神经再生与疾病关系的研究进展

传统观念认为,成年中枢神经系统是不可再生的,神经再生仅发生于胚胎期及出生后早期.近年研究表明,成年啮齿类和灵长类的海马、嗅球等部位可以产生新的神经元,神经再生持续于整个成年期,在各种病理因素刺激下,神经干细胞(NSCs)发生增殖、迁移、分化,最终整合到神经元网络中~([1]),在多种疾病如帕金森病、卒中、变性疾病、抑郁、精神分裂症中发挥重要作用,有望成为新的治疗靶点,为神经系统损伤和疾病的治疗提供了一个新思路~([2]).     

PSI诱导PC12细胞的PD模型中分子伴侣家族的氧化修饰

目的 鉴定蛋白酶体抑制剂(PSI)处理的PC12细胞帕金森病(PD)模型中发生氧化修饰的蛋白质;从蛋白质水平探讨PD的发病机制.方法 本实验分为对照组和实验组.PC12细胞孵育24h后,实验组加入终浓度10 μmol/L的PSI(以DMSO溶解),对照组加入DMSO,继续孵育24h后进行研究.MTT法检测细胞存活率;吖啶橙(AO)和溴化乙啶(EB)染色检测凋亡细胞;HE染色观察细胞内包含体的形成.采用2D凝胶电泳、质谱鉴定与Western blot技术相结合的方法在PD细胞模型中筛选氧化修饰的蛋白质.结果 在实验组中,MTT法检测显示细胞存活率降至85.46%±1.75%(对照组设为100%),差异有统计学意义(P<0.05);AO和EB染色显示早期凋亡细胞,凋亡百分率为12.41%±3.61%(P<0.05);HE染色可见胞浆内嗜酸性包含体的形成.经2D Evolution软件对Western blot图像及考染的制备胶图像进行分析和统计学处理,与对照组比较实验组有统计学意义的氧化水平显著升高的蛋白点有40个,其中13个蛋白点被质谱鉴定出来,其中3个蛋白点为分子伴侣家族成员:含TCPI的伴侣素亚单位3、葡萄糖调节蛋白58及热休克蛋白700结论首次在PD细胞模型中发现分子伴侣家族蛋白的氧化修饰,为PD发病机制的研究提供了新的线索.     

蛋白酶体抑制剂诱导PC12细胞帕金森病模型中分子伴侣家族的氧化修饰

Previous studies have demonstrated that ubiquitin-proteasome system function is significantly decreased in the substantia nigra of Parkinson’s disease patients.In the present study,proteasome inhibitor Z-Ile-Glu(OtBu)-Ala-Leucinal(PSI)was used to inhibit the function of the ubiquitin-proteasome system in PC12 cells to simulate Parkinson’s disease.Oxidatively modified proteins were identified to determine pathogenesis of Parkinson’s disease.Results demonstrated that 24 hours of 10μmol/L PSI-treatment in PC12 cells simulated pathological characteristics of Parkinson’s disease:neuronal degeneration and eosinophilic inclusion formation in neurons.In PSI-treated PC12 cells,three oxidative proteins and a molecular chaperone family member were detected:chaperonin containing t-complex polypeptide 1 subunit 3,glucose-regulated protein 58,and heat shock protein 70.This is the first study to demonstrate oxidative modification of a molecule family in a cell model of Parkinson’s disease induced with PSI.     

β-七叶皂甙钠对脑缺血再灌注后血脑屏障的影响

目的 观察β-七叶皂甙钠(SA)对脑缺血再灌注后血脑屏障通透性的影响.方法线栓法制备Wistar大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,通过荧光分光光度定量的方法测定不同时间点脑组织中的伊文思蓝含量来观察血脑屏障的通透性的改变,取伊文思蓝漏出最多的时间点,设SA干预组、盐水组,于术前30min分别给予等剂量的SA、生理盐水腹腔注射,比较观察sA对血脑屏障通透性的影响.结果缺血2h再灌注3h脑组织伊文思蓝含量开始增加,再灌注24h达高峰.在缺血2h再灌注24h组术前给予SA干预,脑组织伊文思蓝含量低于手术组,二者有显著性差异(P<0.05).结论β-七叶皂甙钠可以降低脑缺血再灌注后血脑屏障通透性,起到减轻血管源性脑水肿的作用.     

