平卧菊三七提取物抗氧化活性研究与抗氧化特征成分的HPLC-MS/MS分析

目的:采用DPPH体系测定平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物的抗氧化活性,并利用液质联用(HPLC-MS/MS)技术分析了活性较高的乙酸乙酯部位的抗氧化特征性成分。方法:对平卧菊三七地上部分提取物用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水部位。考察平卧菊三七地上部分不同极性部位提取物对清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的能力以及通过液质联用电喷雾四级杆飞行时间质谱仪(HPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对其活性部位中的化学成分进行定性分析。采用液质联用(LC-MS/MS),C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱,使用ESI负离子模式下采集数据。通过质谱数据分析,并与对照品及文献对照,对其进行成分鉴定。结果:平卧菊三七地上部分不同极性提取物对DPPH自由基都具有清除力,其中乙酸乙酯部位的清除能力最强。通过其质谱数据分析,并与对照品及相关文献对照,共鉴定出11个化合物。结论:应用DPPH抗氧化活性筛选及HPLC-ESI-Q-TOF-MS技术能够快速准确地发现平卧菊三七地上部分抗氧化活性成分,为进一步研究平卧菊三七的药效物质基础提供参考。     

板蓝根有效部位的抗病毒药效研究

目的?考察板蓝根不同提取部位单独使用和组合使用后抗甲型流感病毒A/PR8/34(H₁N₁)的活性。方法?采用体内抗甲型流感病毒A/PR8/34(H₁N₁)试验,比较板蓝根不同有效部位的抗甲型流感病毒作用。结果?板蓝根提取物Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅵ组、Ⅶ组、Ⅷ组和Ⅸ组可明显延长甲型流感病毒(H₁N₁)感染小鼠后的存活天数,与模型组比较具有明显差异（P<0.05,P<0.01）。板蓝根提取物Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅵ组和Ⅶ组对甲型流感病毒(H₁N₁)感染的小鼠的保护作用较强,与模型组比较具有显著性差异（P<0.05）。结论?板蓝根提取物Ⅰ组、Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅵ组、Ⅶ组、Ⅷ组和Ⅸ组对甲型流感病毒(H₁N₁)感染的小鼠具有一定的保护作用,以板蓝根提取物Ⅲ组、Ⅴ组、Ⅵ组和Ⅶ组作用较佳。      

甜菜碱促进小鼠脾淋巴细胞增殖作用的钙通道机制研究

目的:研究甜菜碱促进小鼠脾淋巴细胞的增殖作用与钙通道的关系.方法:采用清洁级BALB/c小鼠分离小鼠脾淋巴细胞后体外培养的方式获得小鼠脾淋巴细胞,分为阴性对照组、Con A组、甜菜碱0.04,0.4,4,20 mmol·L~(-1)组.分别采用MTT法观察甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞增殖的作用,流式细胞术测定甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞周期的变化,激光共聚焦扫描显微镜观察甜菜碱对小鼠脾淋巴细胞内钙浓度的变化及加入不同钙通道阻滞剂后细胞内钙浓度的变化.结果:4,20 mmol·L~(-1)甜菜碱体外作用于小鼠脾淋巴细胞12 h促进小鼠脾淋巴细胞增殖,0.04,0.4,4,20 mmol·L~(-1)甜菜碱分别体外作用于小鼠脾淋巴细胞24,48 h均促进小鼠脾淋巴细胞增殖,以4 mmol·L~(-1)甜菜碱作用24 h效果最好;4 mmol·L~(-1)甜菜碱作用小鼠脾淋巴细胞4,6,18,24 h能促使小鼠脾淋巴细胞由G_0/G_1期进入S期,并以18 h效果最为明显;4 mmol·L~(-1)甜菜碱作用于淋巴细胞6,12,18 h,脾淋巴细胞内Ca~(2+)浓度明显升高(P＜0.01),以6 h效果最明显;钙通道阻滞剂硝苯地平、地尔硫卓、咪贝地尔、金雀异黄素对甜菜碱升高小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度没有影响,而维拉帕米、新霉素、肝素、普鲁卡因能阻断甜菜碱升高小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度.结论:甜菜碱通过升高小鼠脾淋巴细胞内钙离子浓度而促进小鼠脾淋巴细胞由G_0/G_1期进入S期,促小鼠脾淋巴细胞增殖的作用.细胞内钙离子浓度升高主要通过2个途径:影响G蛋白介导的L-型电压门控钙通道的α_1亚单位而引起外钙内流;影响胞内钙库的IP_3R钙通道和RyR钙通道而引起内钙释放.     

通光藤化学成分及抗肿瘤活性研究

目的 提取分离并筛选通光藤中具有抗肿瘤活性的化学成分,并研究其化学结构。方法 系统溶剂法对通光藤药材进行化学部位分离,并利用色谱法对正丁醇部位中的化学成分进行分离和纯化,利用波谱学方法鉴定其化学结构。MTT法筛选所得化学成分体外对8种人癌细胞增殖的抑制作用。结果 在通光藤正丁醇部位中得到3个化学成分单体分别为：牛奶菜醇（化合物1）、通光藤苷元B（化合物2）、大叶牛奶菜苷丁（化合物3）,化合物2对于MGC-803肿瘤细胞抑制作用较强,IC50为80.3μg.mL 1,而化合物3对于ISMMC-7721肿瘤细胞液表现出较强抑制作用,IC50为40.7μg.mL 1。结论 化合物2为首次在该植物中分离到的苷元成分。化合物2、3体外对肿瘤细胞具有显著的抑制活性。     

药学专业有机化学教学体会

有机化学是一门实践性、理论性较强的重要基础课,其涉及范围广,渗透至各学科,并且为后续的药物分析、药物化学和天然药化等课程的学习奠定了坚实的基础[1].对于药学专业学生来讲,毕业后应具备药学领域从事科研、生产、管理和新技术研究、新产品开发的实际工作能力,所以更需要有活跃的思维与独特的创新能力.学生在有限的学习时间内应掌握本门学科的基本规律,即熟悉有机化合物基本类型的结构、性能、合成方法以及它们之间相互联系的规律和理论.     

