补肾活血方对卵巢早衰模型大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控相关因子的影响

  目的：探讨补肾活血方对卵巢早衰大鼠性激素水平及颗粒细胞凋亡调控因子B淋巴细胞瘤/白血病-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达的影响  方法：将SD大鼠随机分为6组,包括空白组、模型组、生理盐水对照组(简称对照组)及补肾活血方中药低、中、高剂量组。除空白组外,其余各组均用雷公藤多苷(终浓度50 μg/g)连续灌胃14天建立卵巢早衰大鼠模型。其后各组给予相应干预。观察大鼠动情周期改变及大鼠卵巢组织形态学变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测大鼠血清雌二醇(E₂)、卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)水平;采用免疫组化方法检测颗粒细胞凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3 的表达  结果：①与空白组比较,模型组大鼠血清FSH水平明显升高(P<0.05),LH水平有一定程度升高,且E₂水平有所降低,但LH及E₂的改变差异不显著(P>0.05);中药各剂量组大鼠FSH水平较模型组显著降低(P<0.01);LH水平除中药高剂量组外,低、中剂量组明显低于模型组(P<0.01);补肾活血方组大鼠E₂水平与模型组比较,除中剂量组外均有明显升高(P<0.01)。②免疫组化染色结果显示,模型组大鼠颗粒细胞Bax、Caspase-3蛋白表达较空白组明显上升(P<0.01),Bcl-2 蛋白有所下降,但下降幅度不明显(P>0.05);中药各剂量组大鼠卵巢颗粒细胞Bax及caspase-3的表达均显著下降(P<0.01),而Bcl-2 蛋白表达仅略有增强(P>0.05)  结论：雷公藤多苷可诱发大鼠卵巢颗粒细胞凋亡致卵巢早衰;补肾活血方能降低Bax 及Caspase-3蛋白的表达,减轻颗粒细胞的凋亡,从而对雷公藤多苷所致卵巢早衰起到治疗作用。     

CTA显示胃周动脉及其变异在胃癌术前评价中的应用价值

目的探讨CT血管造影(CT angiography,CTA)显示胃周动脉及其变异在胃癌术前评估中的应用价值。资料与方法对连续67例经胃镜活检证实或高度怀疑胃癌的患者,采用多层螺旋CT在患者服用产气粉和水(500～1000 ml)充分扩张胃后经静脉用压力注射器以3～4 ml/s的流率团注碘对比剂100 ml(碘必乐或碘普罗胺370),采用Bolus-Tracking追踪触发技术行三期增强扫描。在CT工作站采用容积再现(VR)和最大密度投影(MIP)重组CTA以显示胃周血管影像,重点分析变异动脉对手术方案的抉择与实施的影响,并与手术发现比较。结果 67例胃左动脉(LGA)均被显示,胃右动脉(RGA)的显示率为52.24%(35/67)。CTA显示12例胃周动脉变异。其中61例实施手术治疗,CTA获得的血管解剖信息与手术所见取得较好的一致性。结论 CTA能显示胃周主要动脉及其解剖变异,特别是与胃癌原发灶解剖密切相关并对手术实施有影响的血管,附加的CTA可以提高胃癌CT检查的成本效益比。     

急性胰腺炎24例诊治分析

所谓重症急性胰腺炎就是指伴有脏器功能不全的胰腺炎，其死亡原因主要是多器官功能障碍。要降低病死率，必须早期诊断，予以适当处理。     

关于加强对教学基地兼职教师道德修养的探讨

我院是一所二级甲等综合性医院，编制病床800张，工作人员1024人，年住院病人3．5万人次，其中手术0．84万人次。院拥有16排螺旋CT、MRI、D．S．A造影机等先进仪器设备300多台套。从50年代至今，每年都接收了大中专院校的实习生。2006年获广东省高等医学院校教学医院的资格。当前，随着社会的进步，及医学生的增多，如何加强对教学基地兼职教师的道德修养，提出了新的课题。     

