水蛭素通过上调VEGF/Notch1信号通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化

摘要：目的 观察水蛭素对人骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC）成骨分化的影响。方法 BMSCs细胞分为正常培养的对照组、成骨诱导的诱导组以及加入不同浓度（1、10、20 ATU/mL）处理的水蛭素组。MTT检测细胞增值并筛选水蛭素最适作用浓度。流式细胞仪检测细胞凋亡。RT-PCR和Western blot分别检测成骨基因Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达。BCIP/NBT染色法检测细胞中的碱性磷酸酶水平。茜素红染色检测矿化结节。检测VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的mRNA和蛋白表达。结果 骨髓间充质干细胞经成骨诱导细胞增殖显著增加,中高浓度的水蛭素可以不同程度促进成骨诱导的BMSCs细胞增殖（P＜0.05）,并筛选出20 ATU/mL作为水蛭素的使用浓度。水蛭素抑制成骨诱导的BMSCs细胞凋亡,上调Runx2、Osterix、COL1A1的mRNA和蛋白表达,增加碱性磷酸酶水平,促进细胞中矿化结节的生成,并提升BMSCs细胞中VEGF、Notch1、Jagged1和CBF1的表达（P＜0.05）。结论 水蛭素可能通过上调VEGF/Notch1信号通路促进人骨髓间充质干细胞成骨分化。     

脂肪结构移植隆乳术的临床应用

自体脂肪组织移植的脂肪成活率仅为30%~50%[1].1988年,美国整形外科医师SR Coleman 发明了脂肪结构移植技术(structural fat grafting, SFC)[2].自2008年3月至2010年5月,笔者采用脂肪结构移植隆乳术34例,效果满意. 1 临床资料 本组患者共34例,均为女性;年龄24～48岁.其中已婚28例,未婚6例.体质量45～65kg,6个月内未使用减肥药物.5例患者行2次注射,每侧乳房注入180～220ml.     

基于PI3K/Akt/mTOR信号通路调控巨噬细胞自噬探讨黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制

目的观察黄芪甲苷对磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的调控,研究黄芪甲苷抗动脉粥样硬化的作用机制。方法体外细胞实验中,将小鼠巨噬细胞RAW264.7随机分为5组,即对照组、黄芪甲苷组、康士得组、雷帕霉素组以及si RNA组。分别用黄芪甲苷含药血清、Akt抑制剂康士得、mTOR抑制剂雷帕霉素及mTOR-si RNA体外处理RAW264.7细胞48 h,透射电镜观察巨噬细胞自噬体的变化,免疫荧光法及Western blotting法检测微管相关蛋白LC3-II表达,实时荧光定量PCR(q RT-PCR)和Western blotting法检测Akt、mTOR及自噬相关蛋白Beclin 1的表达,ELISA检测RAW264.7细胞分泌炎症因子白细胞介素-4(IL-4)、IL-10、IL-2和γ-干扰素(IFN-γ)水平。体内实验采用HE染色检测各组小鼠主动脉横截面病理损伤程度;q RT-PCR和Western blotting法分别检测小鼠主动脉组织中Akt、mTOR的mRNA和蛋白表达。结果体外实验结果显示,与对照组比较,黄芪甲苷含药血清组和各抑制剂组细胞透射电镜下观察到自噬体明显增多(P0.05),LC3-II和Beclin1蛋白的表达水平明显上调(P0.05),而Akt及mTOR的mRNA及蛋白表达水平明显减少(P0.05),巨噬细胞分泌的IL-10明显降低,而分泌的IFN-γ显著增加(P0.05)。小鼠主动脉HE染色结果显示,与模型组比较,黄芪甲苷组小鼠血管各层结构正常,排列整齐,局部有小灶性的钙化颗粒物沉积,病变轻、斑块小,泡沫细胞和脂质减少,弹力板基本完整,病变程度明显较轻,并较各抑制剂组轻。黄芪甲苷组小鼠主动脉组织Akt、mTOR的mRNA和蛋白表达均较低(P0.05)。结论黄芪甲苷抑制动脉粥样硬化斑块的形成机制与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路、抑制炎症反应有关。     

