MAPK—ERK在牙本质基质蛋白1信号通路中的作用

目的 探讨在人骨髓间充质干细胞（hMSC）、小鼠前成骨细胞（MC3T3）和成牙本质细胞（MDPC-23）中,牙本质基质蛋白1（DMP1）是否通过激活丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）-细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路发挥作用.方法 Western blot 检测不同时间点rDMP1C 和rDMP1F 蛋白处理hMSC、MC3T3-E1 和MDPC-23 后,对MAPK-ERK 的激活情况;并检测使用MAPK 抑制剂后,ERK 的激活是否被抑制;细胞免疫荧光技术观察MAPK 抑制剂抑制激活的ERK 从胞浆向胞核的转位情况.Western blot 检测siRNA 沉默Ras 基因后,对rDMP1 引起MAPK-ERK 信号通路激活的影响.结果 三种细胞中,rDMP1F 和rDMP1C 在5 min ～ 3 h 均可以激活MAPK-ERK 通路,而总ERK 在各时间点均无显著变化;rDMP1F 激活信号通路的持续时间均明显长于rDMP1C;MAPK 抑制剂处理组的p-ERK 条带与rDMP1F/C 处理组的p-ERK 条带差别明显.hMSC 中,rDMP1F 激活MAPK 信号通路持续时间要长于其在MC3T3 和MDPC-23 中的作用.细胞免疫荧光检测发现,MAPK 抑制剂组可以阻断ERK 向细胞核内的转位.MC3T3 和MDPC-23 在siRNA 沉默Ras 基因后,ERK 的磷酸化水平与rDMP1F 单独处理组相比显著降低.结论 rDMP1C 和rDMP1F 都通过Ras 激活MAPK-ERK信号通路,而rDMP1F 比rDMP1C 具有更强的信号功能.     

酪蛋白磷酸多肽对牙釉质龋再矿化作用的初步研究

目的 :检测酪蛋白磷酸多肽 (CPP)否具有促进牙釉质龋再矿化的作用。方法 :选择无龋离体牙制成人工龋标本 ,用含 0 2 %CPP的再矿化液处理。借助显微硬度计、扫描电镜、偏光显微镜观察 0 2 %CPP的再矿化液对牙釉质龋的再矿化效果。结果 :与对照组相比 ,0 2 %CPP的再矿化液处理后显微硬度明显增加 ,有显著的统计学意义。扫描电镜观察釉质表面有不规则的矿化物沉积 ,偏光显微镜下表现为以矿化为主的负性双折射区变宽。结论 :CPP在牙釉质龋的再矿化过程中具有重要的促进作用     

沉默survivin基因抑制Lovo细胞生长的体外实验研究

目的 探讨survivin基因沉默对人结肠癌Lovo细胞体外生长的抑制作用.方法 构建靶向survivin的shRNA载体质粒,然后转染结肠癌Lovo细胞.用RT-PCR和Western Blot方法检测survivin的Mrna和蛋白的表达情况.MTT实验评价转染后各组细胞的增殖抑制情况.结果 靶向survivin的shRNA能够明显下调survivin Mrna和蛋白质表达(P＜0.05),其抑制率分别是39.59%和42.32%.MTT实验提示转染特异性靶向survivin shRNA的Lovo细胞在转染48小时后出现呈时间依赖性的生长抑制.在转染后72 h,该细胞存活率仅为41.8%.与空白对照组相比有显著性的降低(P＜0.05).结论 靶向survivin的特异性shRNA能够有效地沉默结肠癌Lovo细胞的survivin基因表达,体外实验能显著抑制肿瘤细胞增殖.     

偏移投照技术用于显示上颌第一磨牙近中颊根第二根管

目的 探讨数字化成像系统对上颌第一磨牙近中颊根第二根管（MB2）偏移投照的最佳显示效果和拍摄方法.方法 选取临床上需要进行上颌第一磨牙牙髓治疗并具有MB2根管特征的患者200例.在分角线投照法的基础上,以转动轴作标记记录水平角度,其中100例从远中至近中每偏移10°进行投照,50例使用不同的曝光时间,50例平移传感器位置进行投照.由两位医师独立阅片,判断牙根区分情况、清晰度及构图完整性.采用SPSS 16.0软件包进行配对计数资料的χ2检验.结果 在MB与MB2区分率中,远中偏移30°组最高,区分率为94％,显著高于正位组的10％（χ2=84,P=0.000）,相同偏移角度远中偏移比近中偏移区分率更高（30°：χ2=18.382,P=0.000; 20°：χ2=16.282,P=0.000;10°：χ2=14.019,P=0.000）.根尖清晰度方面近中偏移比远中偏移低（30°：χ2=7.848,P=0.005;20°：χ2=12.033,P=0.001;10°：χ2=14.700,P=0.000）.当近中偏移超过20°、曝光时间增加1/4时清晰率可达78％,传感器的平移摆放使牙体及根尖区的完整显示率达94％.结论 要获得良好的MB2显示效果,X线中心线向远中偏移为首选,若选择向近中偏移则需加大偏移角度和曝光时间,传感器的正确摆放也是直接影响图像质量的关键.     