海嘧啶对细胞膜功能及细胞凋亡影响的研究

[目的]研究海嘧啶对细胞膜功能以及肿瘤细胞凋亡的影响,阐明海嘧啶抗肿瘤作用机制。[方法]海嘧啶给予S180、H22荷瘤小鼠,观察其红细胞及肿瘤细胞膜功能变化及肿瘤细胞凋亡的情况。细胞膜功能实验测定红细胞膜免疫黏附肿瘤细胞能力、红细胞膜和肿瘤细胞膜上唾液酸含量、红细胞膜和肿瘤细胞膜的封闭度。细胞凋亡实验用流式细胞仪检测细胞分期和凋亡细胞的比例。[结果]海嘧啶对肿瘤细胞和红细胞膜功能均有影响,主要表现在:使荷瘤小鼠红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力有明显提高;可提高红细胞膜唾液酸含量而降低肿瘤细胞膜唾液酸含量;可提高红细胞膜封闭度的同时降低肿瘤细胞膜的封闭度。海嘧啶具有一定程度上的诱发细胞凋亡的作用,不同剂量海嘧啶对细胞周期有不同的影响,小剂量海嘧啶使肿瘤细胞主要集中在G0-G1期,随着剂量的加大,停滞于G2-M期的肿瘤细胞增多。[结论]海嘧啶抗肿瘤作用机制存在多种途径,体现在提高红细胞免疫功能、降低肿瘤细胞膜功能和具有一定程度的诱发肿瘤细胞凋亡的作用。     

中药花蕊石炮制前后宏微量元素分析

目的:考察花蕊石生品及煅制品宏微量元素含量及炮制前后微量元素变化情况,探讨花蕊石功效物质基础及炮制基理。方法:利用电感耦合等离子体发射光谱及原子吸收光谱,分析比较各产地花蕊石生品和炮制品的微量元素含量差异以及炮制前后的变化情况。结果:花蕊石各产地的生、煅品中Ca、Mg、Al、Fe元素含量均较高,尤其是Ca元素含量最高;生品经高温煅制后,Ca、Mg、Al、Fe元素含量均有一定程度的升高,而Cu、Zn、Pb等重有害金属元素含量显著下降。     

甜菜碱对HepG2人肝癌细胞周期及凋亡的影响

目的 研究甜菜碱对HepG2人肝癌细胞周期及细胞凋亡的影响.方法 MTT法测定甜菜碱对HepG2的细胞毒作用;PI染色,流式细胞术观察甜菜碱对HepG2人肝癌细胞周期及细胞凋亡的影响.结果 甜菜碱对HepG2细胞的IC50为0.5mol/L;甜菜碱使HepG2细胞G2/M期比例下降;甜菜碱作用于HepG2细胞24h后,3个不同剂量组(0.1、0.2、0.4mol/L)诱导细胞凋亡率分别为(7.5±0.9)%、(11.5±1.1)%、(33.9±1.2)%,48h后凋亡率为(13.4±1.9)%、(20.9±1.4)%、(67.8±1.8)%.结论 甜菜碱可抑制人肝癌细胞HepG2的生长,阻滞细胞进入G2/M期进而诱导细胞凋亡.     

板蓝根醇提部位化学成分研究

目的:从板蓝根中分离化学成分。方法:板蓝根95%乙醇提取物经硅胶吸附,不同溶剂洗脱部分经硅胶柱层析反复分离纯化,测定所得化合物的理化常数和波谱数据,鉴定其化学结构。结果:从氯仿部位分得5个化合物,从正丁醇部位分得1个化合物,分别鉴定为:胆甾醇(Ⅰ)、靛蓝(Ⅱ)、靛玉红(Ⅲ)、对羟基苯甲醛(Ⅳ)、水杨酸(Ⅴ)、落叶松脂素-4,4′-2-O-β-D-二葡萄糖苷(Ⅵ)。结论:化合物Ⅰ、Ⅳ为首次从板蓝根药材中分离,具有一定的参考价值。     

板蓝根多糖的结构特征及活性研究

目的:研究和分析板蓝根多糖的化学结构和生物活性.方法:板蓝根水提醇沉后经柱色谱分离纯化,得多糖;采用高效凝胶色谱法(HPGPC)测定各均一多糖的纯度和平均相对分子质量,经UV,IR,NMR,高碘酸氧化和Smith降解法研究各多糖的化学结构,MTT法检测各多糖对巨噬细胞的刺激增殖作用.结果:分离纯化得到板蓝根多糖A,B,C,D,E,各多糖的平均相对分子质量分别为＞2 000 kDa,1 757.1,1 342.7,955.6,11.7 kDa.板蓝根多糖A主要由阿拉伯糖组成,多糖E的单糖组成主要为阿拉伯糖和半乳糖,多糖B,C,D均由葡萄糖组成.多糖A,B,C,D,E主要为α糖苷键.多糖A～E中存在1→2,1 →3,1→4,1→6多种糖苷键的连接方式.板蓝根多糖C,D,E,对巨噬细胞的刺激增殖指数(SI)分别为5.31,4.76,5.17表现出较强的免疫促进作用.结论:板蓝根多糖A～E为首次从该植物中分离得到的分支多糖.