淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨组织OPG、 OPGL mRNA表达的影响

目的：探讨淫羊藿总黄酮（totalflavoneofepimedium,TFE）治疗骨质疏松症的分子机制,为传统中药的现代化和二次开发提供实验依据。方法：将60只4月龄健康雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组（A组,20只,行假手术处理）,去卵巢纽（OVX组,20只,切除卵巢后不给予淫羊藿处理）,淫羊藿组（TFE纽,20只,切除卵巢后给予淫羊藿灌胃）。所有大鼠术前及术后4周以DEXA骨密度仪检测L4骨密度变化（若BMD下降〉20％,则骨质疏松模型建立）。模型建立后TFE组大鼠给予淫羊藿总黄酮（浓度30mg／ml,10ml／kg,1次／d）灌胃4周。所有大鼠处死前再行DEXA骨密度检测,过量麻醉法处死后取其股骨下部,切片匀浆提取骨组织中RNA,应用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测骨组织护骨素（osteoprotegrin,OPG）、护骨素配体（0PGL）mRNA的表达。结果：①TFE组大鼠切除卵巢4周后,腰椎BMD均值降至（0．084±0．020）g／cm^2,降幅〉20％证明骨质疏松模型建立。TFE灌胃4周后其腰椎BMD提高至（0．112±0．009）g／cm^2,与给药前比较有明显改善,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TFE组大鼠骨组织中OPGmR—NA的表达较OVX组相比,明显增强,且有统计学差异（P〈0．05）,但对OPGLmRNA表达促进作用不明显,组间无统计学差异（P〉0．05）。结论：TFE是通过促进骨组织中OPGmRNA的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,从而达到治疗骨质疏松症的目的。     

新型骨质疏松大鼠骨生物力学测试方法:股骨干骺端弯曲试验

 目的 建立一种新的骨生物力学测试方法用以评价去卵巢骨质疏松大鼠股骨干骺端生物力学的变化。方法 20只 5月龄雌性 SD大鼠随机分为去卵巢组和假手术组。术后 12周, 对全部大 鼠进行股骨骨密度和股骨远端骨组织计量学测定。所有大鼠取一侧股骨行中段三点弯曲试验, 另一侧 股骨行干骺端弯曲试验, 测定生物力学指标(最大载荷、屈服载荷、刚度)。对各生物力学指标和骨密度 及骨组织计量学指标行 Pearson相关分析。结果 去卵巢组股骨骨密度、骨组织计量学指标(骨小梁面 积百分比、骨小梁数量、骨小梁厚度)和生物力学参数(最大载荷、屈服载荷、刚度)较假手术组均明显降 低。在股骨干骺端弯曲试验中, 两组最大载荷和屈服载荷的差值明显大于三点弯曲试验所得的相应差值。 Pearson相关分析显示骨生物力学各参数与骨密度、骨组织计量学指标均呈正相关, 且股骨干骺端 弯曲试验的生物力学参数与骨密度、骨组织计量学指标的相关性明显强于股骨干三点弯曲试验。结论 建立了新型骨质疏松大鼠骨生物力学测试方法, 即股骨干骺端弯曲试验, 可用来评估去卵巢骨质疏松 大鼠股骨干骺端生物力学性能, 与股骨干三点弯曲试验相比, 其敏感度更高, 与骨密度和骨组织计量学 参数的相关性更强。     

步态分析法评价发育性髋关节脱位手术治疗后的功能

目的 通过三维步态分析的生物力学方法评价发育性髋关节脱位手术治疗后的患儿步态功能.方法 选择2010年5月至2012年11月广州市妇女儿童医疗中心22例(27侧)手术治疗的髋关节脱位患儿,年龄3～10岁,平均5.3岁;男9例,女13例.开放复位后18个月,应用美国mo-tion公司三维运动分析系统进行步态分析.每次测量要求至少有3个步长长度,步速恒定.将骨盆、髋、膝、踝关节共设置15个点,并连接成面,建成三维动态图像.结果 手术后骨盆、髋关节、膝关节、踝关节活动与正常儿童比较存在统计学差异.单侧患儿术后患侧骨盆高度较健侧低;骨盆前倾不足;患侧髋关节在术后屈曲不足,并且有明显外旋,术后双膝摆动相屈膝峰值降低;患侧足轻度内旋.术后在行走过程中三联截骨组骨盆较Pemberton截骨组与Salter截骨组显著下降;骨盆在Pemberton截骨组较Salter截骨组显著前倾和向患侧旋转;行走速度、步频、步长与正常儿童比较无明显差异.手术髋站立前中期伸髋力矩减小,产能减少.结论 发育性髋关节脱位开放手术后患儿的速度、步频、步长与正常儿童无差异.在整个步态周期中,术侧髋关节屈曲不足;在负重期患侧骨盆降低,骨盆降低程度三联截骨较pemberton截骨与salter截骨程度更大.     