缝隙连接阻断剂-辛醇对实验性局灶性脑缺血/再灌注半暗带的影响

目的研究Wistar大鼠局灶性脑缺血/再灌注后72 h内不同时间点半暗带面积的变化及缝隙连接（GJ）阻断剂辛醇（Octanol）对半暗带面积的影响。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、对照组、辛醇干预组、DMSO溶剂对照组。大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,Zea Longa评分观察行为学变化,免疫组化测定缝隙连接蛋白43（connexin43,Cx43）表达,甲苯胺蓝染色、焦油紫染色并利用图像分析仪测量半暗带面积。结果各组动物神经功能缺损评分无显著差异;缺血/再灌注后Cx43表达无明显变化;缺血/再灌注30 min开始半暗带面积逐渐扩大,于再灌注6 h达最大,以后逐渐缩小;辛醇干预组半暗带面积较对照组相比明显缩小,坏死神经元数目明显减少。结论脑缺血/再灌注对Cx43的表达无明显影响;缝隙连接阻断剂辛醇可明显缩小局灶性脑缺血/再灌注半暗带面积。     

应用激光共聚焦显微镜研究脑缺血再灌注后缝隙连接重分布

目的 探讨脑缺血再灌注对脑神经细胞间缝隙连接分布的影响.方法 应用激光共聚焦显微镜技术观察脑缺血再灌注后不同缺血区缝隙连接分布变化,并探讨其可能机制及变化规律.结果 正常组Cx43分布于星形胶质细胞之间及脑毛细血管周围,分布均匀,光斑较小,在毛细血管周围排列紧密;与正常组比较,缺血2h再灌注24h半影区Cx43光斑较大,分散的小光斑相对较少;坏死区Cx43稀疏、散乱.结论 脑缺血再灌注后半暗带区缝隙连接发生重分布,形成了更大的缝隙连接斑,以加强细胞间物质及信号的传递.

Abstract：

Objective To investigate the effect of the redistribution of gap junction after reperfusion subsequent to cerebral ischemia. Methods In the test laser scanning confocal microscope (LSCM) was used to investigate the change of Cx43 distribution, and to study its possible mechanism. Results Compared to the control group, the Cx43 expression formed into bigger plagues and remained linear disposition in the penumbra in 24h of reperfusion after cerebral ischemia and changed sparse and messy in the infarction core of ischemia. Conclusion Gap junctions were redistributed in the penumbra after reperfusion subsequent to cerebral ischemia.     

带状疱疹并发脑干炎1例报告

<正>1 病历摘要 患者,男,19岁,病案号78061。因左耳外耳道簇集水疱伴疼痛6d,加重2d入院。缘于入院前6d无明显诱因开始出现左耳外耳道内簇集淡红色丘疹,很快变水泡,伴疼痛,于当地医院以“中耳炎”给予治疗（具体用药不详）,入院前2d疼痛加重,放散至左侧头部、颈部、耳后,井出现眩晕。病程中无发热、呕吐、腹泻及抽搐,无肢体活动不灵。入院查体:左耳郭肿胀,左耳外耳道见簇集水泡,大部分已破溃,可见少许渗出、血痂,左鼓膜充血。神经系统检查:神志清楚,语言流利,左侧额纹变线,左睑裂增大,左眼睑闭合不全,Bell征阳性,可见水平眼震,口角     

抑制缝隙连接胞间通讯对大鼠实验性局灶性脑梗死的保护作用

目的 探讨抑制缝隙连接胞间通讯对大鼠局灶性脑梗死的保护作用及可能机制.方法 Wistar大鼠随机分为4组,干预组术前腹腔注射缝隙连接特异性阻断剂辛醇,对照组及假手术组给予等量生理盐水,溶剂对照组给予等量溶剂.改良线栓法建立大脑中动脉闭塞/再灌注模型.采用TTC染色比较脑梗死体积变化、光镜观察结合图像分析软件半定量分析病理变化、免疫组化法考察各组缺血区Caspase-3的变化.结果在缺血6h/再灌注6h条件下,干预组脑梗死体积百分比与手术对照组比较明显减小(P<0.05).镜下可见干预组半暗带病理改变较轻,相对面积比显著减少.免疫组化结果显示干预组Caapage-3染色阳性神经元数显著少于对照组.结论采用辛醇抑制缝隙连接胞间通讯能够减小大鼠局灶性脑梗死体积,减轻半暗带病理变化,缩小半暗带体积并降低该区域Caspase-3的表达.其脑保护作用可能与抑制半暗带的细胞凋亡有关.     

缝隙连接胞间通讯对大鼠局灶性脑梗死体积的影响

目的探讨缝隙连接胞间通讯变化对大鼠局灶性脑梗死体积的影响。方法Wistar大鼠随机分为4组,干预组术前腹腔注射缝隙连接特异性阻滞剂辛醇,对照组及假手术组给予等量生理盐水,溶剂对照组给予等量溶剂。线栓法建立大脑中动脉闭塞／再灌注模型。采用Longa5分制评分法评价动物神经功能缺损程度、TTC染色考察脑梗死体积变化并在光镜下观察其病理变化。结果在缺血24h和缺血6h／再灌注6h条件下,辛醇干预组脑梗死体积百分比与手术对照组比较明显减小(P<0．05)。镜下可见辛醇组缺血中心区及半影区面积均明显缩小,半影区病理改变较轻,相对面积比显著减少。两组动物神经功能缺损程度虽有差异,但不具有统计学意义(P>0．05)。结论星形胶质细胞的缝隙连接在缺血性卒中半影区的病变进展中扮演重要角色。抑制缝隙连接胞间通讯对半影区神经元起到了保护作用,减小了梗死体积。探索下调缝隙连接胞间通讯功能的方法可能成为治疗脑梗死的新思路。