肾母细胞瘤血清蛋白质标记物检测与分期模型构建研究

目的筛选出肾母细胞瘤患儿特异性血清蛋白质标记物，建立肾母细胞瘤临床分期模型与CT分期进行对照分析，并评价其临床应用价值。方法应用SELDI-TOF-MS技术检测80例血清标本（术前肾母细胞瘤30例，其他恶性肿瘤30例，正常儿童20例），用ZUCI-Protein Chip Data Analyze System分析软件进行数据处理，结合支持向量机（support vector machine，SVM）建立肾母细胞瘤临床分期模型。结果筛选出2个m／z位于4153．9和3257．6的蛋白质标记物，区分肾母细胞瘤Ⅲ和Ⅳ期与肾母细胞瘤Ⅰ和Ⅱ期蛋白质谱差异表达模型的敏感性为100％，特异性为93。8％；区分肾母细胞瘤与正常儿童、腹腔实体肿瘤及肾脏其他恶性肿瘤的特异性是100％，敏感性是100％、80．0％、100％；临床分期模型可以特异性地将各期区分开来，其特异性及敏感性均为100％；通过肾母细胞瘤早期诊断模型中的2个m／z（6984．4，6455．5）血清标记物进行分析得出肾母细胞瘤各期情况如下：Ⅳ期相对于Ⅲ期低表达；Ⅲ期相对于Ⅱ期低表达；Ⅱ期相对于Ⅰ期低表达；Ⅰ期相对于正常儿童低表达；后者相对高表达；临床分期越晚，m／z强度就越低表达。蛋白芯片分期准确性与病理一致，达到100％，在分期定性问题上优于CT（Ⅰ期100％，Ⅱ期85．0％，Ⅲ期85．0％，Ⅳ期75．0％）。结论用SELDI-TOF-MS结合SVM建立的肾母细胞瘤临床分期模型可弥补CT在肾母细胞瘤分期定性问题匕的不足。     

先天性巨结肠血清蛋白质标记物检测

目的检测先天性巨结肠患儿血清蛋白质,筛选特异的蛋白质标记物,构建用于先天性巨结肠早期筛选及诊断的血清蛋白质指纹图谱模型。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(surface enbanced laser desorption/inionation-time of flight-mass spectra,SELDI-TOF-MS)技术检测62例血清标本(先天性巨结肠42例,正常对照20例)的蛋白质质谱,并结合生物信息学方法(支持向量机)分析数据。结果筛选出3个m/z位于3221.7、5639.2、6884.2的蛋白质标记物,构建先天性巨结肠早期筛选及诊断模型。经留一法交叉验证,区分先天性巨结肠和正常小儿的血清蛋白质指纹图谱模型的特异性为100%,敏感性为100%。结论SELDI-TOF-MS结合SVM建立先天性巨结肠血清蛋白质指纹图谱模型是早期筛选及诊断先天性巨结肠的一种特异性强、敏感性高的新方法,值得进一步研究和应用。     

新生儿肠闭锁68例手术治疗体会

新生儿肠闭锁和狭窄是一种较少见的消化道畸形,且常并发其他畸形。2003年以来,我们对68例新生儿肠闭锁和狭窄患儿行手术治疗,效果满意。现报告如下。     

5-aza-CdR对肝癌SMMC7721细胞株PDCD4基因甲基化及表达的影响

目的 研究5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)在肝癌细胞株SMMC7721中对程序性细胞死亡因子4(PDCD4)表达的影响及可能机制.方法 培养肝癌细胞株SMMC7721,用5-aza-CdR处理肝癌细胞株SMMC7721,Western-blotting检测DNMT3b、PDCD4蛋白在处理前后的变化,甲基化特异性PCR即MSP检测PDCD4基因启动子区域甲基化水平.结果 1×10~(-6)mol/L、5×10~(-6)mol/L的5-aza-CdR作用于SMMC7721细胞后,DNMT3b表达水平降低,而PDCD4表达水平升高,且浓度之间有差异;MSP示药物处理前PDCD4启动子区域处于高甲基化水平,在用5×10~(-6)mol/L药物处理后,其启动子发生了去甲基化.结论 5-aza-CdR可以抑制DNMT3b在SMMC7721中的表达,且可能通过改变抑癌基因PDCD4启动子甲基化状态影响PDCD4表达.     

