特异性抑制髓母细胞瘤1型胰岛素生长因子受体信号通路后的差异性基因表达

目的 应用聚合酶链反应(PCR)芯片技术观察特异性抑制髓母细胞瘤细胞1型胰岛素生长因子受体(IGF-1R)信号通路的差异性基因表达,探讨IGF-1R在髓母细胞瘤细胞增殖中的作用.方法 体外培养髓母细胞瘤Doay细胞株,使用不同终质量浓度NVP-ADW742作用48 h和24 h后,检测细胞增殖和凋亡,分别使用IGF-1R酪氨酸蛋白激酶抑制剂NVP-ADW742终质量浓度为0、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0、50.0μmol/L作用48 h后检测细胞存活率,以及终质量浓度为0.1、1.0、2.0、5.0、10.0μmol/L作用24 h后检测凋亡率,应用PCR芯片技术检测IGF-1R信号通路的差异性基因表达,并采用Western blot检测其蛋白表达.结果 在对应浓度的NVP-ADW742作用下Doay细胞的存活率分别为95.95%、93.95%、91.97%、86.60%、70.57%、15.01%、1.63%(P＜0.05),凋亡率分别为6.92%、8.83%、11.22%、17.27%、29.98%(P＜0.05),两者呈剂量依赖性,其浓度越高,抑制和促凋亡作用越强;在PCR芯片检测有14个差异表达基因;Western blot检测表明在2μmol/L的NVP-ADW742作用下,随时间延长PI3K、Akt、p38、GSK-3β和bcl-2蛋白表达逐渐下调.结论 髓母细胞瘤中IGF-1R信号通路异常可以促进肿瘤细胞的增殖,利用功能性PCR芯片可以有效地检测肿瘤细胞中相关基因在肿瘤增殖和凋亡中的作用.     

三磷酸腺苷结合盒转运体成员2在人脑胶质瘤中的表达及其与神经巢蛋白表达的关系

目的 探讨三磷酸腺苷结合盒转运体成员2(ABCG2)在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤分级和神经巢蛋白(nestin)表达的关系.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测ABCG2在52例不同病理级别胶质瘤中的mRNA表达;免疫组织化学SABC法检测ABCG2和nestin的蛋白表达.结果 ABCG2在脑胶质瘤中的mRNA表达与正常脑组织比较呈过表达(P<0.05),且随着病理级别的升高而增加(P<0.05);免疫组织化学显示ABCG2在52例胶质瘤中的阳性表达率为32.7%(17/52),并与病理级别明显相关(x2=4.62,P<0.05),主要呈亲血管分布;ABCG2的表达与nestin的表达明显相关(x2=7.60,P<0.05).结论 ABCG2在人脑胶质瘤中的表达随着病理级别的升高而逐渐增加,且与nestin的表达呈正相关;脑肿瘤干细胞可能与神经干细胞具有一定的同源性.     

大黄酸通过抑制ERK途径诱导胶质瘤细胞增殖分化的实验研究

目的探讨大黄酸对胶质瘤细胞增殖和分化的影响,以及其可能的机制。方法大鼠F98和人Hs683细胞系分别予以不同浓度的大黄酸处理(大黄酸处理组)和单用培养基培养(对照组)。采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测各组细胞的增殖能力;倒置显微镜观察细胞形态变化;免疫细胞化学检测细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达。ELISA法检测经25μmol/L大黄酸处理不同时间的细胞磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-excelluar signal-regulated kinase,p-ERK)的活性。结果与对照组相比,大黄酸处理组F98细胞的相对活性降低,细胞胞体失去了对照组细胞的多边形形状,胞体变小,并发出较长的突起;免疫细胞化学检测发现GFAP表达增加。大黄酸处理后的F98细胞p-ERK相对活性降低。用ERK1/2特异性抑制剂PD98059处理的F98细胞及25μmol/L大黄酸处理的人Hs683细胞增值活性下降,细胞形态出现与大黄酸处理F98细胞相似的变化,GFAP表达亦明显增加。结论大黄酸抑制胶质瘤细胞增殖,并可能通过抑制ERK途径促进胶质瘤细胞向成熟星形胶质细胞分化。     

三磷酸腺苷结合盒转运体成员2在人脑胶质瘤中的表达及其与神经巢蛋白表达的关系

Objective To study the expression of ATP-binding cassette superfamily G member 2 ( ABCG2) and its relationship with the malignant degree and expression of nestin in human gliomas. Methods Fifty-two gliomas of different WHO grades and 8 normal brain tissues were detected for the mRNA expression of ABCG2 by using real-time quantitive polymerase chain reaction (PCR). And the protein expression of ABCG2 and nestin was detected by immunohistochemistry. Results The mRNA of ABCG2 was overexpressed in gliomas as compared with that in normal brain tissues (P<0. 05), and up-regulated with the increase of pathologic degrees (P<0. 05 ). The positive protein expression rate of ABCG2 in 52 gliomas was 32.7%. The positive rate was significantly higher in grade Ⅲ-Ⅳ than in grade Ⅰ -Ⅱ (x2 =4. 62, P < 0. 05). And the expression level of ABCG2 was obviously related with the expression of nestin (x2= 7. 60,P < 0.05). Conclusion The expression level of ABCG2 was obviously related with glioma pathological grade and the expression of nestin. Brain tumor stem cells may have some homology with nerve stem cells.     

