动脉粥样硬化狭窄模型的建立及NF-κB、IGF的表达

目的 :建立动脉粥样硬化狭窄 (Atherosclerosis,AS)动物模型并探讨影响AS形成、发展的分子生物学方面的机制。方法 :10只大耳白兔 ,高脂饲料喂饲一周后 ,采用颈动脉为逆行入径 ,将球囊导管顺行插入并随机至一侧髂动脉远端 ,使其内膜损伤 ,(另一侧不损伤 ,作为对照 ) ,高脂喂养 6周后建立髂动脉AS狭窄模型 ,并通过影像学、病理学光镜、电镜及免疫组化分析证实 ,并观察核因子 κB(nuclearfactor κappaB ,NF κB)、胰岛素样生长因子 1(insulin likegrowthfactor 1,IGF 1)的免疫组织化学分析。结果 :模型组动脉造影显示平均狭窄度 6 9 0± 19 12 % ;HE染色示内膜明显增厚至管腔偏心性狭窄 ,增厚内膜主要由泡沫细胞、平滑肌细胞组成 ,内弹力膜分离断裂 ,中膜平滑肌细胞迁移入内膜层 ;电镜示膜结构损伤 ,可见凋亡小体 ;免疫组化示NF κB、IGF 1蛋白表达量均高于对照组 (p <0 0 5或p <0 0 0 5 )。结论 :(1)通过球囊损伤血管内膜加高脂饮食成功建立了兔髂动脉AS狭窄模型 ,多数为偏心、局限性的 4 0 %～ 10 0 %的狭窄 ,模型确切、可靠、是用于经皮冠状动脉腔内成形术 (per cutaneoustransluminalcoronaryangioplasty ,PTCA)的理想动物模型 ;(2 )NF κB及其靶基因IGF 1的激活与AS病变的发生与发展密切相关     

放射治疗对兔髂动脉粥样硬化狭窄成形术后再狭窄的影响

目的：探讨^32P液体球囊血管近距离照射预防血管成形术后再狭窄的量效关系及其抑制再狭窄发生的可能机制。方法：24只大耳白兔，采用髂动脉内膜损伤加高脂饲养6周，建立兔双侧髂动脉粥样硬化狭窄模型，随机选择一侧髂动脉血管成形术并分别给与9．1Gy、21.8Gy和33．4Gy^32P液体球囊血管照射治疗，另一侧髂动脉灌注造影剂，作为自身对照。术后5周行血管造影并取材进行光镜观察、电镜观察、核因子-κB（NF—κB）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）免疫组织化学染色，用计算机图像分析测量新生内膜面积、中膜面积、管腔面积及免疫组化染色阳性面积百分比。结果：对照组血管段内膜明显增生，管腔明显狭窄；9．1Gy组未观察到明显的生物效应；21．8Gy组血管壁平滑肌细胞增殖和迁移明显受抑，管腔面积无明显丢失；33．4Gy组管腔重度狭窄，内膜严重增厚，中膜平滑肌明显萎缩变薄，4例血管腔内血栓形成。结论：^32P液体球囊在一定的吸收剂量范围内确可安全有效地防止血管成形术后再狭窄形成，其机制可能为是抑制新生内膜形成和管腔面积丢失；抑制NF-κB及其靶基因的活化，从而抑制血管平滑肌细胞的增殖、迁移，促进平滑肌细胞凋亡以及抑制血管负性重塑。     

XIAP修饰的脂肪间充质干细胞在心肌梗死治疗中的作用

目的 探讨XIAP修饰的脂肪间充质干细胞(ADMSCs)是否具有更强的活力,能否更好地恢复心功能,及基因修饰干细胞治疗模式的可行性.方法 10周的雄性SD大鼠,体质量200 ～ 300 g,取其腹股沟处脂肪组织,提取脂肪间充质干细胞行体外培养扩增.应用电转染的方法将XIAP表达质粒导入脂肪干细胞内,进行基因修饰.另取61只SD大鼠,年龄和体质量同前,顺序编号,按照随机数字表法完全随机分为对照组(18只)、ADMSCs组(18只)、XIAP修饰ADMSCs组(18只)和未处理组(7只).结扎大鼠冠状动脉左前降支,选取梗死中央及边缘区共5个注射点,按分组每点注射生理盐水、ADMSCs悬液或经XIAP修饰的ADMSCs悬液或不做任何处理.结果 注射4周后,同对照组相比,ADMSCs组的左心室射血分数明显改善[(0.57 ±0.05)对(0.53±0.03),P＜0.05],心肌梗死面积百分比显著减小[(5.17±2.03)对(10.62±3.50),P＜0.05];与ADMSCs组相比,XIAP修饰的ADMSCs对心肌梗死的治疗作用更为明显,射血分数0.64±0.03,心肌梗死面积百分比3.26±0.95,P＜0.05.结论 ADMSCs能有效恢复梗死后心功能;XIAP修饰的ADMSCs在移植区的生存效率更高,能更好的恢复心功能.     