雌激素对运动防治骨质疏松效果的影响

目的 探讨雌激素对运动防治骨质疏松效果的影响.方法 48只5个月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、假手术加运动组(Sham+run组)、单纯去卵巢组(Ovx组)、去卵巢加运动组(Ovx+run组)、去卵巢加运动加1/4雌激素组(Ovx+run+e1组)和去卵巢加运动加雌激素组(Ovx+run+e2组).其中Ovx+run+e1组和Ovx+run+e2组于术后1周开始皮下注射不同剂量的己烯雌酚,Ovx+run+e1组剂量为0.025mg/kg,1次/4d;Ovx+run+e2组为0.025mg/kg,1次/d,持续12周.Sham+run组、Ovx+run组、Ovx+run+e1组、Ovx+run+e2组于术后1周开始采用大鼠专用跑笼进行运动训练12周.术后13周行股骨远端骨密度和生物力学测量,并对胫骨近端进行骨组织计量学测量.结果 (1)Ovx组股骨远端骨密度值最低[(0.10±0.01)g/cm2],与其他各组相比差异有统计学意义(均P＜0.05);Ovx+run+e2组与Sham+run组骨密度值相当[分别为(0.14±0.02)g/cm2和(0.13±0.02)r/cm2],均显著高于其他各组(均P＜0.05);Sham组、Ovx+run组和Ovx+run+e1组之间骨密度值差异无统计学意义[(0.11±0.01)g/cm2比(0.12±0.01)g/cm2比(0.12±0.01)g/cm2,均P＞0.05].(2)Sham组骨小梁的厚度、骨小梁面积百分比和骨小梁数量与Ovx+run+e2组、Sham+run组差异无统计学意义,且均高于Ovx+run+e1组、Ovx+run组和Ovx组(均P＜0.05);而骨小梁分离度在Sham组、Ovx+run+e2组和Sham+run组之间差异也无统计学意义,但低于Ovx+run+e1组、Ovx+run组和Ovx组(均P＜0.05).骨小梁面积百分比和骨小梁数量:Ovx组＜Ovx+run组＜Ovx+run+e1组(均P＜0.05);骨小梁分离度:Ovx组＞Ovx+run组＞Ovx+run+e1组(均P＜0.05);骨小梁厚度在3组间差异无统计学意义.(3)Ovx组极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变、剪切弹性模量明显低于其他各组(均P＜0.05).Ovx+run+e2组的极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变与Sham+run组相当,均高于其他各组(均P＜0.05);剪切弹性模量则与Sham+run组、Ovx+run组相当,均高于Sham组、Ovx组、Ovx+run+e1组(均P＜0.05).Sham组、Ovx+run+e1组与Ovx+run组极限剪切载荷、剪切强度极限、最大剪应变之间差异均无统计学意义.Sham组剪切弹性模量小于Ovx+run组(P＜0.05),但Sham组与Ovx+run+e1组、Ovx+run+e1组与Ovx+run组之间差异无统计学意义.结论 雌激素水平对运动防治骨质疏松的效果有显著影响.雌激素充足,对运动防治骨质疏松效果起协同作用;雌激素不足,则对运动防治骨质疏松效果无协同作用.     

牵引在闭合复位治疗儿童发育性髋关节脱位中的作用的多中心回顾性研究

目的 探讨双下肢牵引在儿童发育性髋关节脱位(DDH)闭合复位中的作用.方法 回顾性分析我国南方7家医院2004年1月至2014年6月采用闭合复位治疗的DDH患儿的临床资料.共有302例(333髋)符合纳入标准,其中,男40例,女262例;单侧271例,双侧31例.平均年龄(16.5±5.1)个月,平均随访时间(38.0±18.0)个月.牵引组227例,非牵引组75例.比较两组患儿Tonnis分度、再脱位发生率、股骨头坏死(AVN)、末次随访髋臼指数(AI)、中心边缘角(CE角)和Severin影像学分级.结果 非牵引组平均住院时间(5.1±2.6)d,显著短于牵引组(16.2±7.5)d(P＜0.001).术前牵引组的平均Tonnis分度显著高于非牵引组(P=0.021).333髋中有23髋(6.9％)出现再脱位,牵引组的再脱位发生率为8.7％,非牵引组的再脱位发生率为1.3％,两者差异有统计学意义(P=0.022).在Tonnis Ⅱ度的患儿中,牵引组和非牵引组的再脱位发生率差异无统计学意义.在Tonnis Ⅲ～Ⅳ度的患儿中,牵引组的再脱位发生率显著高于非牵引组(P=0.027).牵引组AVN发生率为17.4％,非牵引组AVN发生率为26.3％,两者差异无统计学意义(P =0.083).同样,根据Tonnis分型分别比较牵引和非牵引组之间的AVN发生率,结果差异也无统计学意义.牵引和非牵引组之间AVN的分型差异也无统计学意义(P=0.076).牵引组和非牵引组之间的AI值和CE角差异均无统计学意义(P＞0.05).两组之间Severin影像学分级差异无统计学意义(P =0.559).结论 牵引不能降低DDH闭合复位术后再脱位的发生率,不能减少AVN的发生率,也不能改善DDH闭合复位的最终治疗效果.     

