Cdh1小干扰RNA载体的构建及鉴定

目的:构建Cdh1小干扰RNA载体,并将其转染至Hela细胞进行鉴定.方法:根据pENTRTM/H1/TO中间载体要求,设计Cdh1小干扰RNA载体的干扰序列及无干扰作用的对照序列,合成相应的DNA单链,退火后连接到pENTRTM/H1/TO线性载体,形成完整载体,进行测序鉴定.分别将测序鉴定成功的Cdh1小干扰RNA载体及对照载体采用脂质体法转染Hela细胞,转染后48 h提取细胞总RNA及细胞总蛋白,采用实时定量PCR和Western Blot检测Cdh1的表达.结果:经测序鉴定成功构建Cdh1小干扰RNA载体和对照载体,分别命名为pENTR/shCdh1和pENTR/shcontrol.与未转染及转染pENTR/shcontrol的Hela细胞相比,转染pENTR/shCdh1的Hela细胞Cdh1表达降低(P《0.05).结论:成功构建Cdh1小干扰RNA载体,并能下调Hela细胞Cdh1的表达.     

经PAxpress导管盲探气管插管用于模拟颈项强直病人的可行性

PAxpress导管是一种新型的气道装置,可在保持头颈部不动的情况下不需任何辅助装置盲置进行通气,也可用来引导气管插管。本研究拟通过比较经PAxpress导管盲     

成人肌间沟臂丛神经阻滞运动反应终点的研究

目的研究胸大肌、三角肌运动反应作为外周神经刺激器(PNS)定位下成人经肌间沟臂丛神经阻滞终点的可行性。方法择期成人上肢手术240例,PNS定位下行经肌间沟臂丛神经阻滞,随机均分为四组:胸大肌运动反应终点组(A组)、三角肌运动反应终点组(B组)、肱二头肌运动反应终点组(C组)和胸大肌、三角肌或肱二头肌运动反应终点组(D组)。比较组间刺激域电流、获得终点时间、运动阻滞起效时间、各神经分支感觉阻滞起效时间、运动阻滞效果、各神经分支感觉阻滞效果及神经阻滞综合效果。结果D组获得终点时间短于A、B、C组(P<0.05),组间刺激域电流、运动阻滞起效时间、各神经分支感觉阻滞起效时间、运动阻滞效果、各神经分支感觉阻滞效果及神经阻滞综合效果差异无统计学意义。神经阻滞综合优良率90.8%。结论胸大肌、三角肌运动反应终点可作为PNS定位下成人经肌间沟臂丛神经阻滞穿刺针正确定位的满意、安全标志。     

羟乙基淀粉溶液对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的影响

目的：研究6％羟乙基淀粉溶液对大鼠全脑缺血-再灌注损伤的影响。方法：84只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(S组，n=20)、缺血-再灌注组(Ⅰ组，n=32)和6％羟乙基淀粉溶液组(H组，n=32)，其中Ⅰ组和H组又各分为再灌注1，3，6，12h亚组。采用原位杂交组织化学技术检测脑血管内皮细胞ICAM-1mRNA的表达。结果：Ⅰ组和H组再灌注1，3，6，12h组ICAM-1mRNA的表达均较S组对应时间点组高(P＜0．01)，H组再灌注各个时间点组ICAM-1mRNA的表达均较I组对应时间点组低(P＜0．05)。结论：在不改变血细胞比容的条件下，再灌注早期应用6％羟乙基淀粉溶液治疗可降低脑血管内皮细胞表面ICAM-1mRNA表达，减轻脑缺血-再灌注损伤。     

阿片类药物在慢性非癌性疼痛中的规范化应用

慢性非癌性疼痛不仅发病率高,发病机制复杂,其治疗目标也存在差异。因此,临床上需要规范慢性非癌性疼痛的管理模式。而在众多治疗方法中,药物治疗是主要手段之一,其中阿片类药物被广泛应用,其临床指南是规范临床实践的有效途径。本文综述了近年来西方国家的慢性非癌性疼痛管理指南中阿片类药物的应用规范,旨在整合已有的研究和临床数据,以便提高患者的结局,并为中国临床医师提供指南推荐的管理策略。     

