miR 375与胃肠间质瘤细胞伊马替尼敏感性关系的实验研究#br# #br#

目的探讨miR 375与胃肠间质瘤细胞对伊马替尼敏感性的关系以及可能的作用机制。 方法收集2017年1月至2018年2月在河南省肿瘤医院病理科存档的石蜡包埋45例胃肠间质瘤（GIST）组织标本和对应的癌旁正常胃黏膜组织标本。向GIST T1细胞中分别转染miR 375 mimics（转染组）或空质粒（阴性对照组）,采用MTT法和流式细胞术检测两组细胞增殖和凋亡活性。采用荧光定量PCR法（QPCR）分别检测GIST组织中miR 375水平和GIST T1细胞中miR 375、p VEGFR2、p Akt、PTEN表达水平。 结果GIST组织和癌旁正常黏膜组织中miR 375 水平分别为0673±0078和1000±0101,差异有统计学意义（P＜005）。13例GIST组织中miR 375表达呈阳性,阳性表达率为289％。经不同浓度伊马替尼（2、5、10 μmol／L）处理后,转染组细胞增殖抑制率和凋亡率分别为（2451±210）％、（5239±423）％、（8457±464）％和（1795±366）％、（3542±357）％、（6347±324）％,与阴性对照组比较,差异有统计学意义（P＜005）。经613 μmol／L伊马替尼作用后,GIST T1细胞miR 375表达量为2439±0056,显著高于未经伊马替尼处理的1000±0037,差异有统计学意义（P＜005）。经miR 375 mimics转染后,GIST T1细胞中p VEGFR2和p Akt表达水平分别为212±007、182±009,明显高于阴性对照组,而PTEN mRNA表达水平为045±012,显著低于阴性对照组,差异有统计学意义（P＜005）。miR 375与p VEGFR2、p Akt mRNA表达水平呈正相关性（r=0689,0465, P＜005）,与PTEN mRNA呈负相关性（r=-0523, P＜005）。 结论上调miR 375可增加VEGFR 2和Akt磷酸化水平,从而提高GIST细胞对伊马替尼的敏感性。     

三套管法大鼠原位小肠移植动物模型的改进

目的 对三套管法大鼠原位小肠移植动物模型进行改进,提高原位小肠移植的成功率.方法 取106只SD大鼠作为供、受体进行同种同基因原位无造瘘全小肠移植,动静脉吻合采用改良三套管法,其中受体肠系膜上静脉套管采用手术显微镜下套管.供体小肠近端与受体近端空肠端端吻合,远端与受体升结肠端端吻合.手术后存活超过3d即认为手术成功.结果 手术成功率为90.6％ (48/53),供体小肠热缺血时间为0,冷缺血时间为(30±2.48) min,手术成功后7d存活率为97.9％ (47/48).结论 在三套管技术的基础上,采用手术显微镜辅助下肠系膜上静脉套管,大大提高了该动物模型的成功率,缩短了手术技术的成熟时间.     

结肠直肠癌中PISD的表达及其与临床病理的关系

目的:检测Wnt通路靶基因PISD在结肠直肠细胞及组织标本中的表达情况及其与临床病理的关系。方法:应用Western印迹法测定结肠直肠癌细胞株中PISD的蛋白表达水平,应用免疫组化法测定PISD在组织标本中的表达情况及其与临床病理的关系。结果:Western印迹法结果显示PISD在7种结肠直肠癌细胞株中均呈阳性表达,免疫组化结果显示PISD在结肠直肠癌组织中表达阳性,灵敏度为62.9%。结论:PISD在结肠直肠癌细胞及组织中表达上调,但与肿瘤的转移无明显相关。