900MHz电磁辐射对体外培养大鼠海马神经干细胞超微结构的影响

目的观察900MHz电磁辐射对体外培养大鼠海马神经干细胞超微结构的影响。方法体外培养新生大鼠海马神经干细胞,分为假辐照组(0mw/cm2)、辐照1组(1mW/cm2)和辐照2组(3mW/cm2)。假辐照组在辐照1组和2组进行辐照时置于常规条件下培养。辐照1组和辐照2组又根据辐照方式不同分为2个亚组:连续辐照亚组,于细胞接种后第2天起每天辐照2h,连续6d;一次性辐照亚组,于接种后第6天一次性辐照12h。采用原子力显微镜(AFM)观察细胞表面超微结构的变化,测定细胞膜表面的平均粗糙度,以轮廓算术平均偏差(Ra)表示。采用透射电镜(TEM)观察胞内超微结构的变化。结果 900MHz电磁辐射后,与假辐照组相比,辐照1组和2组神经干细胞表面粗糙,有"孔洞"、"裂隙"样改变,细胞质均匀化改变,细胞器结构明显改变,细胞核形态结构破坏,核膜消失,染色质固缩、边集,这些改变在辐照2组更为明显。与假辐照组相比,辐照1组和2组细胞表面粗糙度(Ra)明显增加(P<0.05),其中辐照2组较辐照1组更为显著(P<0.05)。前述变化在连续辐照和一次性辐照的细胞中均存在且相似。结论 900MHz电磁辐射可致体外培养的神经干细胞胞膜和胞内超微结构出现明显的损伤样改变,且与微波辐照剂量可能有一定关系。     

小鼠逆行性遗忘动物模型的建立

目的 探讨用电击、缺氧、麻醉等处理方法 建立小鼠逆行性遗忘动物模型的可行性及优劣.方法 将72只昆明小鼠分为对照组及电休克、缺氧、丙泊酚、电休克+缺氧、电休克+丙泊酚5个处理组.先给予各组相同的避暗训练以建立避暗行为,随后分别给予各处理组120～180 V电击、密闭容器内缺氧、腹腔注射0.3 mL丙泊酚、120～180 V电击+密闭容器内缺氧、120～180 V电击+腹腔注射0.3 mL丙泊酚相应处理.次日开始用暗箱观察各组小鼠的步入潜伏期,以分析避暗行为的变化.结果对照组小鼠在避暗训练后24 h(第4天)的步入潜伏期为(111.7±17.2)S,缺氧组、电休克+缺氧组、电休克+丙泊汾组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);电休克组、缺氧组、电休克+缺氧组、电休克+丙泊酚组4组均有部分小鼠步入潜伏期明显缩短至30 s以内,其发生率分别为43.8%、45.4%、66.7%、60%,而丙泊酚组步入潜伏期无明显变化.第5天、第8天观察显示,步入潜伏期缩短的小鼠中个别出现恢复.结论 电休克、缺氧、电休克+缺氧、电休克+丙泊酚处理后的小鼠中部分可出现逆行性遗忘表现,以电休克+缺氧组建模的成功率最高:已出现逆行性遗忘的小鼠中部分可在后期恢复;单纯丙泊酚不能引起逆行性遗忘.     

生理学机能实验课的备课体会

生理学机能实验是学生掌握并巩固理论知识的重要方法。实验教学的目的不仅在于验证理论,学习实验方法,训练学生的基本操作和技能,更重要的是提高学生的综合素质,因此机能实验教学就具有重要的意义。机能实验学备课内容相对复杂,而备课是否充分直接影响到课堂教学的质量和效果。结合多年来实验教学经验,介绍了在备课方面所做的工作。     

清醒豚鼠眨眼反射信号的提取与分析方法的研究

目的:介绍一种从清醒豚鼠眨眼反射记录中有效地提取并分析其惊吓性眨眼反射(Eyeblink startle reaponse,EBSR)、条件性眨眼反射以及非条件眨眼反射(Eyeblink unconditionel response,EBUR)波形的方法.方法:采用正弦波纯音和束状医用氧气流分别作为条件刺激和非条件刺激先后作用于豚鼠,训练豚鼠建立眨眼条件反射(Eyeblink conditioned reaponae,EBCR),在此过程中利用高分辨率、低扭矩的肌肉张力换能器测量眨眼活动,并通过基线计算与文件取舍等步骤分析这些测量数据.结果:该方法可以快速准确地对眨眼反射记录进行有效提取和分析,并与其它方法的相关报道一致.结论:该眨眼反射测量方法操作和分析过程简单,结果准确,可用于研究小型啮齿类动物EBCR训练中眨眼活动的拓扑学参数变化.     

小鼠逆行性遗忘动物模型的建立

目的 探讨用电击、缺氧、麻醉等处理方法 建立小鼠逆行性遗忘动物模型的可行性及优劣.方法 将72只昆明小鼠分为对照组及电休克、缺氧、丙泊酚、电休克+缺氧、电休克+丙泊酚5个处理组.先给予各组相同的避暗训练以建立避暗行为,随后分别给予各处理组120～180 V电击、密闭容器内缺氧、腹腔注射0.3 mL丙泊酚、120～180 V电击+密闭容器内缺氧、120～180 V电击+腹腔注射0.3 mL丙泊酚相应处理.次日开始用暗箱观察各组小鼠的步入潜伏期,以分析避暗行为的变化.结果对照组小鼠在避暗训练后24 h(第4天)的步入潜伏期为(111.7±17.2)S,缺氧组、电休克+缺氧组、电休克+丙泊汾组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);电休克组、缺氧组、电休克+缺氧组、电休克+丙泊酚组4组均有部分小鼠步入潜伏期明显缩短至30 s以内,其发生率分别为43.8%、45.4%、66.7%、60%,而丙泊酚组步入潜伏期无明显变化.第5天、第8天观察显示,步入潜伏期缩短的小鼠中个别出现恢复.结论 电休克、缺氧、电休克+缺氧、电休克+丙泊酚处理后的小鼠中部分可出现逆行性遗忘表现,以电休克+缺氧组建模的成功率最高:已出现逆行性遗忘的小鼠中部分可在后期恢复;单纯丙泊酚不能引起逆行性遗忘.     