32P放射性球囊血管内照射预防血管成形术后再狭窄的剂量学研究

目的探讨32P液体球囊血管内照射预防血管成形术后再狭窄的量效关系,及其抑制再狭窄发生的可能机制. 方法取24只大耳白兔,建立兔双侧髂动脉粥样硬化狭窄模型,随机选择一侧髂动脉血管成形术并分别给予9.1Gy、21.8Gy和33.4Gy32P液体球囊血管照射治疗,另一侧作为自身对照.术后5周行血管造影并取材进行光镜、电镜观察,增殖细胞核抗原(PCNA)、抑癌基因P53免疫组织化学染色,用计算机图像分析其组织形态学改变. 结果9.1Gy组未观察到明显的生物效应;21.8Gy组血管壁平滑肌细胞增殖和迁移明显受抑,管腔面积无明显丢失;33.4Gy组管腔重度狭窄,内膜严重增厚,中膜平滑肌明显萎缩变薄,4例血管腔内血栓形成.结论32P液体球囊在一定的吸收剂量范围内确可安全有效地防止血管成形术后再狭窄形成,其机制可能为抑制新生内膜形成和管腔面积丢失;促进平滑肌细胞凋亡以及抑制血管负性重塑.     

重组腺病毒Ad-hBNP对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡因子及Ⅱ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的观察外源基因人B型利钠肽对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法 30只慢性心力衰竭模型大鼠,随机分为携带人B型利钠肽基因重组腺病毒组(Ad-hBNP组,14只)、重组空白腺病毒组(Ad-Track组,8只)、生理盐水组(NS组,8只),分别给予腹腔注射人B型利钠肽基因重组腺病毒、重组空白腺病毒及生理盐水1mL,每周1次,共4周。另设10只未造模但实行了假手术的大鼠为假手术组;4周后处死大鼠,行RT-PCR检测心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA含量。结果 Ad-hBNP治疗后,Ad-hBNP组大鼠心肌组织Bcl-2mRNA表达较Ad-Track组及NS组升高;BaxmRNA表达较假手术组升高;Caspase-3mRNA表达较Ad-Track组、NS组及假手术组均升高。Ad-hBNP组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较Ad-Track组降低。结论间断给予Ad-hBNP能够影响慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡相关基因的表达,减少心肌细胞间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。     

西拉普利和缬沙坦对大鼠心肌梗死后心肌间质成分水平的干预研究

细胞外基质（ECM）是血管壁的主要成分，这些成分的合成和降解与动脉粥样硬化的发生发展密切相关，合成过多可造成血管狭窄，降解过多可诱发斑块破裂。心脏间质细胞（又称ECM成分）主要由Ⅰ型和Ⅲ型胶原构成的纤维网络组成，基质成分合成和降解的平衡受成纤维细胞分泌的基质金属蛋白酶（MMPs）和组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的调节。     

重组腺病毒Ad-hBNP对慢性心力衰竭大鼠血清AgⅡ、Ald、ET、TNF-α含量及心肌重构的影响

B型利钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)是由左室心肌细胞合成和分泌的一种肽类激素,目前血清BNP水平已经成为诊断心衰的一个重要参考指标,对心衰的治疗及预后评估也具有重要的意义.一些基础研究证实BNP具有抗心肌纤维化作用.本研究应用纯化后携带人BNP基因重组腺病毒(Ad-hBNP)腹腔注射治疗慢性心力衰竭(CHF)大鼠,检测血清神经内分泌-细胞因子水平、全心质量指数及心肌胶原含量,观察Ad-hBNP对CHF大鼠心肌重构的影响.     

