中国汉族人群特有的LRRK2基因R1628P多态性突变在帕金森病中的致病性及机理研究

【目的】 LRRK2基因的多个单核苷酸多态性(SNP)位点与帕金森病(PD)密切相关,且具有明显的人种特异性,如G2019S只高发于白种人,亚洲人鲜见; 而G2385R仅发现于亚洲人种。本研究对特发于中国汉族人的R1628P在汉族人群中的特异性分布、不同亚群中的危险性及其在PD发病中的分子机理进行深入研究。 【方法】 统计学方法:文献筛选搜索全部R1628P和PD临床随机对照研究;应用Revman 5.0及Stata软件,对R1628P突变在汉族及非汉族人群中的分布情况及不同汉族人亚群的危险性进行荟萃分析。(1)生物信息学方法:应用PhosphoSNP 2.0、Scansite 3及GPS 2.1软件对R1628P位点进行分析,预测R1628P突变导致其相邻S1627位点成为与PD发病密切相关的CDK5磷酸化靶点的可能性。(2)细胞与分子生物学方法:野生型LRRK2和R1628P突变体,单独或与CDK5联合转染至细胞,免疫沉淀 LRRK2蛋白,观察LRRK2与CDK5结合能力,并应用体外激酶实验检测LRRK2激酶活性;再将其质粒转染至原代培养神经元中,应用单细胞计数检测H₂O₂处理后神经元死亡情况。 【结果】 通过荟萃分析,R1628P在汉族人群及非汉族人群中呈现典型的差异性分布,为中国汉族人群所特有,且R1628P在不同汉族人亚群中的致病危险度具有明显差别。(1)生物信息学方法提示R1628P突变导致其相邻S1627位点成为CDK5潜在的磷酸化靶点,是典型的磷酸化相关SNP的 Type II(+)位点。(2)细胞与分子生物学方法证实LRRK2的R1628P位点突变增强LRRK2与CDK5蛋白的结合能力;与野生型LRRK2相比,R1628P突变体的激酶活性无明显上调,但与CDK5共转可显著上调R1628P突变体的激酶活性,并且转染R1628P突变体的神经元对损伤更敏感;但CDK5敲除小鼠神经元中转染野生型及R1628P突变体的神经元无差别。 【结论】 本研究证实LRRK2基因的R1628P多态性在汉族人群及非汉族人群中呈现典型的差异性分布,为中国汉族人群所特有,并在不同汉族人亚群中的致病危险度具有明显差别;R1628P的致病分子机理为:R1628P突变导致其相邻S1627位点成为CDK5潜在的磷酸化靶点,在老年应激导致的CDK5活性上调时,R1628P突变提供CDK5“二次打击”的靶点,加速PD发病。本研究为探索PD发病分子机制提供新的研究线索,同时为治疗PD提供新的药物靶点。     

浦东新区集体儿童体格发育状况调查研究

随着国民经济迅速发展,人民生活水平的不断提高,儿童的生活环境和营养状况也发生了很大的变化,为了进一步了解集体儿童的体格发育状况,制定相应的科学育儿措施提供理论和实践的依据,进一步做好托幼机构的营养指导和卫生保健工作,我们在2004年10月,对我区874名集体儿童,开展了体     

纳豆激酶的研究进展

纳豆激酶是一种新的溶栓剂，具有溶栓效率高，药效时间长等优点。综述了纳豆激酶的由来、理化特征、药理效果及开发进展。     

上海市浦东新区5岁以下儿童意外死亡监测与分析

目的降低上海市浦东新区5岁以下儿童意外死亡率，提高儿童健康水平。方法从1995年以来，建立了二级5岁儿童死亡上报制度，进行5岁以下儿童意外死亡原因监测，同时利用儿童系统健康体检时，开展了儿童健康安全宣教干预措施。结果12年5岁以下儿童死亡率4．40‰，其中意外死亡发生率0．71‰，通过干预有逐年下降趋势，经统计学检验P〈0．01，差异有显著统计学意义，意外死亡原因前三位是：溺水、窒息和车祸。男孩明显多于女孩。结论通过不同年龄阶段的针对性宣教干预，可以提高家长对儿童安全意识，有效降低5岁以下儿童意外死亡率。     

改良失血性休克复苏后腹内高压猪模型的建立

目的建立稳定、重复性好的失血性休克复苏后腹内高压猪模型。方法 12只健康成年小型猪(广西巴马)股动脉插管放血至休克(平均动脉压50mmHg,1h),门静脉不全性阻断,回输全部失血后采用林格液复苏,直至腹内高压(IAH)形成,分别记录基础状态、建立IAH后2h的膀胱压(VP)、连续监测下腔静脉压(IVCP),并观察IVCP分别为基础、10mmHg、12mmHg、15mmHg时所需的液体量,记录尿量、呼吸(RR)、心率(HR)、血压(BP),行增强CT扫描测量腹部前后径/横径比值,26h后处死动物取回肠行HE染色病理检查并测量回肠湿干比。结果 12只动物,1只死于麻醉时恶性心律失常,1只死于门静脉破裂,2只死于放血休克过程,成功建立IAH模型8只(66.7%),达IAH时所需的液体量(76±3)ml·kg·-1·h-1,腹部前后径/横径值明显升高。IAH后2h与基础值相比VP、IVCP、RR、HR均升高,BP下降。肠道湿干比增加,病理检查提示回肠黏膜明显水肿。结论通过不完全阻断门静脉模拟临床严重肝损伤救治中肝周填塞致门静脉扭曲后,过量液体复苏后通过肠道水肿等建立失血性休克后液体复苏后猪IAH模型,具有可重复成功率高的特点。     

创伤死亡曲线研究现状

创伤死亡曲线是大样本创伤死亡病例研究中总结出的,用图表方式展示的创伤死亡人数(比例)及创伤死亡者致伤机制、致伤部位等的时间分布规律.其研究成果对指导临床创伤救治具有重要意义,对创伤救治资源合理分配具有重要的指导意义.     

腹腔扩容术对猪休克复苏后腹腔高压症心脏的影响

目的 观察腹腔扩容术对腹腔高压症(IAH)心脏影响.方法 建立失血性休克、门静脉不全阻断复苏后猪IAH模型,随机分腹腔扩容组(n=4)及假手术组(n=4),分别观察心率、平均动脉压(MAP)、缩短分数(FS)和射血分数(EF),测心脏干湿比及苏木素-伊红(HE)染色结果结果 与休克前比,IAH后2 h心率加快(154次/min比123次/min),MAP下降[110.0 mm Hg(1 mm Hg =0.133 kPa)比127.5 mm Hg],FS下降(29.8％比40.4％),EF下降(55.5％比72.0％)(P＜0.05).与IAH后2h比,腹腔扩容组手术后8h及12h较假手术组心率减慢(124次/min比156次/min,120次/min比156次/min)( P＜0.05) 腹腔扩容组22 h后与IAH后2h比,EF上升(P ＜0.05).结论 腹腔扩容术可显著改善本IAH模型的心率及EF.