放射损伤、烧伤和放烧复合伤早期心室乳头肌细胞内K+浓度及动作电位的变化

采用Ｋ＋选择微电极（Ｋ＋－ＩＳＭＥ）和普通电极，测定正常大鼠及大鼠放射损伤、烧伤和放烧复合伤后第１，３，８和２４小时心室乳头肌细胞内Ｋ＋浓度（〔Ｋ＋〕ｉ）及跨膜电位的变化。结果显示：①伤后２４小时内，心肌〔Ｋ＋〕ｉ在放射损伤组（Ｒ组）无显著变化，在烧伤组（Ｂ组）和放烧复合伤组（ＲＢ组）均下降，以Ｂ组为甚；②三种损伤２４小时内跨膜电位参数ＲＰ、ＡＰＡ和Ｖｍａｘ均降低。ＡＰＤ５０和ＡＰＤ９０在Ｂ组均缩短，在Ｒ组和ＲＢ组均延长，以Ｒ组为甚。提示：①放射损伤抑制心肌细胞Ｎａ＋内流和Ｋ＋外流；②烧伤抑制Ｎａ＋内流促进Ｋ＋外流；③复合伤并非放射损伤和烧伤的简单叠加。     

粉防己碱对缺氧所致大鼠皮层神经元钙通道功能变化的影响

用细胞贴附式膜片钳单通道记录技术 ,研究了粉防己碱 ( Tet)对缺氧状态下大鼠大脑皮层神经元L-和 N-型钙通道变化的影响 .结果发现 ,Tet7.5,1 5和 30 μmol·L-1浓度依赖性缩短由缺氧诱导的L-和 N-型钙通道开放时间增加 ,降低开放概率 .Tet对皮层神经元 L-和 N-型钙通道的这一作用可能是其脑缺氧保护作用的机理之一 .     

新生大鼠背根神经节机械敏感性离子通道的电生理研究

目的:探讨新生大鼠背根神经节(DRG)的机械敏感性离子通道(MS通道)电生理特性。方法:将新生大鼠DRG细胞培养2—4d后,应用细胞贴附式和内面向外式膜片钳技术记录细胞膜上的MS通道电流,对通道的电生理性质,如压力-电流关系、通道的影响因素和通道在DRG细胞上的分布进行了分析。采用的机械刺激方式为负压抽吸。结果:在培养的大鼠DRG细胞膜上发现一种对机械刺激敏感的电流,开放压力阈值为-12—-15mmHg,P1/2=-37mmHg。压力恒定时,电流恒定;去除压力,电流回到基线水平。在施加压力的30s内,电流无明显衰减趋势。同一电位下,随压力的增大,通道活性也增大,但电流的幅度不变。钳制膜电位为-60mV,在-50mmHg负压下电流的平均幅度为(-3.40±0.13)pA,平均开放概率为0.448±0.125。该通道对机械刺激的反应可被钆和秋水仙素阻断,河豚毒素可阻断大直径神经元上的外向电流,对小直径细胞无效。阿米洛利对该电流无效。该通道主要存在于中、小直径神经元(≤30!m)上。结论:大鼠DRG细胞膜的MS通道参与机械信号,特别是伤害性刺激信号的转导,对其电生理性质的研究为理解机械信号转导的机制提供了理论依据。     

《医学机能学实验技术》课程的开设初探

为适应现代医学科研实验室专用人才培养的需要,我校专门开设了《医学机能学实验技术》。作为一门以实践教学为主的必修课程,其主要授课对象是医学实验技术专业的学员。在这门课程的开设过程中,对课程标准、实验内容、教学方法以及成绩评定等方面进行了探索。     

"缺血"对大鼠大脑皮层神经元NMDA受体通道的影响

目的：研究“缺血”大鼠大脑大皮层神经元Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体通道的单通道变化特征。方法：细胞贴附式膜片钳技术。结果：在“缺血”状态下，ＮＭＤＡ受体通道３５ｐＳ和１００ｐＳ电导水平的开放概率分别由对照组的０．０７９±０．００６和０．０６７±０．００４增加到０．３０８±０．１５５和０．４８８±０．１２６（Ｐ＜０．０１），３５ｐＳ通道开放时间常数τ２由对照值（４．１７±０．３８）ｍｓ增加到（８．５４±２．０５）ｍｓ（Ｐ＜０．０１），关闭时间由（７５．５０±１４．１０）ｍｓ缩短到（１１．８０±４．３０）ｍｓ（Ｐ＜０．０１）。结论：“缺血”可显著开放大鼠大脑皮层神经元ＮＭＤＡ受体通道，使钙内流增加，对胞内钙超载起重要作用，此可能是脑缺血细胞损伤的机制之一。