不同病因心衰患者血浆脑钠素水平的影响

目的　观察不同病因心衰患者血浆脑钠素(BNP)水平的变化 ,探讨BNP在心衰发病机制中所起的作用以及 β -受体阻滞剂对心衰患者BNP水平的影响。 方法　采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)法测定心衰患者血浆BNP水平。结果　心衰组BNP水平与正常对照组相比显著升高(P <0 0 1)。重度心衰心功能Ⅲ、Ⅳ级BNP水平明显高于心功能Ⅱ级。BNP变化的幅度在冠心病、扩张型心肌病不同病因心衰中有所不同 ,冠心病心衰BNP水平升高更明显 (P <0 0 1)。心衰患者中常规治疗组与非 β -受体阻滞剂治疗组相比 ,美托洛尔和卡维地洛治疗组BNP水平明显降低 (P <0 0 5 )。结论　心衰患者血浆BNP水平显著升高 ,BNP水平与心衰严重程度呈正相关 ,冠心病心衰BNP水平较扩张型心肌病组明显升高 ,提示冠心病心肌缺血损伤可能进一步促进BNP分泌。美托洛尔和卡维地洛均能下调心衰BNP水平 ,可能是不同β -受体阻滞剂逆转心衰神经激素过度激活的共同作用机制之一。     

VEGF_(165)和Angiopoietin-1 cDNA治疗缺血心肌的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子165(VEGF_(165))和血管生成素1(Angiopoietin-1,Ang1)基因导入对心肌缺血的治疗作用。方法分别构建编码VEGF_(165)和Ang1的真核表达载体。结扎SD大鼠冠状动脉前降支后1周,将缺血模型随机分为实验组(n=7)和对照组(n=7),在缺血区周围心肌内分别注射VEGF_(165)和Ang1的重组质粒和空质粒。1周后收取心脏,通过Langendorff心脏灌注模型实验,测定离体心脏的心功能。用免疫组织化学方法测定心肌注射区血管密度。结果正确构建了重组质粒pSecTag-VEGF和pSecTag-Ang1,并能在HEK293细胞中特异地表达出VEGF165和Ang1。同对照组相比,治疗后1周实验组左心室收缩压(LVSP)从(34.15±5.78)mmHg(1mmHg=0.133kPa)升高到(39.33±6.10)mmHg;左心室舒张末压(LVEDP)从(15.85±1.79)mmHg降低到(9.09±1.98)mmHg(P<0.05);左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)从(1413.52±417.73)mmHg/s升高到(1939.28±710.22)mmHg/s;左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax)从(600.39±55.59)mmHg/s升高到(1030.53±401.22)mmHg/s(P<0.05);左心室做功(LVW)从(8213.88±303.68)mmHg/min升高到(15416.67±233.43)mmHg/min(P<0.05);冠状动脉流量(CF)从(3.2±0.31)mL/min升高到(4.09±0.80)mL/min(P<0.05),心肌注射区毛细血管数分别从(25±5)条/mm2增加到(46±8)条/mm2(P<0.05)。结论VEGF_(165)和Ang1基因导入能增强缺血心肌的血管新生和侧支循环的形成,改善心功能。     

C-sis反义寡脱氧核苷酸抑制兔主动脉平滑肌细胞增殖的时效关系

为观察局部处理C-sis反义寡脱氧核苷酸对平滑肌细胞增殖及新生内膜肥厚的抑制作用、球囊导管损伤60只新西兰白兔胸主动脉后。经导管局部处理每只兔1mg（2mL）C-sis反义或正义寡脱氧核苷酸或2mL生理盐水,于损伤后第3、7、14天和第28天，用免疫组织化学方法结合图象分析，评价损伤动脉内膜平滑肌细胞增殖及新生内膜改变。结果发现．C-sis反义寡脱氧核苷酸明显抑制内膜平滑肌细胞增殖，最高抑制作用出现于损伤后第3天；抑制百分率达69．8％，第7、14天和第28天的抑制率依次降低，分别为59％、51.9％和47.8％；而新生内膜面积的抑制百分率分别是48．9％、77．8％、72．6％和70．8％，与生理盐水处理组相比，平滑肌细胞数及新生内膜面积均有明显降低。研究结果表明，局部处理C-sis反义寡脱氧核苷酸，通过反义途径，可明显抑制球囊损伤主动脉内膜平滑肌细胞增殖，其抑制作用随时间而降低，同时，对新生内膜面积肥厚的最大抑制出现于第7天，随后降低，提示局部处理C-sis反义寡脱氧核苷醚，有可能降低再狭窄的发生。     

心房颤动患者心房组织血管紧张素Ⅱ受体表达及血管紧张素转换酶抑制剂干预的初步研究

目的探讨心房颤动(房颤)患者心房组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体基因转录和蛋白表达的变化以及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)干预的影响。方法45例心脏外科手术患者,其中窦性心律和房颤患者各12例,应用低剂量ACEI的窦性心律和房颤患者分别为9例和12例。取右心耳组织通过逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术测量血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)和血管紧张素Ⅱ2型受体(AT2)mRNA和蛋白的相对表达量。结果窦性心律和房颤患者之间的心房组织AT1和AT2mRNA表达量差异无统计学意义;房颤患者心房组织AT1蛋白表达量明显低于窦性心律患者(2.63±1.00vs4.64±1.48,P<0.001),AT2蛋白表达量明显高于窦性心律患者(6.20±2.17vs3.72±0.88,P<0.05);应用低剂量ACEI的窦性心律和房颤患者分别与未应用ACEI的窦性心律和房颤患者相比,AT1和AT2的mRNA和蛋白表达量差异无统计学意义。结论房颤时AT1蛋白表达下调,AT2蛋白表达上调,相应的mRNA表达水平差异无统计学意义,提示肾素血管紧张素系统参与了房颤的心房结构重构;低剂量ACEI不能逆转房颤AngⅡ受体重构。     

