弹性体生物材料增塑淀粉的细胞毒性实验

背景:普通淀粉经过增塑,强度和弹性大大增加,成为增塑淀粉,该材料分子量巨大、缠绕点多、对小分子具有超强包容性、凝胶化能力强,可作为替代海藻酸盐的可降解材料,并通过加入骨诱导因子.成为具有止血及诱导成骨双重作用的组织工程材料;还可用于口腔组织引导膜、烧伤后皮肤敷料等.目的:通过细胞毒性实验,测试增塑淀粉的生物安全性.设计:观察对比实验.单位:北京市创伤骨科研究所;北京积水潭医院;北京化工大学;北京大学口腔医学院.材料:实验于2006-04/10在北京市创伤骨科研究所细胞实验室完成.增塑淀粉是通过将含水12%的玉米淀粉与一定比例的甘油在哈克密炼机中熔融共混得到的,温度和转速分别为110 ℃和80 r/min,混炼时间25 min,断裂伸长率115.3%～245.3%;由北京化工大学北京市新型高分子材料制备与加工重点实验室研制.实验选用的小鼠成纤维细胞L929细胞株由北京大学医学部细胞库提供.方法:在1×107 L-1 L929细胞悬液中加入增塑淀粉后获得浸提液浓度为50%,对照组为该悬液常规培养液.用MTT比色法定量测试材料对L-929细胞相对增殖率的影响,并根据GB/T16175-1996标准评估细胞毒性.应用倒置显微镜观察两组细胞培养2,4,7d后形态和生长状况.主要观察指标: ①细胞毒性. ②细胞形态及增殖情况.细胞相对增殖率.结果: ①细胞毒性:增塑淀粉组在培养2,4d后A值低于对照组,7 d后的A值高于对照组,差异有显著性意义(P＜0.01),提示培养2,4 d后增塑淀粉组细胞毒性大于对照组,而7 d则相反;实验材料细胞毒性分级为0～1.②细胞形态及增殖情况:培养2 d时两组细胞均未占满视野,细胞形态呈三角、四边形,对照组有梭形细胞;培养4 d时细胞布满视野,细胞生长旺盛.增塑淀粉组细胞间仍有间隙,对照组细胞间无间隙,部分区域细胞出现堆积现象.培养7 d时淀粉组细胞生长出现堆积、重叠现象,生长旺盛度优于对照. ③细胞相对增殖率:细胞培养2,4,7 d后相对增殖率随培养时间延长而升高,分别为85.63%.82.22%,113.05%.结论:增塑淀粉无明显细胞毒性,有良好的生物安全性.     

过敏性支气管哮喘患者外周血T细胞亚群血清免疫球蛋白及白细胞介素－2测定

过敏性支气管哮喘患者外周血Ｔ细胞亚群血清免疫球蛋白及白细胞介素－２测定王丹琪，张冰，夏国光，赵斌，王艳霞，袁润英，王红霞，相东对６０例哮喘患者及３０例健康人外周血Ｔ细胞亚群、免疫球蛋白及白细胞介素－２（ＩＬ－２）活性进行了测定，分析其在哮喘发病过程中...     

变应性鼻炎患者鼻腔灌洗液中白细胞介素5、嗜酸细胞阳离子蛋白水平的动态观察

嗜酸细胞阳离子蛋白 (ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌｃａｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎ ,ＥＣＰ)。白细胞介素 5(ＩＬ 5)是变应性鼻炎 (ＡＲ)炎症形成过程中重要的炎症介质。是反映气道炎症活动的指标之一〔1〕。本实验以鼻部变应原激发试验(ＮＡＣ)前、后 2 4ｈ共 9个时相鼻腔灌洗液中ＥＣＰ、ＩＬ 5浓度为指标 ,观察并比较ＥＣＰ、ＩＬ 5在ＡＲ发病的病理、生理过程中的作用。评价鼻灌洗液分析在ＡＲ研究中的作用。材料与方法病例和对照 :常年性变应性鼻炎 (ＰＡＲ)患者 12例 ,男 7例、女 5例 ,平均年龄 38 7岁 ,病程 2～ 2 2年。未进行过免疫治疗 ,在受…     

免疫抑制剂对嗜铬细胞瘤12细胞和L929细胞增殖的影响

目的 初步探讨多种免疫抑制剂对嗜铬细胞瘤12（pheochromocytoma 12，PC12）细胞和L929细胞增殖的影响。方法 对数生长期PC12细胞和L929细胞传代，取细胞株复苏后第3代细胞均以1×10^6／ml密度接种于培养板中，分别加入10、10、10^-7和10^8mol／L环孢菌素A（cyclosporin A，CsA），10^-6、10^-7、10^-8和10^-9mol／LFK506以及10^-3、10^-4、10^-6和10^-8mol／L甲基强地松龙，并设立空白对照组。于培养24、48和72h后，取各浓度药物作用的细胞，采用MTT法检测细胞增殖。结果 高浓度（10mol／L）甲基强地松龙和较低浓度（10^-8～10^-7mol／L）CsA，在给药后48h内对PCI2细胞增殖有明显促进作用，此后促增殖作用不明显；而各个浓度的FK506均无促进PCI2细胞增殖的作用。高浓度甲基强地松龙（10^-3mol／L）和CsA（10^-6～10mol／L）作用24h后，对L929细胞增殖有显著抑制作用，FK506仅在较高浓度（10^-6mol／L）有一过性（仅出现于给药后48h）促进L929细胞增殖的作用。结论 10^-3mol／L甲基强地松龙和10^-8～10^-7mol／LCsA能够在短时间内促进PC12细胞增殖，而10^-3mol／L甲基强地松龙和10^-6～10^-5mol／L CsA对L929细胞增殖有显著抑制作用。     

