自体骨髓CD34+干细胞移植治疗严重肢体缺血的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞移植是否能增加缺血肢体的新生血管形成。方法抽取5只犬骨髓20ml,经Ficoll分离单核细胞,免疫磁珠分离CD34+细胞,在体外经血管内皮细胞生长因子诱导分化为内皮细胞,并经vWF抗染色鉴定。建立犬双侧肢体缺血动物模型,将Dil荧光标记的内皮细胞植入缺血肢体中。结果CD34+干细胞移植4周后,激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成;动脉造影见干细胞移植的肢体侧枝循环明显增加,微血管密度检测移植组也明显高于对照组(12.0±2.8vs.5.0±1.6/每高倍镜视野,t=4.17,P<0.05);干细胞移植的肢体ABI平均为0.58±0.14,对照肢体ABI平均为0.32±0.11,差异有统计学意义(t=2.95,P<0.05)。结论自体骨髓干细胞移植能有效的促进缺血组织内的新生血管形成。     

液氮在快速切片中的应用

液氮在快速切片中的应用浙江省人民医院病理科（３１００１４）徐文娟杭州高等医学专科学校病解教研室朱善济海宁市肿瘤研究所病理室杨春虎，李卫东病理快速诊断技术是外科手术中的关键环节之一。为了改进病理快速诊断技术，提高切片质量，我们对各种病理快速冰冻制片技术...     

肿瘤坏死因子α对心肌细胞内受磷蛋白表达和细胞内钙的调节作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对培养的乳鼠心肌细胞内受磷蛋白(PLB)和肌浆网钙泵蛋白同功酶(SERCA2a)基因表达及细胞内游离钙离子浓度的影响.方法体外培养的乳鼠心肌细胞被随机分成对照组和不同浓度TNFα(1、10、30、50、70μg/L)干预组,用单管一步法逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术,观察TNFα对乳鼠心肌细胞PLB和SERCA2a基因表达的影响.采用Fluo-3/Am荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦显微镜下测定TNFα对单个乳鼠心肌细胞内游离钙离子浓度的影响.结果TNFα浓度依赖性增高PLB mRNA和蛋白质的表达,10、30、50、70μg/L TNFα组PLB mRNA表达量分别较对照组增加66%、106%、141%、189%(P＜0.05),蛋白质的表达分别较对照组提高30%、48%、73%、114%(P＜0.001).而1μg/L TNFα组与对照组PLB mRNA和蛋白质表达差异均无显著性.TNFα不影响SERCA2a的表达.50μg/L TNFα作用细胞24 h,能降低异丙肾上腺素刺激的[Ca2 ]i变化幅度的增高,[Ca2 ]i变化幅度较对照组减少33%(P＜0.01),但对静息状态下[Ca2 ]i变化幅度无影响.结论TNFα可增强心肌细胞内PLB的表达,降低心肌细胞内[Ca2 ]i的变化,这可能与TNFα对心肌细胞的负性肌力作用有关.     

Bid蛋白在内质网和线粒体相关的凋亡过程中的作用

目的 研究Bid蛋白在内质网和线粒体相关的凋亡过程中的作用。方法 以高三尖杉酯碱（HHT）诱导人骨髓增生异常综合征（MDS）细胞系MUTZ-1细胞凋亡，用流式细胞术检测细胞凋亡率，RT—PCR及Westernblot法检测线粒体和内质网凋亡途径的相关基因及蛋白表达，激光共聚焦显微镜观察用药前后钙离子浓度和线粒体膜电位的改变以及凋亡相关蛋白Bid的转位。结果 0．05μg／ml HHT作用后4h胞质内Ca^2＋浓度增高，12h达高峰，其后开始下降。HHT作用后线粒体膜电位持续下降。内质网应激相关因子基因及蛋白表达增强，12h达到高峰，其后开始下降。激光共聚焦显微镜观察发现Bid蛋白用药前位于内质网，用药12h后转位至线粒体。结论 HHT可以诱导MDS细胞凋亡，内质网和线粒体相关的凋亡途径在其中发挥了重要的作用，Bid蛋白可能是两种凋亡途径的交叉点。     

自体骨髓CD34+干细胞移植治疗严重肢体缺血的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞移植是否能增加缺血肢体的新生血管形成.方法抽取5只犬骨髓20 ml,经Ficoll分离单核细胞,免疫磁珠分离CD34+细胞,在体外经血管内皮细胞生长因子诱导分化为内皮细胞,并经vWF抗染色鉴定.建立犬双侧肢体缺血动物模型,将Dil荧光标记的内皮细胞植入缺血肢体中.结果 CD34+干细胞移植4周后,激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成;动脉造影见干细胞移植的肢体侧枝循环明显增加,微血管密度检测移植组也明显高于对照组(12.0±2.8 vs. 5.0±1.6/每高倍镜视野,t=4.17, P<0.05);干细胞移植的肢体ABI平均为0.58±0.14,对照肢体ABI平均为0.32±0.11,差异有统计学意义(t=2.95, P<0.05).结论自体骨髓干细胞移植能有效的促进缺血组织内的新生血管形成.     

2815例直肠肛管腺瘤、息肉十年动态观察

我们于1979—1988年十年间对我市1977—1978年大肠癌普查时发现并摘除的2815例直肠肛管腺瘤、息肉病人进行了四次复查,以探讨直肠肛管腺瘤、息肉经摘除后复发和癌变的情况,影响复发和癌变的囚素等规律,从而为制定合理的大肠癌防治措施提出科学的依据。     

H2O2对小窝蛋白在人晶状体上皮细胞中分布与表达的影响

目的 观察以H2O2刺激晶状体上皮细胞（LECs）后对细胞活性的影响及小窝蛋白（caveolin）在LECs膜及胞浆内的分布和表达量的改变。方法 用lmmol／LH2O2刺激LECs不同时间，MTT法观察细胞活性；激光共聚焦显微镜观察caveolin在细胞膜和胞浆内的分布；Western—blot法检测caveolin表达量的变化。结果 H2O2作用时间越长，细胞活性越低；对照组与试验组的差异有显著统计学意义。激光共聚焦显微镜观察到人LECs有丰富的caveolin；无刺激时主要分布在膜上；刺激后在膜及胞浆内的分布增多。Western-blot法发现H2O2作用后，caveolin的表达量减少。结论 H2O2对人LECs的活性产生影响，并导致细胞caveolin重新分布、表达量减少。