人精子DNA从头甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的mRNA表达分析

目的 通过体外分离成熟的精子,利用实时荧光定量PCR(qRealTime-PCR)检测其是否表达DNA从头甲基化转移酶(DNMT1/3a/3b)及甲基CpG结合蛋白(MeCP2),为精子中甲基化表观修饰研究提供依据.方法 体外采集健康男性志愿者的精液标本,利用精子上游收集法获得具有活性的成熟精子.通过SYBR Green/PI双染色法,利用流式细胞术(FCM)检测精子样本的质膜完好性及其活性.抽提精子的总RNA,逆转录PCR获得cDNA,利用qRealTime-PCR鉴定精子甲基化转移酶及甲基CpG结合蛋白的mRNA表达情况.结果 SYBR Green/PI双染色和流式细胞仪检测发现,利用上游收集法可以收集SYBR Green /PI-的精子占总精子数的(94.513±1.120)%,表明该方法可以收集到质膜完好且活性强的精子.qRealTime-PCR结果显示,此样本精子中DNA从头甲基化转移酶的表达比较明显,而甲基CpG结合蛋白的表达量相当低.其中DNMT1的mRNA表达量较高(0.272±0.045,P＜0.05),DNMT3a和DNMT3b的表达水平比较弱[(4.930±0.01)E-006,(6.500±1.7)E-005,P＜0.05],而MeCP2几乎不表达[(2.12±0.91)E-006,p＜0.05].结论 利用qRealTime-PCR可以比较快速方便的检测出此次精子样本中DNA从头甲基化转移酶和甲基CpG结合蛋白的mRNA表达水平.     

醒脑静，更昔洛韦和大剂量静注人免疫球蛋白联合治疗病毒性脑炎的临床研究

目的探讨醒脑静、更昔洛韦和大剂量静注入免疫球蛋白联合治疗病毒性脑炎的临床效果。方法将广东省普宁市人民医院68例病毒性脑炎患者随机均分为观察组和对照组（n=54）,2组均合理的进行降温,抗癫痫,镇静和脱水降颅压等治疗,对照组采用更昔洛韦治疗,观察组采用醒脑静、更昔洛韦和大剂量静注入免疫球蛋白联合治疗,比较2组的疗效及相关症状恢复时间。结果观察组与对照组治疗有效率（94.1％VS 73.5％）、头痛呕吐停止时间（2.4±1．4）VS（3．5±12）d、体温恢复时间（3．4±1．2）VS（4．1±1．1）d、意识恢复时间（4．2±1．5）VS（53±1．1）d及抽搐停止时间（2.3±10）vs（5．2±1．2）d,两两比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论醒脑静、更昔洛韦和大剂量静注人免疫球蛋白联合治疗病毒性脑炎疗效可靠,有效率高,值得推广应用。     

叶酸对卵巢癌细胞的增殖抑制作用

目的 探讨叶酸对卵巢癌细胞增殖的影响及作用机制.方法 体外培养人卵巢癌细胞株HO-8910,采用MTT法检测不同叶酸浓度(O～160 nmol/L)作用48 h后的细胞抑制率.叶酸组采用120 nmol/L(细胞抑制达50%的浓度,即IC_(50))叶酸处理细胞48 h;常规培养的细胞作为对照组;加人二甲基亚砜(DMSO)溶剂培养的细胞作为DMSO组.分别采用Real-time PCR和Western blotting检测叶酸受体(FR-a)、二氢叶酸还原酶(DHFR)和5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)mRNA和蛋白的表达;流式细胞术检测细胞周期的变化;MTT法检测叶酸与顺铂、紫杉醇或表阿霉素联合作用时,对卵巢癌细胞增殖的影响.结果 随着叶酸浓度升高,卵巢癌细胞抑制率逐渐升高;IC_(50)为120 nmol/L.叶酸组卵巢癌细胞(120 nmol/L叶酸处理)的FR-a、DHFR 和MTHFR的mRNA和蛋白表达均低于对照组和DMSO组(P<0.05或P<0.01).与对照组比较,叶酸组卵巢癌细胞G_2/M期细胞百分数降低(P<0.05),S期细胞百分数升高(P<0.05),G_0/G_1期无明显变化(P>0.05).120 nmol/L叶酸分别联合40 μmol/L顺铂、10 μmol/L紫杉醇或15 μmol/L表阿霉素作用48 h后,其细胞抑制率显著高于单纯化疗药物作用下的细胞抑制率(P<0.05).结论 一定浓度的叶酸可能通过影响叶酸代谢而抑制卵巢癌细胞的生长;叶酸可能增强化疗药物对卵巢癌的细胞毒性作用,从而增强卵巢癌化疗敏感性.     

