从微生物实验室技能考核看质量控制

通过对实验室技能考核中盲样菌株鉴定过程的分析，表明实验室内的质量控制是实验室检测能力的保障。     

新型甲型H1N1流感病毒的实验室检测

目的利用RT-PCR技术,建立并优化快速、敏感、特异的检测新型甲型H1N1流感病毒的方法,并进行初步应用。方法设计高度特异性引物,优化常规RT-PCR和Real-time Fluores-cent Quantitative PCR反应体系,并对2009年惠州市流感样病例咽拭子标本进行甲型H1N1流感病毒RNA的检测。结果荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR方法均有较高的特异性,与季节性H1N1、H3N2和B型流感病毒等无交叉反应,两种PCR检测结果的一致率达到99.5%以上,均能快速准确检测出患者咽拭子标本的甲型H1N1流感病毒,且荧光定量RT-PCR最低模板检测限在0.5pg以下。结论常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR不仅特异性高,而且比病毒分离法更敏感、简便和快速,适合甲型H1N1流感病毒的快速检测,为早期诊断、定量分析甲型H1N1流感病毒感染程度奠定基础。     

2010年惠州市流行性感冒监测结果分析

目的监测惠州市流行性感冒（流感）流行状况和流感病毒优势株的变化,探索惠州市流感流行规律。方法在惠州市流感国家级哨点医院,对符合流感样病例定义的病例进行采样,采用实时荧光定量PCR对标本进行流感病毒核酸检测,并通过＂中国流感监测信息系统＂录入相关信息,使用SPSS分析软件进行统计分析。结果 2010年惠州市甲型H1N1流感哨点监测流感病毒核酸检测阳性率为2.75%,男性阳性率为15.93%,女性阳性率为17.41%,1~8月以乙（B）流感病毒为优势毒株,7~11月以甲（A）季H3N2为优势毒株,而新型H1N1流感主要集中在1月、7月和8月。各型（或亚型）间流感病毒核酸检测阳性率差异有统计学意义,各型（或亚型）流感病毒核酸检测阳性率男女间比较差异有统计学意义,各型（或亚型）流感病毒核酸检测阳性率不同月份比较差异有统计学意义,不同年龄组间流感病毒核酸检测阳性率不同,监测数据显示,随着年龄段的递增,流感病毒核酸检测阳性率基本显示负相关的关系。结论 2010年惠州市流感监测医院的流感样病例全年均有发生,以春、夏季为高发季节。2010年惠州市的主要流行株为H3N2亚型和B型流感毒株。     

惠州市公共场所军团菌污染状况调查

目的为了解惠州市公共场所的中央空调冷却塔水、温泉水军团菌污染状况。方法随机采集中央空调冷却塔水、温泉水进行细菌培养和军团菌的分离与鉴定。结果共采集水样117份,检出19株嗜肺军团菌,检出率为16.24%。冷却塔水嗜肺军团菌检出率为19.44%,温泉水嗜肺军团菌检出率为11.11%。结论惠州市部分中央空调冷却塔及温泉水存在军团菌的污染,需要加强对军团菌的监测,防止军团菌病的发生。     

惠州市集中空调军团菌污染现状及人群感染调查报告

目的:了解惠州市军团菌的污染现状及人群军团菌的感染程度,为制定预防和控制军团菌感染策略提供依据.方法:采用分离鉴定与ELISA方法,对惠州市186份集中空调冷却塔水进行军团菌分离鉴定,对215例暴露人群及152例对照人群进行军团菌抗体IgG检测.结果:本次调查集中空调嗜肺军团菌检出率为51.3%,共检出62株嗜肺军团菌,其中,LP1型37株、LP2～LP14型25株;215份暴露人群中检出军团菌抗体阳性29份,阳性率13.4%,152份对照人群中检出军团菌抗体阳性7份,阳性率4.6%.结论:惠州市集中空调冷却塔水中军团菌污染现状较为严重,已对暴露人群的健康造成潜在威胁,对这一潜在传染来源应采取立体、有效防范措施.     