咳嗽变异性哮喘患者Th1/Th2相关上游转录因子及细胞因子的表达

0.57±0.06),较对照组的(0.45±0.03)增高(t=7.018,P<0.01);病例组与对照组比较,INFγ/IL-4及T-bet/GATA-3比值均降低(t分别为-2.208,-3.170,P均<0.05).结论:CVA患者体内存在Th1/Th2平衡的紊乱,且以Th2亚群亢进为主.     

小儿颈部巨大淋巴管瘤的围手术期处理

淋巴管瘤是小儿较常见先天性淋巴系统发育异常导致的脉管畸形,由大小不一、囊性扩张淋巴管组成[1,2].好发于颈部,以进行性增大无痛性肿块为其首发症状[2].传统分类可分为单纯性、海绵状、囊性三种类型.虽然组织学上是良性肿瘤,但具有浸润生长特性,常侵犯周围器官组织,尤其是侵及颈部重要血管神经淋巴管瘤的手术处理.对于小儿外科医生是一个挑战[2-4].我院2004年5月至2009年3月收治巨大颈部淋巴管瘤(cervical lymphangioma,CL)38例,I期手术切除33例,回顾性分析如下.     

Ⅲ、Ⅵ期小儿肝母细胞瘤术中肝内血管的处理

目的 探讨小儿肝母细胞瘤累及肝内重要血管术中处理方法及其疗效.方法 对2005年4月至2008年8月25例小儿肝母细胞瘤切除术中对累及肝内重要血管的具体处理方法进行分析,按术中受累血管处理不同分为2组,血管结扎组10例、血管修补组15例,血管结扎组:累及的肝内重要血管连同瘤体、受累肝叶/肝实质一并结扎切除;血管修补组:对受累肝内重要血管分离,尽可能保留受累肝内重要血管及所支配之正常肝叶/实质.结合术后随访情况分析疗效.结果 血管结扎组中放弃手术1例,姑息性切除3例,完整切除6例,术后肝功能衰竭死亡2例,痊愈出院4例;血管修补组均完整切除痊愈出院.随访5～36个月(中位随访时间20个月),血管结扎组生存1例,血管修补组生存11例.结论 辅以血管修补的肿块切除术可扩大肝母细胞瘤手术适应证,有效预防术后肝功能衰竭,安全度过围手术期,为早期化疗提供时机.     

脐血CD3AK细胞对不同肿瘤细胞株杀伤活性的比较

目的:比较脐血CD3AK细胞在体外对不同肿瘤细胞株的杀伤活性。方法:脐血单个核细胞经CD3McAb和rIL-2诱导成CD3AK细胞,作用于不同的肿瘤细胞株(食管癌Eca109,胃癌BGC823,肺癌A549和白血病HL-60),用MTT法测其杀伤活性。结果:脐血CD3AK细胞对HL-60的杀伤活性高于对Eca109、A549和BGC823的杀伤活性(P<0.05),而对后3者的杀伤活性间差异无统计学意义。结论:脐血CD3AK细胞对不同肿瘤细胞株的杀伤活性存在差异,临床上应引起注意。     

血清蛋白质标记物检测在小儿肾母细胞瘤预后监测中的价值

目的 探索肾母细胞瘤患儿预后监测的新方法。方法 应用表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术检测肾母细胞瘤患儿术前后血清蛋白质标记物的表达差异。肾母细胞瘤患儿血清标本100例，其中术前30例、术后2周24例、术后3个月和6个月各23例，正常儿童血清标本20例，以生物信息学方法支持向量机分析质谱数据。结果 肾母细胞瘤患儿手术（包括根治术和姑息性切除术）前后血清蛋白质标记物有明显差异。筛选出2个质荷比（m／z）位于6984．0、6455．0处的蛋白质标记物：术前30例标本2种蛋白质标记物表达强度分别为299．8±134．6、1037．0±375．9，与正常对照组（表达强度分别为1110．6±213．8、2268．7±1058．0）比较差异有统计学意义（P〈0．01）；19例根治术患儿术后2周2种蛋白质标记物表达强度分别为1101．2±221．8、2065．2±660．5，与术前组比较差异有统计学意义（P〈0．01），与正常对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。2例根治术和3例姑息性切除患儿术后2周2种蛋白质标记物表达强度分别为358．1±213．3、1307．9±402．2，与术前组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。术后3、6个月复查发现，持续高表达者均无复发转移征象，持续低表达者为瘤体未切净或已有远处潜在转移者。结论 血清蛋白质标记物检测为肾母细胞瘤术后患者预后判断提供了一种可能的新方法。