可降解复合粉的制备及其急性毒性评价

目的采用可生物降解的壳聚糖、海藻酸钠和胶原蛋白制备一种复合微粒并评价其安全性能。方法采用乳化交联技术混合以上几种材料制成一种结构疏松的复合微粒;粒径分析仪测定其粒径;扫描电镜观察其超微结构;在模拟体液中测定其吸水率;MTT法观察其细胞毒性,腹腔注射观察其急性毒性;体外降解实验考察其生物降解性能。结果该复合微粒呈白色粉体状,结构疏松,形态圆整,密度为(140±14)mg/cm3,粒径分布为2~40μm;复合微粒在模拟体液中迅速溶胀,逐渐降解,2 min时溶胀率达到2293%,4周后的降解率为40%;实验初期,微粒对细胞的增殖和小鼠的行动均有一定的抑制作用,并随时间的延长而减弱或消失。结论制备的复合微粒粒径分布窄,吸水性好,可生物降解且具有较好的安全性,可望作为一种新型的粉体生物敷料。     

光敏剂叶酸-卟啉对宫颈癌HeLa细胞的靶向性和光动力活性

目的评价光敏剂卟啉Ⅰ对宫颈癌HeLa细胞的肿瘤靶向性和光动力活性。方法采用荧光测定法和激光共聚焦扫描显微镜观察宫颈癌HeLa细胞对卟啉Ⅰ的吞噬作用;采用MTT试验观察卟啉Ⅰ在有或无光照条件下对人正常肝L-02细胞、肺腺癌A549细胞和宫颈癌HeLa细胞的生长抑制作用。结果孵育24 h后HeLa细胞对卟啉Ⅰ的吞噬量是前体卟啉A的35倍,且这种吞噬作用可被过量叶酸的加入明显抑制;卟啉Ⅰ对HeLa细胞呈现出很低的暗毒性和明显的光毒性,光照下在卟啉Ⅰ浓度为5.0×10-5mol/L时,HeLa细胞的生长抑制率达到84.6%;并且这种光毒性具有明显的叶酸受体阳性细胞选择性,在相同条件下,对正常L-02肝细胞和叶酸受体阴性A549细胞无光毒性。结论卟啉结构中引入叶酸单体后,由于叶酸受体的介导作用明显改善了该光敏剂的肿瘤靶向性和光动力活性。     

应用DNA shuffling及T7噬菌体展示技术定向进化并筛选鉴定sCD74突变体

目的 利用DNA shuffling技术,结合17噬菌体表面展示技术,定向进化MIF受体sCD74.以获得高亲和力突变体基因.方法 定点突变的牛、小鼠、人CD74胞外同源区基因以Dnase Ⅰ消化,回收25-50 bp片段进行DNA shuff-ling;将500 bp shuffling产物经限制性酶切后与T7噬菌体DNA连接,与17 package extracts组建噬菌体文库;采用竞争淘洗方法进行5轮筛选,富集得到高亲和力结合MIF的噬菌体;挑取20株噬菌体单克隆进行基因克隆并测序,对测序结果进行生物信息学分析,同时以竞争ELISA初步鉴定进化效果.结果 20株噬菌体单克隆具有相同的sCD74突变基因.为相同克隆,将此克隆命名为sHCD74m,其基因命名为sHCD74mD;竞争性ELISA分析显示其MIF结合力提高.结论 得到了与MIF高亲和力结合的sCD74突变体基因sHCD74mD.     

新型血红蛋白携氧载体OC33抗猪重度失血性休克的有效性研究

目的明确新型血红蛋白携氧载体OC33是否具有抗猪重度失血性休克的作用。方法无特定病原(specified-pathogens free,SPF)级小香猪,雌雄各半,8~10月龄,体重25~30kg。制备50%失血量重度失血性休克猪模型,随机分为乳酸林格式液组(LR),全血组(WB),OC33低、中、高剂量组(0.1g Hb/kg、0.3g Hb/kg、0.5g Hb/kg)进行治疗,每组6只。测定组织氧供(DO2)、氧耗(VO2)、血流动力学、心肌力学、心输出量及心功能等指标,记录24h存活率与存活时间,进行统计学处理以明确OC33是否具有抗猪重度失血性休克的作用。结果各剂量OC33组模型动物氧供、氧耗、血流动力学、心输出量、心肌力学指标(MAP、LVSP、LVEDP、+/-dp/dtmax)、心功能(CO、CI、SI)、存活时间与存活率等指标均优于LR组,其中0.5g Hb/kg组效果接近WB组。结论 OC33具有较好的抗猪重度失血性休克的效果。     

腹部外科术后切口愈合不良风险因素与防治分析

腹部外科术后切口愈合不良多继发于切口感染、出血、皮下脂肪液化、缝合不当以及营养状况不良等,严重影响患者术后康复和生活质量。早期发现、合理治疗是提高切口愈合不良治疗效果的关键。本文就腹部外科术后切口愈合不良的影响因素、风险防范和治疗现状研究进展进行综述。     

白介素-1β通过改变PKC、Rho激酶活性调节家兔内毒素休克后肠系膜上动脉钙敏感性

目的观察在内毒素休克及白介素-1β介导家兔肠系膜上动脉(superior mesenteric artery,SMA)钙敏感性改变中SMA PKC、Rho激酶活性的变化。方法健康成年家兔96只,雌雄不拘,分为两实验大组:①内毒素休克组(包括5小组:正常对照组、LPS 30 min组、LPS 1 h组、LPS 2 h组和LPS 4 h组);②IL-1β处理组(包括3小组:0 ng/ml IL-1β组、50 ng/ml IL-1β组、100 ng/ml IL-1β组),每小组12只家兔。经耳缘静脉注入1 mg/kg LPS(O111∶B4)复制内毒素休克模型,在给LPS前及给LPS后30 min,1、2、4 h取家兔SMA,提取其PKC及Rho激酶蛋白并纯化,检测PKC及Rho激酶活性的变化,并与内毒素休克后血管钙敏感性变化进行相关分析;无菌条件下取正常成年家兔SMA,在0、50、100 ng/ml IL-1β作用12 h后,检测其PKC及Rho激酶活性的变化,并与IL-1β处理后家兔SMA钙敏感性变化进行相关分析。结果在给LPS后30 min至1 h成功复制出内毒素休克模型,与正常对照组相比,PKC、Rho激酶活性均在给LPS 30 min后升高(P<0.01),在2 h及4 h后均降低(P<0.01),与钙敏感性变化均呈显著正相关(r=0.912和0.968,P<0.05)。与0 ng/mlIL-1β组相比,100 ng/ml IL-1β能使PKC、Rho激酶活性明显降低(P<0.05),与钙敏感性变化均呈显著正相关(r=0.922和0.934,P<0.05)。结论 IL-1β能通过改变PKC、Rho激酶活性来调节家兔肠系膜上动脉钙敏感性,IL-1β可能通过改变PKC、Rho激酶活性调节家兔内毒素休克后肠系膜上动脉钙敏感性变化。