维生素D受体在糖尿病肾病足细胞损伤及蛋白尿缓解中的作用

目的探讨维生素D受体(VDR)在糖尿病肾病(DKD)足细胞中的表达水平及在足细胞损伤及蛋白尿缓解中的作用。方法(1)本研究纳入了65例诊断患有2型糖尿病(伴或不伴蛋白尿)的患者,并纳入了25例年龄和性别相匹配的健康体检者为对照组。根据白蛋白/肌酐(ACR)的尿排泄比例对2型糖尿病患者进行分组,分别为无蛋白尿(ACR<30 mg/g,n=24)、微量白蛋白尿(ACR 30~300 mg/g,n=18)和临床蛋白尿(ACR>300 mg/g,n=23)。另选择25例经肾活检确诊的DKD患者作为DKD组。正常肾脏组织标本均取自泌尿外科同一时期肾脏肿瘤切除患者10例。将各组检测指标进行对比,同时采用实时定量PCR、ELISA法和免疫组化法检测VDR在各组患者的血液、尿液样本和肾脏组织中的表达情况,以及使用Pearson相关分析分析VDR与尿蛋白的相关性。(2)在2型糖尿病肾病小鼠模型中对上述结果进行验证,将遗传背景均为C57BLKs/J的雄性db/db小鼠及同窝出生的db/m小鼠,随机分为正常对照组(A组)、DKD对照组(B组)、DKD二甲基亚砜处理组(C组)、DKD帕立骨化醇(VDR激动剂)处理组(D组),C、D组连续腹腔注射处理8周,对照组不做任何处理。小鼠10周龄时开始连续干预8周,在小鼠22周龄(开始干预后12周)检测各组小鼠体重、血、尿生化指标对比;Western印迹法检测β⁃catenin、VDR的变化;免疫荧光观察足细胞标志蛋白podocin及足细胞损伤蛋白α⁃SMA的表达变化。结果(1)与正常健康对照组相比,无蛋白尿组、微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组的糖尿病患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低(均P<0.05);与无蛋白尿组的糖尿病患者相比,微量白蛋白尿组和临床蛋白尿组的糖尿病患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低(均P<0.05)。(2)与正常健康对照组相比,无蛋白尿糖尿病组和DKD组患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平均较低(均P<0.05);与无蛋白尿糖尿病组患者相比,DKD组患者血浆中VDR的mRNA和蛋白水平亦较低(均P<0.05)。(3)免疫组化结果显示,DKD组肾组织中VDR的表达明显少于正常对照组。(4)DKD患者血浆中VDR mRNA相对水平与ACR呈负相关(r=-0.342,P<0.05)。(5)各组尿液上清液中VDR的水平与血浆中的水平呈相反趋势。(6)Western印迹结果显示,B组、C组肾小球足细胞β⁃catenin蛋白表达高于D组(均P<0.05),VDR蛋白的表达低于D组(均P<0.05);免疫荧光结果显示,B组、C组肾小球足细胞podocin的表达低于D组(均P<0.05),α⁃SMA的表达高于D组(均P<0.05)。结论VDR高表达缓解DKD足细胞损伤及蛋白尿。     

系统性红斑狼疮合并横贯性脊髓炎临床治愈1例

系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus ，SLE）是一种常见的自身免疫性疾病，常出现多器官多系统损害。横贯性脊髓炎（transaverse myelopathy ，TM ）是SLE累及中枢神经系统的一种少见且严重的并发症，临床治愈率低，国内外报道病例少见，现将我院收治的1例典型病例报道如下。     

抗环瓜氨酸肽抗体在风湿性多肌痛与老年发病类风湿关节炎鉴别诊断中的意义

风湿性多肌痛（polymyalgia rheumatica,PMR）是病因不明的炎症性疾病.部分老年发病类风湿关节炎（elderly-onset rheumatoid arthritis,EORA）患者存在PMR样临床表现,有时与PMR不容易鉴别.近年来的研究发现,抗环瓜氨酸肽（cyclic citrullinated peptide,CCP）抗体诊断类风湿关节炎（RA）有较高的敏感性和特异性.本研究随访一组PMR患者血清抗CCP抗体,并结合影像学检查,了解该抗体在PMR与EORA鉴别诊断中的意义.     

