蝎毒抗海人酸诱导大鼠癫痫的作用

目的:研究蝎毒抗海人酸(Kainic acid KA)诱导大鼠癫痫的作用。方法:抗海人酸(10mg/kg)诱发SD大鼠出现急性癫痫发作后,将其分为2组,每天灌胃分别给予生理盐水,蝎毒粗提液(SV 100mg/kg)。10天后再次同剂量KA检测癫痫的敏感性及免疫组化测其检验结果。结果:行为学结果经统计学处理后表明,SV可明显抑制动物癫痫敏感性的形成。免疫组化结果表明, SV可防止海马硬化的形成。     

人参皂苷Rg1对痴呆模型大鼠行为学及酪氨酸蛋白激酶A表达的影响

目的探讨人参皂苷Rg1对痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响及其对酪氨酸蛋白激酶A（TrkA）阳性细胞的保护作用。方法采用切断成年Wistar大鼠左侧穹窿海马伞（FF）的方法，建立隔-海马胆碱能系统损害的痴呆模型。分为模型组、治疗组和假手术对照组3组。治疗组经腹腔内注射Rg1（5mg／kg），模型组和假手术对照组给予生理盐水。利用Morris水迷宫测定其学习记忆能力，利用免疫组化及图像分析测定大鼠内侧隔核（MS）和斜角带垂直支（VDB）TrkA阳性细胞数及OD值。结果治疗组大鼠的学习记忆成绩优于模型组（P〈0．05），其MS和VDB的TrkA阳性细胞数及OD值与模型组相比也有改善（P〈0．05）。结论人参皂苷Rg1对中枢胆碱能系统有保护作用，能改善学习记忆能力。     

拉曼光谱法快速区分周围神经束性质

目的探索一种快速鉴别神经束性质的方法。方法取新西兰大白兔32只,放血处死后,在手术显微镜下暴露取脊神经前根、后根各3~5 mm,立即做冰冻横切片,片厚30μm,进行拉曼光谱观察。结果同类标本拉曼光谱重现性好,光谱特征基本相似。运动神经与感觉神经的拉曼光谱在1 088 cm-1、1 276 cm-1、1 439 cm-1等附近的拉曼振动峰相对强度存在明显差异,1276 cm-1处的峰值与1 439 cm-1处的峰值比反映了运动神经与感觉神经之间的微观结构差异。结论不同性质神经拉曼光谱具有各自的特征谱,依据光谱特征的不同来区分神经束性质是一种鉴别神经束性质的有效方法。     

线粒体加工肽酶干扰RNA真核表达载体的构建

目的利用干扰RNA技术构建线粒体加工肽酶(mitochondrial processing peptidases,MPPs)干扰RNA真核表达载体,探讨MPPs在神经细胞中的作用,为帕金森病的研究提供有价值的资料。方法(1)根据Gen-Bank提供的大鼠MPPsα亚基(peptidase mitochondrial processing alpha,Pmpca)序列,设计并合成4对MPPs干扰RNA单链寡核苷酸:MPPs-SR-1113,MPPs-SR-1425,MPPs-SR-561,MPPs-SR-903。(2)使互补的单链寡核苷酸模板退火,再转化为能表达其小发卡结构RNA的DNA序列。(3)使PGPU6/GFP/Neo载体的线性化。(4)shRNA与载体的连接。(5)酶切鉴定并测序鉴定结果。结果(1)酶切结果表明,所有质粒均为阳性重组载体。(2)经鉴定证实,构建的siRNAs序列与基因库中序列完全相同,并且未发现有突变、缺失、插入等异常存在。结论利用干扰RNA技术可成功构建MPPs干扰RNA真核表达载体。     

糖尿病足溃疡大鼠血锌水平及金属硫蛋白的表达意义

目的 探讨糖尿病足溃疡大鼠血锌水平及金属硫蛋白（ metallothionein,MT）的表达对清除自由基及抗氧化作用的意义.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组（20只）和造模组（40只）,其中造模组链脲佐菌素尾静脉注射诱导糖尿病,对照组注射等量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液.将两组大鼠足背部一矩形全层皮肤组织切除,建立糖尿病足溃疡大鼠模型,监测两组大鼠血锌水平变化,应用免疫组化技术检测MT的表达.结果 造模组大鼠血锌水平（1.17 ±0.09）较对照组（ 1.48±0.07）明显减低,差异有统计学意义（t=12.94,P＜0.01）.免疫组化研究发现在对照组大鼠有少量MT表达,而造模组大鼠MT的表达明显增高,差异有统计学意义（x2=12.78,P＜0.01）.结论 糖尿病足溃疡大鼠的血锌水平及MT的表达情况可能与清除自由基、抗氧化作用有关,MT的表达增高对防止糖尿病足溃疡病变进一步发展可能具有重要作用.     

