MicroRNA–338 在癫痫小鼠中的表达及意义

〔摘 要〕 目的：检测癫痫小鼠脑组织中 microRNA–338 表达水平，并通过拮抗 microRNA–338 水平，观察小鼠癫痫发 作情况。方法：用成年雄性 C57BL/6 小鼠为研究对象，侧脑室注射海人酸（KA）诱发小鼠癫痫发作，建立小鼠癫痫动物模型。 24 h 后运用荧光定量聚合酶链式反应（qRT–PCR）检测小鼠海马和皮质中 microRNA–338 表达变化情况。进一步给予小鼠 侧脑室注射 microRNA–338 的特异性拮抗剂（antagomir–338）、阴性对照剂（agomir–NC），观察小鼠行为学改变，同时检 测小鼠皮质及海马中 microRNA–338 表达变化情况。结果：癫痫组小鼠较对照组小鼠海马内 microRNA–338 水平显著降低 （P ＜ 0.01），而皮质中 microRNA–338 水平变化无统计学意义（P ＞ 0.05）；microRNA–338 的特异性拮抗剂可诱导小鼠 表现出癫痫发作症状。注射 microRNA–338 拮抗剂后，小鼠海马内 microRNA–338 水平显著降低（P ＜ 0.01）。结论：癫痫 小鼠中 microRNA–338 表达水平显著降低，拮抗 microRNA–338 可诱发小鼠癫痫发作。     

急性双侧旁正中丘脑损害的诊断与MRI特征

目的：研究急性双侧旁正中丘脑损害的临床表现、诊断及其MRI特点。方法：对9例急性双侧旁正中丘脑损害患者的临床表现、MRI特征及其病因诊断等资料进行分析：男性4例，女性5例；年龄26～80岁。首发表现为嗜睡2例，呼之不应、少言寡语1例，头晕、视物旋转2例，记忆力减退4例。临床诊断为双侧旁正中丘脑损害时昏迷5例，嗜睡1例，木僵样状态1例，记忆力下降2例。伴发异常眼征的4例，发热及脑膜刺激征1例。9例均在拟诊双侧旁正中丘脑损害时2d内行颅脑MRI检查，包括T1W、T2W与Flair成像，检查距首发中枢神经系统表现时间为3h～15d。结果：基底动脉尖综合征2例，可逆性缺氧性双侧旁正中丘脑损害综合征1例，不典型单纯疱疹病毒性脑炎1例，单纯性双侧旁正中丘脑梗死3例，韦尼克脑病2例。MRI检查显示；基底动脉尖综合征主要表现为双侧旁正中丘脑伴发枕叶、颞叶及小脑半球、中脑损害；韦尼克脑病主要表现为双侧旁正中丘脑伴有尾状核头部、第Ⅳ脑室底、第Ⅲ脑室与中脑导水管周围脑组织对称性损害，其余病例仅表现为双侧旁正中丘脑损害。随访结果显示：2例死亡，1例意识程度严重低下，2例神经系统缺损症候部分好转，另4例分别在治疗2周～1年后临床症状完全消失；颅脑MRI随访显示2例韦尼克脑病和1例可逆性缺氧性双侧旁正中丘脑损害综合征患者旁正中丘脑异常信号为可逆性，其余4例均为不可逆性损害。结论：急性双侧旁正中丘脑损害临床表现复杂，以脑血管疾病与代谢性疾患多见，MRI检查具有较大的辅助诊断价值。     