儿童发育性髋关节脱位闭合复位术后髋关节恢复正常X线表现影响因素的多中心回顾性研究

目的探讨发育性髋关节脱位(developmental dislocation of the hip,DDH)闭合复位术后髋关节恢复正常影像学表现的概率及其影响因素。方法回顾性分析2004年1月至2015年12月采用闭合复位石膏固定治疗的507例(586髋)DDH患儿的病历资料。其中,男50例,女457例;左侧259髋,右侧164髋,双侧163髋。通过X线片评估T?nnis脱位程度分级、股骨头坏死(avascular necrosis of the femoral head,AVN)(Bucholz/Ogden分型)、髋臼指数(acetabular index,AI)和中心边缘角(center-edge angle,CEA)。尝试建立髋关节恢复正常X线的参考标准,并按该参考标准将患儿分为恢复组(200髋)和未恢复组(386髋),对比分析两组患儿的年龄、性别、侧别、T?nnis分级、骨化核出现、术前和末次随访的AI和CEA、AVN和Severin分级。采用Cox回归分析、t检验、卡方检验、方差分析研究影响DDH闭合复位术后髋关节恢复正常影像学的概率以及影响因素。结果末次随访时,200髋(34.1%)恢复正常髋关节X线,78髋(13.4%)出现了Ⅱ型及以上AVN。年龄≥24个月患儿恢复率为8.8%(3/34),显著低于<12个月患儿的44.3%(47/106)、12~18个月患儿的35.5%(98/276)和18~24个月患儿的30.6%(52/170),组间差异有统计学意义(P=0.001)。恢复组双侧髋关节脱位患儿的恢复率为27.0%(44/163),明显小于左侧髋关节脱位患儿的39.0%(101/259)和右侧髋关节脱位患儿的33.5%(55/164),差异有统计学意义(P=0.04)。恢复组术前AI(34.8°±4.2°)显著小于未恢复组(36.0°±4.6°),组间差异有统计学意义(P<0.01)。Cox回归分析显示,术后5.5年前累积恢复概率大致呈线性增长至56%,此后累积恢复概率的增速明显降低(年增长<5%)。复位年龄大于24个月、双侧脱位、术前AI≥40°和Bucholz/OgdenⅡ型以上AVN患儿的累积恢复概率明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。200髋的平均恢复时间为(36.5±14.9)个月,其中93%(186/200)的髋关节在术后5年内恢复。恢复组年龄≥24个月患儿的恢复时间为(55.2±28.0)个月,显著大于<12个月患儿的(32.2±18.0)个月、12~18个月患儿的(36.9±11.9)个月和18~24个月患儿的(38.6±15.1)个月,差异有统计学意义(P<0.05)。T?nnisⅡ级患儿的髋关节恢复时间(32.8±15.7)个月显著小于T?nnisⅢ、Ⅳ级患儿的40.2个月和40.7个月,差异有统计学意义(P<0.05)。结论DDH闭合复位术后5.5年内髋关节恢复正常X线表现的累积概率呈线性增长,此后到达平台期。年龄大于24个月、双侧脱位、术前AI>40°和AVN是影响DDH闭合复位术后髋关节恢复正常X线的风险因素。复位年龄大于24个月、T?nnisⅢ/Ⅳ度会显著增加髋关节恢复至正常的时间。     