蛋白质组学技术鉴定帕金森病模型中的3种新蛋白质

目的 利用蛋白质组学技术对MPP 诱导的PC12细胞帕金森病(PD)模型进行研究,以期发现PD发病机制中的新蛋白.方法 建立MPP 诱导的PC12细胞PD模型并提取细胞总蛋白,荧光差异凝胶电泳(D1GE)进行蛋白样品标记与分离,应用DeCyder软件分析蛋白质差异表达信息,运用MALDI-TOF质谱鉴定差异蛋白质.结果 质谱分析和数据库检索鉴定了3种可能同PD发病相关但在有关PD研究文献中尚未见报道的新蛋白质,他们分别足与线粒体功能相关的蛋白MPPs,具有分子伴侣活性的蛋白NAC和与免疫炎症相关的蛋白gc1qBP.结论 这些新发现蛋白可能与PD的发病机制密切相关.     

金属硫蛋白对快速老化痴呆小鼠海马抗氧化损伤作用的研究

目的研究金属硫蛋白对快速老化痴呆小鼠（SAMP8）海马抗氧化损伤的作用。方法成年SAMP8小鼠腹腔注射不同剂量和种类的金属硫蛋白（metallothionein，MT，MT3和MT1）。空白对照组用生理盐水代替，连续注射28d后测定小鼠海马几种氧化-抗氧化生化指标。结果高、中浓度MT3组与空白对照组比较总超氧化物歧化酶（SOD）活性升高，丙二醛（MDA）水平降低P〈0．05。中浓度MT1和高、中、低3种浓度的MT3均可导致海马组织谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）的活性增强P〈0．05；相同浓度的MT3组SOD、GSH—Px活性高于MT1组P〈0．05。结论MT可以提高鼠脑的抗氧化能力，MT3的作用效果与浓度有关。相同浓度的MT1和MT3，后者使海马抗氧化能力提高的作用更强。     

载脂蛋白E基因多态性及脂类代谢与缺血性脑卒中亚型关系的研究

目的探讨载脂蛋白E(apoE)基因多态性及脂类代谢与缺血性脑卒中亚型的关系。方法对急性动脉粥样硬化性脑梗死患者(ACI组)47例、腔隙性脑梗死患者(LI组)急性发作期48例、急性栓塞性脑梗死组患者14例和对照组50例,用聚合酶链反应限制性片段长度多态性进行apoE基因HhaI多态性测定,并进行血脂及载脂蛋白的测定。结果ACI组apoEε4等位基因频率明显高于其他脑卒中亚型及对照组(P<0.05)。ACI组的高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于其他3组,而低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显高于其他3组(P<0.05)。ACI组各等位基因间血脂水平比较,含ε4等位基因者LDL-C水平高于含ε3者(P<0.05)。无论是E3/3还是E3/4 ACI组的总胆固醇水平均高于对照组,HDL-C水平均低于对照组(P<0.05)。在E3/4 ACI组的LDL-C水平明显高于对照组。结论apoEε4等位基因与ACI发病及血脂代谢改变有关;LI的apoE基因多态性研究与ACI不一致,说明apoE基因多态性在LI的发病中无明显的致病作用;不同类型的脑卒中亚型急性发作期血脂水平不同。     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马组织学变化的影响

目的研究金属硫蛋白(MT)3对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马结构CA1区神经元组织学变化的影响。方法给小鼠不同浓度MT3及盐水腹腔注射28 d,处死小鼠后应用光镜和电镜观察制备标本海马结构神经元的变化。结果快速老化小鼠对照小鼠(SAMR1)海马CA1区锥体细胞排列较整齐、均匀,胞膜完整,染色质分布均匀,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁清楚,细胞器清晰可见。SAMP8组海马CA1区可见锥体细胞稀疏、排列紊乱,大部分神经元肿胀、空化,出现凋亡细胞,很多胞核固缩深染,胶质细胞增多,有较多脂褐素沉积。低、中、高浓度MT3组海马CA1区锥体细胞较空白对照组结构较清晰,排列较整齐均匀。神经元核基质呈轻度空化改变,胞质内都可见线粒体、粗面内质网及脂褐素,胶质细胞减少。高浓度MT3组的超微结构最接近于SAMR1组,但仍处于老化状态。结论 SAMP8海马有组织结构和超微结构的改变。MT3对SAMP8海马锥体细胞有保护的作用。     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马锌和铜含量的影响

目的研究快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马锌和铜含量的变化及外源性金属硫蛋白3(MT3)对SAMP8海马锌和铜含量变化的影响,并与MT1进行比较。方法将SAMP8 60只随机分为痴呆组、低浓度MT3组、中浓度MT3组、高浓度MT3组、MT1对照组和空白对照组;每组10只,SAMP1 10只为正常对照组。连续腹腔注射不同浓度MT3等4周后处死小鼠,应用原子吸收分光光度计检测各组小鼠海马锌和铜的含量,并观察其与低、中、高3种浓度MT3的量效关系。结果与正常对照组比较,痴呆组小鼠海马锌含量明显下降(P<0.05);与低浓度MT3组和高浓度MT3组比较,中浓度MT3组小鼠海马锌含量明显升高(P<0.05);与空白对照组比较,中浓度MT3组小鼠海马锌含量明显升高(P<0.05);MT1对照组与低、中、高浓度MT3组比较,小鼠海马锌含量差异无统计学意义。各组小鼠海马铜含量差异无统计学意义。结论 SAMP8海马锌含量降低。MT3可以增加SAMP8海马锌含量,但锌含量不随MT3浓度增加而增加。而对铜含量影响不大。