诱导骨髓基质细胞表达神经细胞标记物Nestin,NSE和GFAP:脑源性神经节苷脂定向诱导细胞分化作用的研究

目的：研究脑源性神经节苷脂诱导成年大鼠骨髓基质细胞定向分化为神经前体细胞的作用。方法：成年大鼠骨髓基质细胞传代纯化后，分别在无血清、无外源性生长因子、含2％t327的Neurobasal-A培养基及含20％胎牛血清的DMEM培养基中添加脑源性神经节苷脂作为诱导物，观察细胞的形态变化。结果：在无血清、无外源性生长因子、含2?7的Neurobasal-A培养基中，脑源性神经节苷脂能诱导骨髓基质细胞定向分化为神经前体细胞，其形态发生显著变化，胞体逐渐变小、折光性增强，突起逐渐增多、延长，部分细胞间可见突起连接、细胞核和核仁；诱导第5d免疫细胞荧光染色显示，神经前体细胞标记物Nestin染色阳性，同时部分细胞可见神经元特异性标记物NSE及星形胶质细胞标记物GFAP染色阳性，而少突胶质细胞标记物Nogo-A染色阴性。在含20％胎牛血清的DMEM（高糖）培养基中，脑源性神经节苷脂的这种诱导、分化作用明显被抑制，表现为细胞形态变化不明显，Nestin、NSE及GFAP染色均为阴性。两组对照组细胞形态无变化、上述染色均为阴性。结论：脑源性神经节苷脂具有诱导骨髓基质细胞成为神经前体细胞的作用，这种作用不需要外源性生长因子存在，血清可抑制这种作用，脑源性神经节苷脂在成体干细胞可塑性研究中有重要价值。     

非酒精中毒性韦尼克脑病的临床与MRI特征

目的：提高对非酒精中毒性韦尼克脑病的认识、早期诊断率及预后判断能力。材料和方法：对我院1999—2006年收治的12例非酒精中毒性韦尼克脑病患者临床特征、颅脑磁共振成像特点及治疗转归进行分析。结果：非酒精中毒性韦尼克脑病患者临床表现复杂，大多病例缺乏特征性临床表现。颅脑MRI检查显示韦尼克脑病患者疾病严重程度、临床预后和转归与其脑部组织损害范围相关，其典型主要表现为内侧丘脑、第四脑室底部及侧脑室、第三脑室、中脑导水管周围等脑组织对称性T2加权及FLAIR异常高信号，深昏迷患者出现大脑皮质损害。乳头体萎缩少见，增强可见强化。深昏迷及大脑皮质受损的患者预后不佳，其余患者及时给予维生素B1治疗，预后良好。结论：大多非酒精中毒性韦尼克脑病缺乏特征性临床表现，颅脑MRI有一定特异性，具有诊断和预后判断价值。     

颅脑MRI检查在非乙醇中毒性韦尼克脑病诊断中的价值

目的评价颅脑MRI检查在非乙醇中毒性韦尼克脑病(WE)诊断中的价值。方法对6例非乙醇中毒性WE患者的临床特征、颅脑MRI影像及治疗转归等资料进行分析。结果本组颅脑MRI显示．丘脑内侧及侧脑室、第三脑室、中脑导水管周围脑组织对称性T2W及Flair成像异常高信号，1例成为持续性植物状态的患者伴有部分皮质T2W及Flair成像异常高信号。随访显示4例康复患者，随临床表现好转其颅脑MRI异常信号逐渐消失，1例持续性植物状态患者随访2年，异常信号无变化：结论顷脑MRI对非乙醇中毒性WE具有诊断价值，其显示的损害范围可反映WE患者的疾病严重程度。     

轻度认知功能障碍患者的饮食治疗

轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)是介于正常老化和阿尔茨海默病之间的一种过渡阶段,现无有效治疗药物,但早期进行生活方式干预、包括饮食治疗或能降低MCI向痴呆症的转化率.本文介绍MCI患者的饮食治疗相关研究现状,以期能为改善MCI的风险因素提供一定的参考.     

