盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时β-抑制蛋白-1表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对脓毒症小鼠急性肺损伤时β-抑制蛋白-1表达的影响.方法 健康雌性昆明小鼠30只,体重18～20 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=10):假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)和盐酸戊乙奎醚组(PHCD组).采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型.PHCD组于造模前1h腹腔注射盐酸戊乙奎醚0.45 mg/kg,S组和CLP组给予等容量生理盐水.造模后12 h,收集肺泡灌洗液(BALF),测定总蛋白浓度;取肺组织,行肺损伤评分,测定肺湿/干重(W/D)比和肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)、β-抑制蛋白-1的表达.结果 与S组比较,CLP组和PHCD组肺损伤评分、肺W/D比和BALF总蛋白浓度、肺组织MLCK表达升高,VE-cadherin表达降低,CLP组β-抑制蛋白-1表达降低,PHCD组β-抑制蛋白-1表达升高(P＜ 0.05或0.01);与CLP组比较,PHCD组肺损伤评分、肺W/D比和BALF总蛋白浓度、肺组织MLCK表达降低,VE-cadherin和β-抑制蛋白-1表达升高(P＜0.05或0.01).结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过上调β-抑制蛋白-1的表达,降低肺微血管通透性,从而减轻脓毒症小鼠急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚上调β抑制蛋白-1与M3受体的关系研究

目的 探讨在脂多糖(LPS)致肺微血管内皮损伤中盐酸戊乙奎醚(PHC)上调β抑制蛋白-1(β-arrestin-1)的作用与M3受体的关系.方法 M3 shRNA转染肺微血管内皮细胞和正常肺微血管内皮细胞,分为LPS组(A)、盐酸戊乙奎醚+LPS组(B)、LPS+ M3 shRNA转染组(C)乖盐酸戊乙奎醚+LPS+ M3 shRNA转染组(D),激光共聚焦观察细胞骨架变化,检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,免疫荧光化学法检测血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达,Western blot法和实时定量PCR法检测β-arrestin-1表达.结果 与A组、C组比较,B组、D组肌动蛋白骨架排列整齐,LDH水平和VCAM-1蛋白表达降低,β-arrestin-1表达升高;与A组、B组相比较,C组、D组肌动蛋白骨架排列整齐,LDH水平和VCAM-1蛋白表达降低,β-arrestin-1表达无明显改变.结论 沉默M3受体有助于降低脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞损伤.但盐酸戊乙奎醚上调β-arrestin-1的作用与M3受体是否存在无必然联系.     

盐酸戊乙奎醚对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞黏附分子-1和髓过氧化物酶影响

目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对脓毒症小鼠肺组织血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)水平、髓过氧化物酶(MPO)活性和β抑制蛋白-1(β-arrestin-1)表达的影响。方法:建立脓毒症小鼠模型,实验动物随机分为假手术组、盲肠结扎穿孔模型组(CLP组)和盐酸戊乙奎醚组(PHC组),每组10只。各组小鼠于造模12h时间点采血检测血乳酸水平,收集肺组织检测VCAM-1水平、MPO活性和β-arrestin-1mRNA的表达。结果:与假手术组比较,CLP组血乳酸值、肺VCAM-1水平和MPO活性升高,β-arrestin-1mRNA表达降低;与CLP组比较,PHC组可降低血乳酸值、肺VCAM-1水平和MPO活性,而增加β-arrestin-1mRNA表达。结论:盐酸戊乙奎醚预处理,可以通过上调β-arrestin-1的表达,从而降低VCAM-1水平和MPO活性,减轻脓毒症小鼠肺损伤。