血管内放射治疗对血管成形术后再狭窄及核因子-кB活性的影响

目的:观察32P液体球囊血管近距离照射预防血管成形术后再狭窄的量效关系及其对核转录因子核因子-кB (NF-кB)活性的影响,以探讨其防治再狭窄的可能作用机制.方法:24只大耳白兔,建立兔双侧髂动脉粥样硬化狭窄模型,随机选择一侧髂动脉血管成形术并分别给予9.1Gy组、21.8Gy组和33.4Gy 组32P液体球囊血管照射治疗(每组n=8),另一侧髂动脉灌注造影剂,作为自身对照(对照组,n=24).术后5周行血管造影并取材进行光镜观察、NF-кB、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)免疫组织化学染色,用计算机图像分析测量新生内膜面积、中膜面积、管腔面积及免疫组化染色阳性面积百分比.结果:①光镜观察: 9.1Gy组:与对照组比病变无明显差异;21.8Gy组:内弹力膜完整无明显断裂;管腔轻度狭窄,新生内膜面积明显减小,内膜层泡沫样细胞及脂质沉积均不明显;中膜平滑肌呈轻度增厚, 排列轻度紊乱;33.4Gy组:内弹力膜破坏,管腔明显狭窄,内膜可见大量泡沫细胞及脂质沉积,大量炎性细胞浸润及细胞外基质不定形物质沉积,中膜平滑肌明显萎缩变薄,其中4例血管腔内可见血栓形成.②免疫组化染色:9.1Gy组:NF-кB、IGF-1蛋白表达与对照组无明显差异(P>0.05);21.8Gy组:NF-кB、IGF-1蛋白表达量中等,呈灶状散在分布于内皮细胞、平滑肌细胞及泡沫细胞,与对照组相比有明显差异(P<0.01);③33.4Gy组:NF-кB、IGF-1蛋白少量表达,呈散在性分布,明显低于9.1Gy组和21.8Gy组(P<0.01).结论:32P液体球囊在一定的吸收剂量范围内确可安全有效地防止血管成形术后再狭窄形成,其机制可能为抑制NF-кB及其靶基因的活化,从而抑制血管平滑肌细胞的增殖、迁移.     

阿托伐他汀对肾功能不全大鼠造影剂诱导的急性肾小管损伤的保护作用

目的探讨非离子低渗造影剂碘海醇对轻度肾功能不全大鼠肾小管的急性损伤作用,以及不同剂量的阿托伐他汀对肾小管损伤的保护作用。方法 36只轻度肾功能不全模型大鼠随机分为模型组、碘海醇组、阿托伐他汀小剂量组(小剂量组)、阿托伐他汀大剂量组(大剂量组),每组9只。另选9只为假手术组。注射后24、72h、7d每组监测血尿素、肌酐、尿液中肾损伤分子1(KIM-1)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平,HE染色观察肾小管结构变化,并计算肾小管损伤危险评分,TUNEL染色检测肾小管细胞凋亡率。结果与模型组比较,碘海醇组72h尿素、各时间点肌酐、KIM-1、NAG、肾小管损伤危险评分、细胞凋亡率明显升高(P<0.05,P<0.01);与碘海醇组比较,大剂量组24h、7d肌酐明显降低(P<0.05),各时间点KIM-1、NAG、肾小管损伤危险评分、细胞凋亡率明显降低(P<0.01)。结论在肾功能不全基础上注射低渗造影剂碘海醇能够对肾小管产生急性损伤作用,造影剂注射前连续给予阿托伐他汀能减轻该损伤,并且大剂量阿托伐他汀该保护作用更强。     

^32P放射性球囊血管内照射预防血管成形术后再狭窄的剂量学研究

目的：探讨^32P液体球囊血管内照射预防血管成形术后再狭窄的量效关系,及其抑制再狭窄发生的可能机制。方法：取24只大耳白兔,建立兔双侧髂动脉粥样硬化狭窄模型,随机选择一侧髂动脉血管成形术并分别给予9．1Gy、21．8Gy和33．4Gy ^32P液体球囊血管照射治疗,另一侧作为自身对照。术后5周行血管造影并取材进行光镜、电镜观察,增殖细胞核抗原(PCNA)、抑癌基因P53免疫组织化学染色,用计算机图像分析其组织形态学改变。结果：9．1Gy组未观察到明显的生物效应;21．8Gy组血管壁平滑肌细胞增殖和迁移明显受抑,管腔面积无明显丢失;33．4Gy组管腔重度狭窄,内膜严重增厚,中膜平滑肌明显萎缩变薄,4例血管腔内血栓形成。结论：^32P液体球囊在一定的吸收剂量范围内确可安全有效地防止血管成形术后再狭窄形成,其机制可能为抑制新生内膜形成和管腔面积丢失;促进平滑肌细胞凋亡以及抑制血管负性重塑。