低氧诱导因子1α在白蛋白过负荷致肾小管上皮细胞转分化中的作用

长期蛋白尿可致肾脏纤维化,细胞外基质(ECM)的主要来源之一是转分化的肾小管上皮细胞(TEC)[1],因此上皮细胞-间充质细胞转分化(EMT)是蛋白尿患者肾脏纤维化的主要机制之一。低氧诱导因子1(HIF-1)可诱导多种细胞转分化[2]。本研究检测大鼠TEC(NRK-52E细胞)在含高浓度牛血清白蛋白(BSA)的培养基中是否发生转分化,以及shRNA- HIF -1α能否抑制BSA致NRK-52E细胞转分化的作用,以探讨HIF- 1α在蛋白尿致肾脏纤维化中的作用。     

血管紧张素Ⅱ、内皮素1及缺氧诱导因子1α在糖尿病肾病肾组织的表达及意义

血管紧张素(Ang)Ⅱ和内皮素1(ET-1)是重要的致炎及纤维化因子,且2者间存在交互作用[1],共同参与糖尿病肾病(DN)肾间质纤维化(RIF)的进程.缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是组织缺氧时表达增多的产物.AngⅡ可使肾小管上皮细胞中HIF-1α的表达增加,而ET-1是HIF-1α的下游基因,3者之间密切关联.本研究采用免疫组化技术检测AngⅡ、ET-1及HIF-1α在DN患者肾组织中的表达,探讨其与肾脏损害的关系,为进一步阐明DN的发病机制提供依据.     

Expression of Angiotensin Ⅱ,endothelin 1 and hypoxia inducible factor 1α in renal tissue of diabetic nephropathy patients and its significance

血管紧张素(Ang)Ⅱ和内皮素1(ET-1)是重要的致炎及纤维化因子,且2者间存在交互作用[1],共同参与糖尿病肾病(DN)肾间质纤维化(RIF)的进程.缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是组织缺氧时表达增多的产物.AngⅡ可使肾小管上皮细胞中HIF-1α的表达增加,而ET-1是HIF-1α的下游基因,3者之间密切关联.本研究采用免疫组化技术检测AngⅡ、ET-1及HIF-1α在DN患者肾组织中的表达,探讨其与肾脏损害的关系,为进一步阐明DN的发病机制提供依据.     

维持性血液透析患者外周动脉疾病及危险因素分析

目的通过测量踝肱指数调查维持性血液透析患者下肢外周动脉疾病的患病率及危险因素。方法纳入我院血液净化中心179例维持性血液透析患者,对其进行问卷、体格检查、实验室检查及踝肱指数测量。以任何一侧踝肱指数〈0．90作为下肢外周动脉疾病的诊断标准,分析其患病率及危险因素。结果我院血液净化中心下肢外周动脉疾病的患病率为12．8％（23／179）,男女患病率无差异。年龄大于65岁患者外周动脉疾病患病率为18．9％,低于65岁患者为8．6％。高三酰甘油血症患者外周动脉疾病患病率为18．7％,非高三酰甘油血症患者为7．7％。有脑血管疾病患者比无脑血管疾病患者外周动脉疾病患病率高（33．3％：11．3％,P〈0．05）。Logistic分析显示,年龄（优势比为1．036-1．276,P=0．009）、慢性肾脏病病程（优势比1．003～1．018,P=0．007）、脑血管疾病（优势比2-202．19,P=0．011）为外周动脉疾病的独立危险因素。结论维持性血液透析患者外周血管疾病患病率较高,年龄、慢性肾脏病病程及脑血管疾病史为此人群外周血管疾病的独立危险因素。     

血清可溶性晚期糖基化终产物受体水平与系统性红斑狼疮疾病活动度的相关性

目的探讨可溶性晚期糖基化终产物受体(soluble receptor for advanced glycation end-products,sRAGE)在系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)疾病活动度评价中的价值。方法收集2013年6月至2014年6月郑州大学第一附属医院SLE患者的临床及流行病学资料,观察血清sRAGE浓度与SLE疾病活动度的相关性。结果 SLE组、非活动SLE组、活动SLE组和健康对照组sRAGE浓度分别为(1 060.16±762.59)、(912.06±759.98)、(1 232.96±736.16)、(1 300.42±466.01)pgml;SLE组与健康对照组sRAGE浓度差异有统计学意义(Z=-2.891,P=0.004),非活动SLE组、活动SLE组与健康对照组sRAGE浓度差异有统计学意义(χ2=17.999,P=0.000)。血清sRAGE浓度在SLE疾病活动指数≥10(Z=-3.052,P=0.002)和抗双链-DNA抗体滴度≥100(Z=-2.276,P=0.023)者中更高。血清sRAGE浓度与SLE疾病活动指数≥10(r=0.373,P=0.000)呈正相关。结论通过检测血清sRAGE浓度能够评价SLE患者疾病活动度,为制定临床治疗方案提供依据。     