小鼠颌骨发育过程中长链非编码RNA的表达谱变化

目的研究在小鼠颌骨发育过程中长链非编码RNA（lnc RNA）的表达谱变化情况。方法利用lnc RNA-seq测序技术检测孕18 d及出生后14 d的C57小鼠下颌骨组织样本中的lnc RNA表达谱差异,经对原始数据进行预处理达到均一化后,筛选出差异表达lnc RNA,进行分析。结果孕18 d与出生后14 d的C57小鼠下颌骨组织样本相比较,2倍以上变化并有显著差异（FDR≤0.001）的lnc RNA,确定为差异表达lnc RNA。2倍以上变化的共6617条,占所有lnc RNA的17.16%;2倍以上升高的共3720条;2倍以上降低的共2897条;5倍以上升高的共714条;5倍以上降低的共288条;10倍以上升高为共645条;10倍以上降低的共211条。结论孕18 d与出生后14 d的C57小鼠下颌骨组织样本相比较,lnc RNA表达谱发生显著变化。提示差异性表达的lnc RNA可能参与了小鼠颌骨发育的调控。     

p16、pRb在PA和CPA中的表达及意义

目的 检测p16及pRb在正常腮腺、PA和CPA中的表达情况，探讨它们表达的A相关性及在CPA发生中的作用。方法 免疫组化S-P法检测p16和pRb的表达，应用计算机图像分析系统进行定量分析。结果 p16在正常腮腺、PA和CPA中的表达逐渐减少，而rRb的表达逐渐增高，其关联系数r=-0.328。结论 p16和pRb在PA和CPA中的表达呈负相关，在CAP的发生中具有重要的作用。     

自体血液回输对脊柱手术患者术后IL-6、IFN-γ和TNF-α的影响

目的观察同种异体输血和自体血液回输对脊柱手术患者术后免疫反应的影响。方法择期行脊柱手术的患者44例,按手术日奇偶数分为2组,自体组术中仅输注自体洗涤红细胞（22例）,异体组术中仅输注异体悬浮红细胞（22例）,分别测定2组术前、术后1天和术后7天血清中白细胞介素6（IL-6）、干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）的水平。结果与术前相比,自体组术后1天、7天血清IFN-γ和IL-6均增高,IL-6升高尤为显著,明显高于异体组,2组间差异有显著性（P〈0.01）。2组术后的TNF—α水平在各个时间点都没有明显变化。结论与同种异体输血相比,在脊柱手术中采用自体血液回输对术后患者血清中TNF-α的影响不明显,但可以明显提高IFN-γ和IL-6的水平。自体血液回输对术后免疫细胞因子的抑制作用远小于异体输血,能够保护甚至增强脊柱手术患者术后的细胞免疫功能。     

游离端牙缺失的球帽式附着体义齿修复

目的：介绍球帽式附着体在游离端牙缺失修复中的设计原则和制作方法，评价其临床效果。方法：应用球帽式附着体修复游离端缺失患者10例，每件附着体义齿由两副附着体固位或一副附着体和一个联合卡环共同固位，并对其进行6－27个月的临床疗效观察。结果：全部病例使用附着体义齿修复后，义齿固位良好，咀嚼功能好，异物感减小且外形美观，基牙无松动。结论：附着体义齿的优点是不显露金属，不影响美观，不损伤基牙，具有良好的固位作用。     

用权重基因共表达网络分析识别心脏重构关键节点基因

目的采用权重基因共表达网络分析方法(WGCNA)挖掘心肌梗死后心脏重构的关键节点基因,并研究其与ACE1和ACE2的关系。方法从NCBI的GEO下载2个心肌梗死后心脏重构的全基因组表达数据GSE7487和GSE738;数据初处理后,用WGCNA构建基因共表达网络,识别与心脏重构相关的模块与关键节点基因,分析关键节点基因与ACE1和ACE2的关联性;并在心肌梗死后心脏重构大鼠模型中验证它们的关系。结果分析发现在GSE7487,17个模块中有6个模块与心脏重构相关,模块基因富集于16条KEGG信号通路。在GSE738,5个模块与心脏重构相关,模块基因富集于15条KEGG信号通路,其中有10条信号通路与第一组数据结果相同,这些信号通路涉及心肌肥厚病理、氧化磷酸化、代谢等。进一步利用模块内连通性和基因重要性找到了一些心脏重构的关键调控基因,如钙依赖磷酸酶调节子(RCAN1)。RCAN1表达与ACE1表达高度相关,但与ACE2不相关。在动物模型中验证结果与上述结果一致。结论权重基因共表达网络分析方法是一个高效的系统生物学方法,应用本方法发现了心脏重构的关键节点基因,其中RCAN1可能影响ACE1-ACE2在肾素血管紧张素系统中的平衡。     

Bcl-2和survivin蛋白在胃肠道间质瘤的表达与意义

目的探讨Bcl-2和生存素(survivin)蛋白在胃肠道间质瘤(GIST)的表达及临床意义。方法应用免疫组化SP法和病理图像分析系统检测85例胃肠道间质瘤(良性28例,潜在恶性16例,恶性41例)中Bcl-2和survivin的表达情况,结合临床病理学资料分组比较并进行统计学分析。结果 85例GIST中Bcl-2和survivin表达的平均灰度值在良性组、潜在恶性组、恶性组中依次递减,阳性表达水平逐渐增高。3组两两比较,各组的平均表达水平差异存在统计学意义(P0.05)。在41个恶性病例中,有浸润或转移的亚组的Bcl-2和survivin表达水平显著高于无浸润转移亚组的表达水平(P0.05)。GIST中Bcl-2和survivin表达有显著的正相关性(rs=0.43)。结论 Bcl-2和survivin高表达能够协同促进GIST的恶变和向外浸润转移,检测这两个指标也许有助于判断GIST的良恶性以及预测肿瘤的预后。