醒脑静联合大剂量丙种球蛋白治疗病毒性脑炎30例疗效观察

目的探讨醒脑静联合大剂量丙种球蛋白治疗病毒性脑炎的临床疗效。方法我院2010年1月至2011年1月收治病毒性脑炎患者60例,随机分为对照组与观察组,每组30例,对照组患者给予大剂量丙种球蛋白;观察组患者在对照组基础上静脉滴注醒脑静注射液,观察临床疗效及不良反应发生情况,评价两组患者止吐时间、意识好转时间、退热时间。结果治疗后,观察组的总有效率为90.0%明显高于对照组的80.0%,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05);两组止吐时间、意识好转时间、退热时间均明显短于对照组(P<0.05);治疗过程中两组患者均未出现不良反应。结论醒脑静联合大剂量丙种球蛋白治疗病毒性脑炎的临床疗效确切,止吐时间、意识好转时间、退热时间明显缩短,并未增加不良反应发生率,值得推广应用。     

小干扰RNA抑制成纤维细胞激活蛋白3的表达对肺癌干细胞增殖和侵袭的影响

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)抑制成纤维细胞激活蛋白3(fibroblast activation protein 3,FAP3)基因表达对肺癌干细胞增殖和侵袭的影响。方法:采用流式细胞术从肺癌细胞株A549中分选出CD44+/CD133+的肺癌的肿瘤干细胞(cancerstem cells,CSCs)。将肺癌CSCs分为3组:空白对照组(不转染任何质粒)、siRNA-FAP组(转染靶向沉默FAP3表达的siRNA质粒)、阴性对照组(转染包含随机序列的siRNA质粒)。采用MTT比色法检测靶向FAP3表达的siRNA(siRNA-FAP3)转染12、24、48和72h后对细胞增殖的影响;采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测转染72h后细胞株中FAP3、Ki67的mRNA和蛋白质的表达情况;采用软琼脂克隆集落形成实验检测siRNA-FAP3对肺癌CSCs侵袭能力的影响。结果:转染48h和72h后,siRNA-FAP3组的细胞增殖抑制率[(24.67±1.08)%,(53.98±3.75)%]大于阴性对照组[(3.76±0.88)%,(4.53±1.01)%]及空白对照组[(2.34±0.41)%,(3.28±0.65)%],差异均有统计学意义(P分别<0.05和0.01)。转染72h后,siRNA-FAP组细胞中FAP3和Ki67基因的mRNA表达水平(0.32±0.06,0.18±0.02)显著低于阴性对照组(1.03±0.12,0.99±0.17)和空白对照组(1.02±0.09,0.97±0.11),差异有统计学意义(P<0.01)。转染72h后,siRNA-FAP组细胞中FAP3和Ki67蛋白表达水平(0.16±0.05,0.25±0.09)显著低于阴性对照组(0.49±0.26,0.47±0.13)和空白对照组(0.59±0.27,0.63±0.22),差异有统计学意义(P<0.05)。siRNA-FAP组细胞克隆形成率[(13.09±5.21)%]显著低于阴性对照组[(77.59±8.29)%]和空白对照组[(83.86±10.11)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论:转染siRNA可有效抑制肺癌CSCs中FAP3蛋白的表达,并且还可抑制CSCs的体外增殖和侵袭能力。     

2002～2011年揭阳地区结直肠癌流行病学研究

目的收集主要医院收治的结直肠癌病例,分析了解近10年(2002～2011年)揭阳地区结直肠癌流行病学特征的变化规律和趋势。方法总结分析揭阳地区主要医院即业务量最大的三家医院普宁市人民医院、普宁市华侨医院、揭阳市人民医院2002～2011年经病理确诊的结直肠癌3,015例,通过收集病历资料,计算每年发病率及不同年龄组别和不同肿瘤部位发病例数及所占比例。结果男、女性结肠癌标化发病率从2002年的3.58/10万及3.31/10万上升到2011年的9.55/10万和9.03/10万,10年平均上升11.52%和11.79%;总标化发病率10年平均上升11.63%。男、女性直肠癌标化发病率从2002年的2.46/10万及3.70/10万上升到2011年的16.73/10万及10.15/0万,10年平均上升23.75%及11.86%;直肠癌总标化发病10年平均上升17.93%。男、女性结直肠癌发病率呈随年龄增加而上升的趋势,高发年龄在50岁以上年龄组。在发病部位方面,直肠癌的比例从2002年的46.79%上升至2011年的59.03%,右半结肠癌的比例也从18.3%上升至23.35%。结论进10年来,揭阳地区结直肠癌的发病率不断上升;结肠癌男女性别比呈下降趋势,而直肠癌则呈上升趋势;直肠癌和升结肠癌比例不断上升。