探讨罗格列酮对减轻环孢素A所致慢性肾毒性的作用及机制

目的 探讨罗格列酮(RGZ)对减轻环孢素A(CsA)所致慢性肾毒性的作用及机制.方法 选择健康、雄性SD大鼠,给予低盐饮食,饲养1周后,随机分成4组.(1)对照组(6只):除低盐饮食外,不给予任何处理;(2)岁格列酮组(6只):低盐饮食,并给予RGZ 5 mg·kg-1·d-1;(3)肾毒性模型组(8只):低盐饮食,并给予CsA 15 mg·kg-1·d-1;(4)治疗十预组(8只):低盐饮食,并给予CsA15 mg·kg-1·d-1和RGZ 5 mg·kg1·d-1.于实验的第2周,每组随机处死3只大鼠,实验的第5周,处死其余的大鼠.检测各组大鼠处死前的内生肌酐清除率(Ccr)和血清白蛋白(ALB)含量;观察各组肾组织的病理学变化;检测各组肾组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的表达水平.结果 实验第2周,肾毒性模型组和治疗干预组的Ccr及ALB含量均显著下降,第5周下降更为显著,与对照组和罗格列酮组比较,差异有统计学意义(P<0.05);治疗干预组Ccr及ALB下降程度较肾毒性模型组轻,第5周时的Ccr与肾毒性模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05).实验第2周,肾毒性模犁组的肾问质可见大量炎症细胞浸润,第5周时,肾小管明显萎缩,肾小球硬化,问质纤维化程度加重;治疗十预组肾组织的损害程度明显较肾毒性模型组轻.肾毒性模型组和治疗十预组在实验的第2周和第5周MMP-9和TIMP-1的表达水平均较对照组和罗格列酮组明显增加(P<0.05),但治疗干预组MMP-9和TIMP-1的表达水平均显著低于同时段肾毒性模型组(P<0.05).结论 罗格列酮可显著降低CsA所致慢性肾毒性大鼠MMP-9和TIMP-1的表达水平,从而减轻CsA对肾脏的慢性毒性作用.     

慢性马兜铃酸肾病大鼠贫血发生的机制

目的 探讨慢性马兜铃酸肾病（CAAN）贫血的发生机制。 方法 用62只SD大鼠筛查血红蛋白（Hb）,求正常值。随机选择24只Hb正常的大鼠,分为对照组及模型组,各12只,后者予关木通浸膏水溶液间断灌胃制作CAAN模型。在给药前及8周末,分别检测两组各6只大鼠体质量、Hb、尿蛋白量（24 h）及肌酐清除率（Ccr）,然后处死大鼠,留取肾组织做Masson染色观察肾间质纤维化程度;实时定量PCR法检测肾组织中红细胞生成素（EPO）mRNA表达;免疫组化染色观察肾组织中Ⅰ型胶原（ColⅠ）、氨基肽酶P（APP）、低氧诱导因子（HIF）1α及2α的蛋白表达。 结果 大鼠的正常Hb值为（155.9±16.5） g/L,低于123.6 g/L为贫血。给药前,对照组与模型组间各指标的差异均无统计学意义。8周末时,与对照组比较,模型组大鼠Hb和Ccr显著下降[（121.66±15.68） g/L比（169.00±12.89） g/L,（0.63±0.13） ml/min比（1.27±0.18） ml/min];尿蛋白量（24 h）显著增多[（27.04±9.40） mg/d比（6.11±0.84） mg/d];肾间质纤维化相对面积及ColⅠ相对面积显著增加[（12.89±2.33）%比（0.55±0.10）%,（13.92±2.92）%比（1.32±0.84）%];肾组织APP蛋白表达和EPO mRNA表达显著下调 [（0.55±0.23）%比（3.77±1.06）%,0.005±0.001比0.032±0.013];HIF-1α和HIF-2α蛋白表达显著上调 （2.55±0.16比1.12±0.46,2.33±0.33比1.15±0.27）（均P < 0.01）。 结论 CAAN的贫血发生可能与肾小管周毛细血管毁坏所导致的EPO产生减少有关,虽然HIF表达已代偿性增强,但仍未能阻止贫血发生。