巨噬细胞移动抑制因子在动脉粥样硬化斑块中的表达

背景与目的主要由巨噬细胞和活化淋巴细胞分泌的巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)参与调节先天性和获得性免疫反应,并能抑制巨噬细胞游走,促进巨噬细胞在炎症局部浸润。研究表明,动脉粥样硬化时MIF合成增加。因此,有必要了解动脉粥样硬化斑块     

转导血管内皮细胞生长因子基因防治肝静脉内支架再狭窄的初步研究

经皮球囊血管扩张术及血管内支架置入术是近年来兴起的一种治疗方法,可避免外科手术的创伤大,并发症多,死亡率高等缺点。但其术后再狭窄或闭塞的发生率较高,一年内达30％,因而限制了该技术的临床应用和发展[1]。实验旨在探讨局部转导血管内皮细胞生长因子（VEGF）基因促进支架及血管损伤处的内皮形成,及其在防治再狭窄发生中的作用。 一、材料与方法     

两种不同染色法在流式细胞术中检测细胞周期的探讨

目的比较碘化丙啶（PI）和4,6-联脒-2苯基吲哚（DAPI）两种不同染色方法在流式细胞术中对细胞周期检测的影响。方法 A549细胞分别采用PI和DAPI染色法进行染色,于染色后0和24h进行流式细胞仪检测细胞G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较两种方法的测定结果,同时进行细胞计数,观察细胞浓度变化。结果PI和DAPI法染色后0h上机测定,结果分别为：CV值（7.72±0.19）、（5.92±0.09）,G0/G1期含量（69.63±1.16）%、（69.87±1.28）%,S期含量（24.53±0.47）%、（24.43±0.86）%,G2/M期含量（5.85±1.04）%、（5.72±0.65）%,两种方法检测细胞周期的结果基本一致（P〉0.05）;染色后24h重新测定,结果分别为：CV值（8.82±0.05）、（6.09±0.30）,G0/G1期含量（58.50±0.90）%、（70.47±0.81）%,S期含量（31.73±0.75）%、（23.67±0.45）%,G2/M期含量（9.51±0.47）%、（5.86±0.46）%,两种方法检测细胞周期的结果差异有统计学意义（P〈0.05）。DAPI法染色后0和24h测定结果基本一致（P〉0.05）,而PI法检测结果差异有统计学意义（P〈0.05）。细胞计数结果显示,放置24hPI法细胞损耗为63.14%,DAPI法细胞损耗为12.50%,两种方法结果差异有统计学意义（P〈0.05）。染色24h后PI法细胞开始崩解,镜下见较多的细胞碎片,而DAPI法细胞形态良好。结论应用流式细胞术检测细胞周期,DAPI染色法优于PI染色法。     

人微小RNA-16（miR-16）重组腺病毒的制备和鉴定

目的制备人微小RNA-16（miR-16）重组腺病毒,研究其在人骨髓间充质干细胞（hMSCs）中的表达及对细胞周期素依赖蛋白激酶6（CDK6）表达的影响。方法从人基因组DNA中扩增miR-16前体的DNA,定向插入腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV。将经PmeⅠ线性化的重组穿梭载体pAdTrack-CMV-miR-16与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化感受态大肠杆菌BJ5183,在细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒rAdTrack-miR-16。将经PacⅠ线性化的rAdTrack-miR-16在人胚肾293细胞（HEK293）中包装并扩增出miR-16的重组腺病毒rAd-miR-16。将重组腺病毒感染hMSCs,分别检测miR-16前体和miR-16靶基因CDK6的表达。结果 pAdTrack-CMV-miR-16构建正确,在HEK293细胞中成功包装并扩增出重组腺病毒rAd-miR-16。rAd-miR-16感染的hMSCs中miR-16前体水平显著升高（P〈0.05）,CDK6mRNA的表达降低不明显,CDK6蛋白表达水平显著降低（P〈0.01）。结论成功制备了表达人miR-16的重组腺病毒,并能有效介导miR-16在hMSCs中的表达,为进行miR-16的功能研究创造了条件。     

不同肾功能患者急诊PCI后血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的变化

目的:观察不同肾功能的急性冠状动脉(冠脉)综合征患者在行急诊冠脉介入治疗(PCI)前后血清中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(S-NGAL)的变化趋势。方法:序贯法入选急诊PCI的急性冠脉综合征患者57例,分为慢性肾脏疾病(CKD)组(14例)和非CKD组(43例),ELISA法测定术前、术后4、8、12hS-NGAL。结果:CKD组PCI前后S-NGAL总体变化差异无统计学意义(P>0.05);非CKD组术后较术前下降,且术后8h开始与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。2组PCI术后各时间点S-NGAL水平均差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:S-NGAL在PCI前后随时间改变而呈下降趋势,而非CKD更为明显。     

融水小型猪剖检程序以及主要脏器自发性病变组织学观察

目的掌握融水小型猪主要器官解剖学及组织学数据。方法选择6月龄F1代小型猪雌雄各两头,麻醉后测体重,进行大体解剖,颈动脉取血测定全身血量、血浆量,记录脊柱数量和恒齿齿式,取出主要脏器进行拍照、称重及测量,切取脏器的部分组织,用福尔马林固定后做组织切片,在显微镜下观察并拍照。结果获得了融水小型猪的主要脏器形态图片、组织学显微图片、主要脏器重量、脏器系数及其他基础数据。结论初步掌握了融水小型猪的器官解剖学和组织学基础数据。