张磊教授对复发性口腔溃疡的辨证论治

口腔溃疡属中医“口疮”，又称“口疳”，以口腔肌膜上（多在唇、舌、颊及齿龈部位）出现黄白色如豆大、表浅的小溃点，疼痛或饮食刺激时痛为主症，易反复发作。其虽属一般常见病，但治疗颇为棘手。笔者有幸随全国著名中医专家、国家第二批名老中医学术经验继承制导师张磊教授侍诊，临证观察，获益颇多，现将其辨治经验分述如下：     

肝硬变门脉高压症病人遵医行为调查浅析

肝硬变门脉高压症病人常可出现消化道出血、自发性腹膜炎、门体分流性脑病、脾功能亢进等并发症。良好的遵医行为可有效的预防上述并发症的发生 ,不良遵医行为常可致上述并发症的反复发生甚至威胁生命。 1999年 1月至 2 0 0 1年 12月对我院部分肝硬变门脉高压症病人遵医行为进行调查分析。现报告如下。1　资料与方法1 1　一般资料　选择 1999年 1月至 2 0 0 1年 12月我院门诊及住院确诊肝硬变门脉高压症病人 5 0例 ,男 34例 ,女 16例 ;年龄 2 3～ 6 5岁 ;嗜烟酒 2 8例。职业 :工人 18例 ,农民 14例 ,知识分子 13例 ,其他 5例。文化程度 :大…     

子宫动脉栓塞治疗子宫肌壁间肌瘤的疗效及安全性

目的探讨子宫动脉栓塞术（UAE）治疗子宫肌壁间肌瘤的疗效及安全性。方法 2012年1～12月收治28例经超声确诊的子宫肌壁间肌瘤患者,行UAE治疗,观察术后疗效、并发症及安全性。结果 28例随访9～21个月,月经量较术前减少,痛经症状缓解或消失,贫血改善。其中21例子宫肌瘤消失,7例子宫肌瘤体积明显缩小。术中、术后出现不同程度腹痛25例,术后发热14例,阴道分泌物增多10例,所有患者经对症处理后,症状均在3～7 d内逐渐消失。无一例出现闭经。结论 UAE治疗子宫肌壁间肌瘤疗效显著、微创、安全性高。     

张磊灵动法治疗杂病经验

张磊(1929~),男,主任医师,1964年毕业于河南中医学院,曾任河南省卫生厅副厅长,河南中医学会会长,中药学会会长,《河南中医》编委,《中医研究》顾问,河南省中药新药评审委员会委员。全国第二批老中医药专家学术经验继承工作指导老师。长期从事教学和临床,治学严谨,医术精湛,尤其擅长于疑难杂病的治疗。     

补肾健髓汤对脊髓损伤康复的影响

目的: 探讨补肾健髓汤干预脊髓损伤(SCI)康复的疗效及对微循环炎症反应的影响. 方法: 64例SCI患者采用随机化分层开放试验方法分为对照组和观察组各32例.对照组采用膀胱功能训练、排便训练等康复训练;中枢性疼痛者,口服盐酸氟西汀胶囊,20 mg/次,1次/d和盐酸哌替啶片,50～100 mg/次,根据情况每天给予2～3次;并给予电针治疗.观察组,在对照组基础上采用补肾健髓汤治疗.两组疗程均为8周.进行下尿路症候群(LUTS)评分,进行国际 SCI 肠功能扩展数据集评估;采用McGill 疼痛问卷(SF-MPQ)评估疼痛;检测血栓素A₂(TXA₂)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1),治疗前后各评价1次. 结果: ①神经性膀胱疗效 治疗后观察组LUTS评分低于对照组(P<0.01);经有序资料卡方检验,观察组排尿功能障碍的改善优于对照组(P<0.05);②神经源性肠道功能障碍疗效 治疗后观察组腹胀、便秘、药物依赖患者少于对照组(P<0.01),排便时间短于对照组(P<0.01);③疼痛疗效 治疗后观察组PRI,VAS和PPI评分及总分均低于对照组(P<0.01);④微循环炎症反应影响 治疗后观察组TXA₂,ET-1和ICAM-1水平低于对照组,NO水平高于对照组(P<0.01). 结论: 在常规康复治疗的基础上,补肾健髓汤能促进脊髓损伤患者神经性膀胱和肠道功能障碍的康复,减轻中枢性疼痛,其作用机制可能与改善微循环,抑制炎症反应有关.