变应性鼻炎患者免疫治疗前后IL-5、ECP的动态观察

在变应性鼻炎(AR)的发病过程中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、IL 5都起到了很重要的作用,而特异性免疫治疗能否改善患者体内这些细胞因子的状况,尚未见报道。我们对只有尘螨过敏的13例常年性变应性鼻炎(PAR)患者进行了特异性免疫治疗前、后血清和鼻灌洗液中ECP、IL 5和尘螨SIgE、TIgE的检测,并对其进行了相关的分析及临床意义的探讨。检测对象为只有尘螨皮试阳性的PAR患者13例,男5例、女8例;年龄在18～6 2岁;病程2～2 2年。即往从未进行过免疫治疗,尘螨皮试至少 。病史中也否认对其他物质过敏,在接受特异性免疫治疗期间未接受过…     

多发伤后血清细胞因子水平的动态观察

目的 检测多发伤后血清中各种细胞因子的水平,探讨其意义。方法 研究对象为多发伤创伤病人２０例。于伤１－７天,每日采空腹血样,用双抗体夹心酶联免疫法分别检测血清中肿瘤坏死因子,白细胞介素１β,６及粒细胞集落刺激因子,并进行了动态观察。结果 多发伤组ＴＮＦ－α,ＩＬ－２,ＩＬ－６明显高于对照组,而且在伤情严重的病人中ＴＮＦ－α和ＩＬ－２升高更为明显,Ｇ－ＣＳＦ的升高与严重感染有关。,     

外周血T细胞亚群及细胞因子对外源性哮喘IgE生成的作用

对３０例哮喘患者及３０例健康成年人的外周血，采用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）间接免疫荧光法测定Ｔ细胞亚群；ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定ＩｇＥ、ＩＬ－４；ＦＩ２细胞株，生物学方法测定ＩＬ－２；ＩＬ－６依赖细胞株７ＴＤ１，掺入法测定ＩＬ－６；用抗人ＣＤ２３的ＭｃＡｂ测定ＣＤ２３。为研究Ｔ细胞、细胞因子对哮喘ＩｇＥ生成调节机理及细胞因子在哮喘发病过程中的作用。结果显示：发作期ＩｇＥ、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＣＤ２３、ＣＤ８~＋、ＣＤ４／ＣＤ８~＋比值较对照组及缓解期有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。缓解期ＩｇＥ与对照组之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；ＣＤ８＋、ＣＤ４／ＣＤ８比值，ＣＤ２３与对照组之间有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ＣＤ２３、ＣＤ４、ＩＬ－６三组间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。结果表明，ＩｇＥ合成增加是哮喘发作的关键，Ｔ细胞对日细胞合成ＩｇＥ的调节是通过细胞因子实现的，细胞因子又参与气道炎症过程。     

移植性人骨肉瘤OS-732裸鼠模型的建立

目的建立移植性人骨肉瘤裸鼠模型，为骨肉瘤的提供研究实验模型。方法采取皮下细胞悬液注射法与组织块植入接种法，建立人骨肉瘤裸鼠模型。人成骨肉瘤OS-732细胞株体外传代培养后，将l×10^7细胞悬液注入裸鼠腋后皮下（10只裸鼠），或将已成瘤的瘤组织块接种于裸鼠腋后皮下（10只裸鼠），观察肿瘤生长情况。接种后4周处死裸鼠，剥瘤称重，行病理鉴定。比较两种方法的成瘤率、终末瘤体积及瘤重、肿瘤相对增长率；大体观及病理组织学。结果两组裸鼠接种2周后均有局部肿瘤形成，细胞悬液组成瘤率70％，组织块组成瘤率100％，两组成瘤率差异无显著性（P〉0．05）；两组终末瘤体积及瘤重差异具有显著性（均P〈0．05）。细胞悬液组相对增长率高于组织块组，接种后第16天开始两组肿瘤增长率具有显著性差异（P〈0．05）。病理组织学鉴定符合骨肉瘤镜下特点。结论成功建立了移植性人骨肉瘤裸鼠模型，为临床研究提供了可靠方法。     

氧化新喹对O_S-732细胞系的杀伤作用及超微结构的电镜观察

本文介绍氧化新喹对O_s-732细胞系的体外实脸结果,并以扫描及透射电镜的细胞计量学测算超微结构变化及意义的探讨。当药物浓度达30μg/ml时,对细胞毒性显著,细胞在48小时相继死亡。扫描电镜观察,药物达0.5μg/ml时肿瘤细胞微绒毛大部消失,5～20μg/ml则细胞皱缩碎裂成不规则团块。透射电镜见到核质溶解、线粒体水肿、嵴消失,脆质溶解成空泡、溶酶体增多自溶灭亡。细胞计量学测算溶酶体增大3.3倍导致自溶为本品抑瘤杀伤机理。     

变应性鼻炎患者白细胞介素-4和干扰素-γ检测

１９９６年６月～１９９７年１０月对２８例变应性鼻炎患者的鼻分泌物和血清进行白细胞介素４（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ４,ＩＬ４）和干扰素γ（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎγ,ＩＦＮγ）测定,报道如下。一、对象和方法１．对象：实验组经确诊［１］的变应性鼻炎患者...