFCs)/2.5×105外周血单核细胞(PBMCs)的平均数在治疗前和治疗后分别为18.47和16.29(P=0.16),而CFP-10的SFCs/PBMCs的平均数在治疗前和治疗后分别为22.83和15.31(P<0.01)。结论结核病治疗对于T细胞中γ-干扰素引起的ESAT-6和CFP-10抗原应答影响不同,CFP-10的定量应答才是结核病治疗的更有效监测手段。     

铜绿假单胞菌1238株对碳青霉烯类抗生素耐药性分析

目的调查武汉大学人民医院近5年铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率及其变迁情况。方法收集临床分离的铜绿假单胞菌进行培养并行药敏试验。结果分离出铜绿假单胞菌的标本以痰为主(74.80%),主要分布于神经外科(20.27%)和呼吸内科(13.00%)。2006—2010年铜绿假单胞菌对亚胺培南的耐药率依次为17.4%、38.1%、55.5%、27.8%、37.9%(P0.01),对美罗培南的耐药率依次为11.1%、41.0%、41.5%、23.3%、33.1%(P0.01)。结论铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药率自2006—2008年呈明显上升趋势,2008—2010年有所下降,临床应根据药敏结果合理用药,以减少和延缓耐药菌株的产生。     

血清降钙素原对老年人感染性疾病的诊断价值

目的 评价血清降钙素原(PCT)对老年人感染性疾病的诊断价值.方法收集在武汉大学人民医院诊治的老年患者的血清标本,行降钙素原检测,并与微生物培养结果进行比较分析.结果 感染组PCT浓度为(4.48±13.09)ng/ml,高于非感染组(0.07±0.02)ng/ml(t=5.31,P＜0.05).细菌感染组、真菌感染组、混合感染组PCT浓度分别为(9.97±21.65)ng/ml,(5.92±8.82)ng/ml,(14.13±21.41)ng/ml,三组间PCT浓度差异无统计学意义(t=1.08,P=0.284;t=-0.80,P=0.425;t=-2.14,P=0.064),若以血清PCT≥0.115 ng/ml为诊断感染的阳性临界值,其敏感度、特异度分别为77.80％,93.80％.结论 血清PCT检测敏感度高于培养,对老年感染患者具有重要的早期、快速诊断价值.     

乙型肝炎病毒逆转录酶基因突变的临床意义

目的 分析服用核苷酸类似物的乙肝患者逆转录酶(RT)基因突变模式及其与生化指标的相关性,探讨该基因突变的临床意义。方法 采用半巢式PCR对634例来自武汉地区的乙肝病毒感染者血浆HBV进行扩增后,Sanger测序法进行基因序列分析; 将RT基因突变组与野生组和各表型突变组中患者的谷氨酸氨基转移酶(ALT)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和HBV DNA阳性率作比较。结果 在测序成功的622例患者中,144例(23.15%)发生RT基因突变。他们在11个位点(rtM204,rtL180,rtA181,rtN236,rtV173,rtL80,rtM250,rtS202,rtV207,rtV214和rtV84)出现碱基突变。在突变组中,患者的ALT,HBeAg和HBV DNA阳性率显著高于非突变组(P<0.05)。表型分析显示:拉米夫定(LAM)耐药最常检测到,占52.78%,其次为阿德福伟(ADV)耐药占27.78%和恩替卡韦(ETV)耐药占6.94%,多重耐药LAM+ADV于18例患者中检出12.5%。多重耐药组患者ALT,HBeAg和HBV DNA阳性率高于其他耐药组(P<0.05); ADV耐药组患者ALT,HBeAg和HBV DNA阳性率高于LAM,ETV耐药组。结论 HBV RT区域的突变形式与血清学指标ALT,HBeAg和HBV DNA阳性状态有显著关联,该基因的突变形式可用作患者临床表现的指示指标。     

乙型肝炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种采用Lightcycler系统进行HBVDNA实时荧光定量PCR的方法,并探讨其临床应用价值。方法针对HBV基因组S区设计一对扩增引物,并通过预实验严格优化反应体系的组成和条件;将T载体与HBVRT区扩增后纯化的产物进行连接反应,然后转染大肠杆菌（DH5a）,经蓝、白斑筛选后挑取阳性菌落,提取质粒,制备外标准品。结果用于制成外标准品的质粒经1：10的缓冲液倍比稀释,制作标准曲线,线性方程为：Y=-3．344X＋37（r2=0．9999）;通过检测已知浓度并经倍比稀释的HBVDNA,表明其最低检测限为5×10^2 IU／mL;拷贝数介于5×10^2～5×10^8 IU／mI。之间的HBVDNA浓度与ct值具有良好的线性关系。结论外标法实时荧光定量PCR是一种定量相对准确、灵敏度高、特异性强、操作相对简便的方法;该方法可用于乙型肝炎患者病情监测,有效指导临床用药;联合该法与血清标志物检测,可更准确评价HBV感染者病情。