儿童发育性髋关节脱位切开复位手术后髋关节功能不满意的风险因素分析

目的研究发育性髋关节脱位(developmental dysplasia of the hip,DDH)切开复位术后髋关节功能不满意的风险因素。方法回顾性分析2008年1月至2015年12月我院收治的采用切开复位治疗且符合纳入标准的63例(76髋) DDH患者临床资料,平均手术年龄(48.8±26.3)个月。按手术方式分为单纯切开复位组、骨盆Salter/Pemberton截骨组以及骨盆三联截骨组。通过X线片评估患髋术前的骨性髋臼指数(acetabular index,AI)、Tnnis分级、术后AI、中心边缘角(center edge angle,CEA)、股骨头缺血性坏死(avascular necrosis of the femoral epiphysis,AVN)和Severin影像学评级。根据患髋的功能评估结果确定髋关节是否存在关节功能不满意,并分析年龄、性别、侧别、术前AI、Tnnis分级、治疗方式(骨盆截骨方式和股骨截骨)、AVN与DDH术后髋关节功能不满意之间的关系。结果末次随访时,22髋(28.9%)出现关节功能不满意。关节功能不满意组的年龄[(53.9±23.0)]个月显著大于功能满意组[(42.4±23.9)]个月,差异有统计学意义(P=0.036)。单纯切开复位组的关节功能不满意发生率(0%)显著低于骨盆Salter/Pemberton截骨组(34.8%)和骨盆三联截骨组(35.3%),差异有统计学意义(P=0.039)。有股骨截骨的患者髋关节功能不满意发生率(38.5%)显著高于无股骨截骨者(8.3%),差异有统计学意义(P=0.013)。18髋(23.7%)出现AVN,有AVN的患者关节功能不满意发生率(64.7%)显著高于无AVN组(19.3%),差异有统计学意义(P=0.001)。术前AI、性别、侧别、Tnnis脱位程度分级与关节功能不满意的发生率无关。结论骨盆截骨、股骨截骨、AVN是导致DDH切开复位术后髋关节功能不满意的风险因素。     

TNF-α在骨质疏松性疼痛中的作用

目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)在骨质疏松性疼痛中的作用。方法:40只5月龄Sparague-Dawley(SD)雌性大鼠随机分为假手术组(sham组,16只)和去卵巢组(Ovx组,24只)。Ovx术后第5周开始应用上下法(up-down method)和撤尾法(tail withdrawtest)对2组大鼠进行疼痛行为测量,每周1次。术后第8周每组分别杀死8只大鼠,取腰5背根神经节,用免疫荧光方法检测腰5背根神经节中TNF-α的表达。Ovx组剩余的16只大鼠再随机分成Ovx-1组和Ovx-2组,其中Ovx-2组予腹腔注射TNF-α合成抑制剂沙利度胺(50mg/kg,每天1次);Ovx-1组和sham组则分别注射等量的生理盐水。继续应用上下法和撤尾法对sham、Ovx-1、Ovx-2组进行疼痛行为测量至术后10周结束。结果:(1)术后第5、6、7、8周,Ovx组机械刺激疼痛阈值及热刺激的撤尾潜伏期均显著低于sham组(P0.01);术后第9、10周,注射沙利度胺的Ovx-2组其机械刺激疼痛阈值和热刺激的撤尾潜伏期与sham组无显著差别(P0.05),而显著高于Ovx-1组(P0.05)。(2)Ovx组腰5背根神经节中TNF-α的表达显著高于sham组,差别显著(P0.01)。结论:TNF-α可能在绝经后骨质疏松性疼痛中发挥重要作用,并可能通过作用于背根神经节引起痛觉敏感,抑制TNF-α的合成可缓解绝经后骨质疏松性疼痛。     

降钙素促进骨质疏松骨床中植入体的骨整合

背景：降钙素具有提高骨量、骨质量,降低骨折发生的效果。 目的：评价鲑鱼降钙素对羟基磷灰石植入体骨整合的影响,及其在治疗骨质疏松症同时促进植入体生物学固定的能力。 方法：将SD大鼠随机分为假手术+羟基磷灰石棒组、卵巢切除+羟基磷灰石棒组、卵巢切除+降钙素+羟基磷灰石棒组,后2组建立绝经后骨质疏松动物模型。建模后分别在3组大鼠的胫骨平台处开孔植入多孔羟基磷灰石假体,卵巢切除+降钙素+羟基磷灰石棒组大鼠皮下注射鲑鱼降钙素12周。 结果与结论：卵巢切除后,大鼠的腰椎骨密度降低,而持续皮下注射鲑鱼降钙素后,大鼠的腰椎骨密度逐渐改善。应用降钙素处理后的大鼠,其骨结合率较卵巢切除+羟基磷灰石棒组提高了22.0%(P < 0.05)。结果证实,全身给予鲑鱼降钙素能提高骨质疏松大鼠骨床和植入体周围骨量、促进主体骨-植入体的骨整合。