全凭吸入麻醉中机械通气法预充七氟烷的临床应用

目的 比较两种不同预充方法在全凭吸入麻醉中七氟烷达到设定浓度的应用价值.方法 将50例行腹腔镜下疝囊高位结扎手术的患儿按随机数字表法分为两组：机械通气法预充七氟烷组（观察组）和常规充气法预充七氟烷组（对照组）,每组25例.两组均行全凭吸入麻醉.观察两组开挥发罐起至达到8％七氟烷预充浓度时间、睫毛反射消失时间、静脉开放时间、喉罩置入时间,并观察不良反应.结果 所有患儿均成功置入喉罩,诱导期间未见肢体躁动、呛咳、呼吸暂停及喉痉挛等不良反应.与对照组相比,观察组开挥发罐起至达到8％七氟烷预充浓度时间较短[（47.1±6.2）s比（65.3±5.9）s],差异有统计学意义（P＜0.05）;而且与对照组比较,观察组睫毛反射消失时间、静脉开放时间及喉罩置入时间均短[（67.3± 4.1）s比（95.4±5.7）s、（82.2±3.9）s比（120.3±5.9）s、（88.7±4.0）s比（130.5±5.8）s],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 在全凭吸入麻醉中,采用机械通气法预充七氟烷更经济迅速环保.     

谷氨酸转运体和吗啡耐受及依赖

吗啡通过μ阿片受体产生镇痛作用，可用于急慢性疼痛治疗，但吗啡耐受及依赖使其应用受到限制。吗啡耐受及依赖的机制非常复杂，关联到许多调控因素，其中谷氨酸能神经递质系统发挥了重要作用。大量的实验证明吗啡耐受及依赖后谷氨酸失衡。利用微透析技术，研究者发现清醒的吗啡依赖大鼠细胞外谷氨酸与对照组相比无明显差异，但利用纳洛酮等药物催促戒断症状后，蓝斑、导水管周围灰质等的胞外谷氨酸浓度显著增加。与此相似，吗啡耐受后，细胞外谷氨酸水平较对照组无明显改变，但给予单次吗啡刺激后，胞外谷氨酸的水平也明显升高。     

增强型绿色荧光蛋白基因在永生化大鼠神经前体细胞株的表达

目的:研究重组腺相关病毒载体介导的增强型绿色荧光蛋白基因在永生化大鼠神经前体细胞的转染效率及其表达情况. 方法:携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组腺相关病毒转染永生化大鼠神经前体细胞,持续观察转基因神经前体细胞绿色荧光蛋白的表达情况,并计算转染效率. 应用巢蛋白抗体和抗猿肾病毒40大T抗原抗体进行细胞鉴定,50 mL/L胎牛血清诱导细胞分化后,应用神经元和星形胶质细胞特异性标志物抗体检测其分化能力. 结果:荧光显微镜观察显示转染后24 h神经前体细胞即有绿色荧光蛋白表达,转染后72 h,大部分细胞表达绿色荧光蛋白,转染效率可达90%. 经传代培养8 wk后,表达绿色荧光蛋白的阳性细胞仍可高达70%～75%. 免疫细胞化学结果显示转绿色荧光蛋白神经前体细胞巢蛋白和抗猿肾病毒40大T抗原抗体染色均为阳性,50 mL/L胎牛血清可诱导其分化为神经元和星形胶质细胞. 结论:携带增强型绿色荧光蛋白基因的重组腺相关病毒可高效转染永生化大鼠神经前体细胞,并可在细胞中长期稳定地表达,绿色荧光蛋白作为良好的示踪剂可应用于神经前体细胞的体内移植.     

布托啡诺联合芬太尼应用于开胸手术后患者自控静脉镇痛

目的 通过观察布托啡诺联合芬太尼用于开胸手术后患者自控静脉镇痛的效果,探讨两种药物复合应用的安全性. 方法 90例ASA分级Ⅰ～Ⅱ级的择期开胸手术患者,随机分为三组,每组各30例,即B组(0.15 mg/ml布托啡诺)、F组(20 μg/ml芬太尼)和BF组(0.1 mg/ml布托啡诺+10μg/ml芬太尼).在手术缝合皮肤前接镇痛泵,记录手术后1、4、8、12、24和48 h患者镇痛评分、镇静评分、Bp、HR、R、SpO2、按压次数、镇痛药物消耗量、不良反应的发生情况、患者对镇痛的总体满意度等.结果 B组患者在术后1、4、8和12 h的镇痛评分均明显高于其他两组,差异有统计学意义(P＜0.05),而F组与BF组镇痛评分在各个时间点比较差异均无统计学意义(P＞0.05).与F组比较,B组和BF组1、4、8和12 h镇静评分较高,但无过度镇静的发生.从患者对镇痛的总体满意度调查看,B组满意度最低,BF组最高,F组略低于BF组.F组患者发生皮肤瘙痒(16.7%)、恶心呕吐(23.3%)的比例较高,B组的镇痛效果较差,但B组及BF组均无皮肤瘙痒的发生.结论 布托啡诺联合芬太尼应用于开胸术后患者白控静脉镇痛安全有效,不良反应少,布托啡诺适度的镇静作用成为患者满意度高的主要因素.