合肥地区小儿肺炎链球菌感染及菌型研究

本文报告小儿肺炎链球菌感染34例,以菌血症、肺炎及脑膜炎为主,有32例,占94.1％。34例获菌株39株,除4株血与脑脊液培养重复者外,35株可分成11个血清型(群),占前四位的有6个型(群):5型、1型、6群、2型、14型及12群,共29株,占82.9％,此为今后制造疫苗提供了科学依据。     

三磷酸腺苷结合盒转运体成员2在人脑胶质瘤中的表达及其与神经巢蛋白表达的关系

Objective To study the expression of ATP-binding cassette superfamily G member 2 ( ABCG2) and its relationship with the malignant degree and expression of nestin in human gliomas. Methods Fifty-two gliomas of different WHO grades and 8 normal brain tissues were detected for the mRNA expression of ABCG2 by using real-time quantitive polymerase chain reaction (PCR). And the protein expression of ABCG2 and nestin was detected by immunohistochemistry. Results The mRNA of ABCG2 was overexpressed in gliomas as compared with that in normal brain tissues (P<0. 05), and up-regulated with the increase of pathologic degrees (P<0. 05 ). The positive protein expression rate of ABCG2 in 52 gliomas was 32.7%. The positive rate was significantly higher in grade Ⅲ-Ⅳ than in grade Ⅰ -Ⅱ (x2 =4. 62, P < 0. 05). And the expression level of ABCG2 was obviously related with the expression of nestin (x2= 7. 60,P < 0.05). Conclusion The expression level of ABCG2 was obviously related with glioma pathological grade and the expression of nestin. Brain tumor stem cells may have some homology with nerve stem cells.     

53例小儿细菌性脑膜炎有关病原研究

研究目的 小儿细菌性脑膜炎(菌脑)的病原构成及病原检测方法的阳性率比较。 研究方法 共53例,应用肺炎链球菌多价型(PNC)、流感嗜血杆菌B型(Hib)、脑膜炎双球菌A及B群(MCA,MCB)三种细菌抗血清,采用对流免疫电泳(CIE)检测脑脊液(CSF)、血、尿抗原共47例,CSF涂片革兰氏染色找细菌25例,CSF培养20例,血培养20例。 结果和结论 1.明确病原菌者86.7％,其中Hib占45.28％为主要病原菌,而MC28.3％占第二位,PNC占9.43％。2.检测方法中证明CIE检测抗原阳性率(89.4％)明显优于常规检查细菌的方法(15～35％),(P<0.01)。3.入院时第一次CSF,用CIE法检测病原阳性率最高。     

Wip1基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性研究

背景与目的：野生型p53诱导的磷酸酶1（wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1）是一种新发现的癌基因,其在多种肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨Wip1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性。方法：收集52例原发胶质瘤及8例脑外伤或脑出血后行内减压术的正常脑组织标本,采用实时荧光定量PCR（real-time fluorogentic quantitative,RFQ-PCR）法检测脑胶质瘤组织中Wip1mRNA的表达,Western blot法检测Wip1蛋白的表达,DNA直接测序法检测脑胶质瘤组织中p53基因的突变情况。统计学分析不同脑胶质瘤病理分级及p53的突变状态间Wip1的表达水平的差异。结果：52例脑胶质瘤中22例（42.3%）发生p53基因突变。Wip1 mRNA在高级别胶质瘤（Ⅲ～Ⅳ级）中的表达水平较低级别胶质瘤（Ⅰ～Ⅱ级）及正常脑组织中的表达要略高,但差异无统计学意义（P〈0.05）。Wip1基因在无p53基因突变的胶质瘤组织中的表达水平较p53基因突变组要高,差异有统计学意义（P=0.009）。Wip1在野生型p53的胶质瘤中存在选择性的过表达,Wip1在胶质瘤中的过表达与病理分级无明显相关,而与p53的突变状态有关。结论：Wip1基因在脑胶质瘤中存在选择性地过表达,其过表达与p53基因野生型状态相关,可能是胶质瘤恶性进展中除p53基因突变外的另一关键作用因素。     

锌指蛋白Zfx在人脑胶质瘤中的表达与意义

背景与目的：X染色体耦联锌指蛋白（Zfx）是锌指蛋白超家族中的一员,是胚胎干细胞和成体干细胞自我更新的共同分子基础。本研究探讨Zfx在人脑胶质瘤中的表达及其与脑胶质瘤的发生和恶性程度的关系有待探讨。方法：收集52例经病理证实的脑胶质瘤肿瘤标本和8例正常脑组织标本,根据病理结果对脑胶质瘤标本进行分组,通过实时定量PCR、免疫组织化学和Westemblot等方法对标本中zfx的mRNA和蛋白表达进行检测,应用统计学方法对正常脑组织和不同恶性程度脑胶质瘤中Zfx的表达进行分析。结果：免疫组化染色结果显示,ZfX主要表达于细胞核。脑胶质瘤中Zfx的mRNA和蛋白表达均高于其在正常脑组织中的表达．在不同病理分级的脑胶质瘤中Zfx的表达水平有差异,Zfx的表达水平随脑胶质瘤的恶性程度增高而增高。结论：Zfx的mRNA和蛋白在脑胶质瘤中高表达,与脑胶质瘤的恶性程度呈正相关．它有可能是脑胶质瘤抗凋亡、恶性增殖的一个关键性的调控因子。