以呼吸衰竭起病的成人线粒体肌病病例报道1例并文献复习

目的:探讨以呼吸衰竭首发起病的线粒体肌病患者的临床特点。方法:报道1例以Ⅱ型呼吸衰竭起病的线粒体肌病患者的临床表现、生化检测、肌电图和肌肉活检结果、线粒体DNA检测及治疗经过,并结合文献复习予以分析总结。结果:患者52岁男性,半年前感全身乏力,运动后易疲劳,但未影响日常生活和工作,半年内体重减轻约15斤。2016年7月行无痛胃镜肠镜检查后苏醒缓慢,发现血氧饱和度偏低伴精神症状,血气分析示Ⅱ型呼吸衰竭,转入我院。入院查体精神亢奋,自发言语,全身消瘦,抬头肌力、下肢近端力Ⅳ级,双手骨间肌、髂腰肌、股四头肌萎缩明显,未见明显肌纤颤。血氨、乳酸升高,肌酶、乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,ACh R)、副肿瘤抗体、血尿质谱分析正常,肌电图提示"活动性肌源性损害",肌活检提示"肌纤维大小不等,可见散在RRF,SDH和COX染色部分纤维酶活性增高,符合线粒体肌病改变",外周血基因检测提示mt DNA t RNA m3243A>G致病突变。予无创呼吸机辅助通气、左卡尼汀、B族维生素、辅酶Q10等对症处理,症状较前明显改善。结合文献,目前报道以急性呼吸衰竭起病的成人线粒体肌病患者仅10例(含本例),多以Ⅱ型呼衰和限制性通气障碍为主要表现。肌活检提示线粒体肌病改变,4例行基因检测的病例,均发现mt DNA t RNA m3243A>G致病突变。其中1例患者为口服安眠药物诱发,我们报道病例为应用麻醉药物后诱发。该类患者予呼吸机辅助通气及能量支持等对症治疗后均好转,预后相对良好。结论:成人突发呼吸衰竭伴轻度肢体乏力者需警惕线粒体肌病,肌活检和线粒体基因检测可提高诊断准确率。该病患者应用助眠或麻醉类药物有诱发呼吸衰竭风险,需谨慎。     

雌激素对海人藻酸致癎大鼠皮层和海马雌激素β受体表达的影响

目的观察添加雌激素后海人藻酸(Kainic acid,KA)致癎大鼠皮层和海马的雌激素β受体(ER-β)的变化.方法用荧光免疫组化法.结果ER-β免疫阳性细胞广泛分布于大鼠的皮层、海马、下丘脑以及杏仁核区域,主要位于细胞核.单纯添加雌激素(17-βestradiol,E2)组、海人藻酸致癎(KA)组、添加雌激素后海人藻酸致癎(E2加KA)组海马的ER-β免疫阳性细胞数较对照组(OIL组)明显减少(P＜0.05),以DG(齿状回,Dentate Gyrus)区的变化最明显;皮层(Cortex)的ER-β免疫阳性细胞表达变化不显著.E2+KA组的ER-β免疫阳性细胞与KA组相比减少,(P＜0 05).结论大剂量雌激素下调ER-β免疫阳性细胞的表达,且此作用有区域性.添加雌激素后致癎,ER-β免疫阳性细胞下调更显著,雌激素可能是通过下调DG区ER-β的表达加重癫癎的发作.     

全血硫胺素及其衍生物的高效液相色谱检测方法的建立

目的建立一种稳定、快捷的全血硫胺素及其磷酸酯衍生物高效液相色谱(HPLC)荧光检测方法。方法全血样本经三氯乙酸(TCA)去蛋白处理、铁氰化钾衍生,产生能被HPLC反向柱子经梯度洗脱分离的稳定荧光产物,通过荧光检测并与硫胺素及其磷酸酯衍生物标准样本比对,来确定人体全血硫胺素含量。方法通过线性方程、提取率、重复性等指标验证。结果经过检测,焦磷酸硫胺素(TDP)、单磷酸硫胺素(TMP)和硫胺素的检测限分别为8.0、1.5和2.5 nmol/L,信噪比(S/N)>10,能够满足临床需要。线性趋势良好,r>0.99。硫胺素、TMP及TDP的回收率分别为103.7%、96.8%、101.7%,重复性好,变异系数(CV)<10%。结论经TCA去蛋白、铁氰化钾衍生、梯度洗脱建立的荧光HPLC检测硫胺素及其磷酸酯衍生物衍生物的方法可靠,可用于临床检测。     

降纤酶随机双盲治疗急性脑梗死的疗效观察

目前,应用溶栓方法治疗急性脑梗死研究较多。降纤酶作为溶栓剂的一种,在治疗急性脑梗死方面已有不少报道。为更加科学地判断降纤酶对血清纤维蛋白原的降解作用和对患者神经功能的改善作用,我院参加了全国多中心、双盲、对照降纤酶治疗急性脑梗死的临床验证课题。现将我们的资料总结如下。