2011-2016年某市吸毒人群HIV、梅毒螺旋体及丙肝病毒感染现状

目的 了解惠州市吸毒人群HIV、梅毒螺旋体及丙肝病毒的感染情况,为开展干预工作和制定相关预防措施提供依据。 方法 对惠州市2011-2016年2 543名吸毒人员进行问卷调查,收集人口学和行为学情况资料,并采集血样进行HIV、HCV、梅毒抗体检测。 结果 共调查2 543名吸毒人员,20~40岁男性所占比例较大;2011-2016年注射吸毒人员比例下降,非注射吸毒人员比例上升(χ²_趋势=179.272 6, P<0.05); HIV年均感染率为1.06%,性别间差异无统计学意义(χ²=0.028, P>0.05);梅毒年均感染率为6.41%,女性明显高于男性且差异有统计学意义(χ²=65.035, P<0.05);丙肝年均感染率为39.36%,男性高于女性且差异有统计学意义(χ²=4.278, P<0.05);HIV感染率年度间变化差异无统计学意义(χ²=7.045, P>0.05),梅毒和丙肝感染率呈逐年下降趋势(梅毒χ²_趋势=15.094, P<0.05;丙肝χ²_趋势=112.791, P<0.05)。 结论 继续加强对吸毒人群宣传干预和针具交换项目的开展,大力推广100%使用安全套的同时,要加强对新型毒品使用人群的重视和女性吸毒者的干预;本地区多年对吸毒人群的艾滋病防治策略是有效和成功的,下一步艾滋病防治工作重点人群可以有所调整。     

惠州市人群SARS冠状病毒抗体血清学调查

目的 分析惠州市各类人群SARS病毒IgG抗体流行情况。方法 抽取惠州市某门诊健康体检人群、医务工作人员、学生、学龄前儿童血清标本共2367人份，采用酶联免疫方法进行SARS病毒IgG抗体检测。结果 2367份样本，SARS病毒IgG抗体阳性率为1．1％(6／2367)，主要集中在少年儿童人群。健康体检人群样本1028人份，其中厨师样本54人份，检出结果均为阴性。学龄前儿童(0～6岁)阳性率为4．0％(20／501)。医务工作人员和学生(7～14岁)阳性率分别为0．32％(1／311)和0．95％(5／527)。结论 通过对人群SARS-CoV抗体的监测，可以预测SARS的流行趋势，及早作好预防措施。     

2009—2011年惠州市253例手足口病患儿病原学分析

目的了解2009—2011年惠州市手足口病流行的病原及流行情况。方法采集253份2009—2011年手足口病患儿的标本,采用荧光定量PCR法对患者标本进行核酸检测,对部分结果阳性的样品进行基因序列分型。结果253份样品中,总肠道病毒核酸（PE）检测阳性156份,其中CoxAl6核酸阳性41份,EV71核酸阳性92份;2009年手足口病流行的病原以CoxAl6型为主（69．0％）;2010年和2011年均以EV71型为主（分别为78．1％和67．5％）;30份EV71型病毒的基因测序分型均为EV71-C4a型,2例EV阳性病例标本的病原基因型为ECH03型;肠道病毒阳性率6岁以下儿童占阳性病例的93．5％（146／156）,3岁以下幼童占阳性病例的73．0％（114／156）。结论本地区2009年手足口病流行的病原以CoxAl6型为主,2010年和2011年以EV71型为主,3年流行的EV71病原基因型主要为EV71-C4a型,在其它肠道病毒阳性的标本中检出基因型为ECH03的病原;3岁以下的幼童为EV71感染的高危人群,在夏秋季节做好手足口病的防控工作很有必要。     

实时荧光PCR检测基孔肯雅病毒方法的建立及初步应用

目的 建立基孔肯雅病毒的荧光定量PCR检测方法.方法 针对基孔肯雅病毒的基因序列,设计、合成引物、探针及反应体系,摸索出最佳反应条件,建立TaqMan荧光探针法和SYBR荧光染料法.利用建立的方法对30例基孔肯雅热病标本和10份基孔肯雅病毒保存液进行扩增、检测和结果分析,并与常规RT - PCR方法的检测结果进行比对.结果 实时荧光定量PCR法比常规RT - PCR法快速、灵敏.40份标本TaqMan荧光探针法、SYBR荧光染料法和常规RT - PCR方法的阳性率分别为:17.5％、17.5％、15％.统计分析表明,3种方法差异不具有统计学意义.结论 实时荧光定量PCR方法快速且具有较好的特异性、敏感性、重复性,适用于基孔肯雅病毒的快速检验.     

113例男性HIV-1抗体阳性吸毒者蛋白免疫印迹带型分析

目的分析HIV-1抗体阳性吸毒者的WB带型,了解惠州市男性吸毒人群WB带型的分布特征。方法对本实验室2007～2010年的HIV-1抗体确证检测阳性男性吸毒者的WB带型进行统计分析。结果 113份HIV-1抗体确证检测阳性男性吸毒者的WB带型中,gp160、gp120带型的出现率均在100%,p66、p51、gp41、p31、p24带型的出现率均在96%以上,p55,p17带型的出现率分别为71.68%和80.53%;WB全带型出现率为59.30%（67/113）;不同年龄组带型差异无统计学意义。结论抗env和gag基因编码蛋白的抗体gp160、gp120、gp41、p24阳性率高,是确证HIV-1感染的必备条件;惠州市的HIV亚型、传播途径和WB带型之间的关系有待进一步的调查和研究。