反流性哮喘综合征发病机制

胃食管反流病(GERD)是消化内科常见疾病之一.2006年蒙特利尔定义将反流性哮喘综合征归为GERD的食管外表现之一.GERD加重哮喘的机制可能与反流物的直接吸入或间接作用、迷走神经反射及气道高反应性有关,有学者认为气道炎症、内脏高敏感、食管细菌定植学说等在GERD加重哮喘机制中也起着重要作用.此文就反流性哮喘综合征的...     

人肺癌H1299肿瘤干细胞样细胞的分离培养及鉴定

目的 从人肺癌H1299细胞系中分离培养肺癌干细胞样细胞,并进一步鉴定其干细胞特性.方法 在低黏附条件下无血清诱导培养H1299细胞,富集H1299肿瘤细胞球,利用免疫荧光、流式细胞仪、PCR及Western blot检测干性标志物CD133和ABCG2的表达,并观察克隆形成和体内致瘤能力的改变.结果 肺癌H1299细胞经无血清诱导培养可形成悬浮的细胞球.与普通贴壁H1299细胞相比,细胞球具有更强的增殖能力和致瘤性,且高表达干性基因CD133和ABCG2,差异有统计学意义(P＜0.0S).结论 运用无血清悬浮细胞球培养方法富集的肺癌H1299细胞系肿瘤球高表达CD133和ABCG2,具有干细胞特性.     

下调miR-210增加放射抗拒鼻咽癌细胞系CNE-2R的放射敏感性

目的研究下调miR-210对鼻咽癌放射抗拒细胞的放射敏感性的影响。方法用剂量梯度法建立鼻咽癌放射抗拒细胞CNE-2R。用microRNA基因芯片检测CNE-2和CNE-2R细胞的miRNAs,用q PCR验证miR-210的相对表达量。用LV-hsa-miR-210-inhibition慢病毒感染CNE-2R细胞,q PCR检测鼻咽癌细胞系210-inhibition中miR-210的相对表达量,用FCM测CNE-2R和210-inhibition细胞的凋亡和周期,用克隆形成实验测CNE-2R和210-inhibition的存活分数。结果诱导成功的CNE-2R与CNE-2细胞比较,有93个表达差异2倍的miRNAs。下调CNE-2R中的miR-210后,与CNE-2R比较,210-inhibition凋亡比例明显增加(P0.05),处于G2/M期的比例明显增加(P0.05),S期的比例明显减少(P0.05),210-inhibition细胞较CNE-2R细胞的存活分数降低。结论下调miR-210可增加鼻咽癌放射抗拒细胞的放射敏感性,其可能作为治疗放射抗拒的新靶点。     

ILC2通过激活STAT6和分泌IL-13调节慢性肾功能衰竭患者的免疫功能

目的:探讨Ⅱ型固有淋巴细胞(ILC2)在慢性肾衰发生发展中的作用及其可能机制。方法:选择中山大学附属第一医院2016年3月~2016年12月入院的慢性肾功能衰竭患者36例,选取同期健康体检者32例为对照。流式细胞术(FCM)检测外周血单个核细胞(PBMC)中ILC2的比例;ELISA技术检测血浆中白细胞介素(IL)-13的浓度;提取慢性肾衰患者及健康对照者PBMC后分别分为3组(对照组、细胞因子刺激组、干预组)进行体外培养3 d后,ELISA法测定上清液中IL-13浓度;Western blot法对健康对照者PBMC在刺激前及刺激后15 min、30 min、1 h、2 h的转录活化因子6(STAT6)的磷酸化水平进行检测。结果:慢性肾功能衰竭患者PBMC中ILC2比例及血浆IL-13浓度均较健康人高(P0.05);体外培养上清液中,慢性肾功能衰竭患者的3个亚组中IL-13浓度均较健康人高(P0.05),且2类人群中均呈现出细胞因子刺激组较对照组升高,干预组较细胞因子刺激组降低的现象;Western blot结果显示p-STAT6的蛋白水平随时间的延长逐渐增高。结论:慢性肾衰患者外周血中ILC2的比例升高,同时ILC2内STAT6活化并分泌大量IL-13,介导Th2细胞的极化而调节免疫。     

大剂量丹参多酚治疗85岁以上高龄老年急性深静脉血栓形成的疗效及安全性分析

目的 应用大剂量丹参多酚治疗85岁以上急性深静脉血栓形成患者,评价其疗效及安全性.方法 45例经超声证实为急性深静脉血栓形成的高龄老年患者,男性38例,女性7例,年龄86 ～ 97岁,平均年龄(90.3±2.7)岁.根据治疗方案分为丹参多酚组30例,连续14d给予400 mg丹参多酚静脉滴注;低分子肝素组15例,连续14d给予依诺肝素0.4 mL皮下注射.结合临床表现和超声结果评价疗效及不良反应;同时记录治疗前后血常规、肝肾功能、凝血功能变化.结果 丹参多酚组治疗后起效时间2～5d,平均3.07 d;患肢治愈23例(76.7％),显效5例(16.7％),有效1例(3.3％),总有效率96.7％.低分子肝素组治疗后起效时间2～6d,平均4.00 d;患肢治愈8例(53.3％),显效3例(20％),有效1例(6.7％),总有效率80％.丹参多酚组所有病例治疗期间均未出现不良反应,低分子肝素组有1例患者出现肝素注射处皮下出血,1例患者出现牙龈出血.大剂量丹参多酚治疗降低患者纤维蛋白原(fibrinogen,Fg)水平[(4.18+0.54) g/L vs (3.45+0.15) g/L,P＜0.05]和D-二聚体水平[(6.42±2.61) vs (2.37±0.59),P＜0.01],对凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间及肝肾功能、白细胞和血小板没有影响(P＞0.05).结论 应用大剂量丹参多酚治疗85岁以上高龄老年深静脉血栓形成患者具有较好的疗效和安全性,可以降低患者Fg和D-二聚体水平,但不增加出血风险和肝肾功能损害.     

神经干细胞外泌体对低氧所致神经元凋亡的抑制作用

目的:初步探讨神经干细胞分泌的外泌体是否能抑制氯化钴(cobalt chloride,CoCl_2)诱导的缺氧模型中神经元的凋亡,并促进神经元的存活。方法:超速离心法分离大鼠神经干细胞分泌的外泌体;Western blot检测外泌体表面标志物ALG-2相互作用蛋白X(ALG-2-interacting protein X,Alix)和肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101,TSG101)的表达水平;用透射电子显微镜观察外泌体的形态;q Nano纳米生物颗粒分析仪检测外泌体的粒径分布。采用不同剂量的Co Cl_2处理神经元,建立CoCl_2诱导神经元凋亡的模型;将神经干细胞分泌的外泌体加入凋亡组神经元,CCK-8法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:神经干细胞分泌的外泌体可表达Alix和TSG101;外泌体在透射电镜下的形态呈"杯口"状,大小约为100 nm;q Nano纳米生物颗粒分析仪检测外泌体的粒径为(95.0±23.5)nm(n=370);CCK-8实验结果显示不同浓度(200、400和600μmol/L)CoCl_2作用24 h,神经元活力呈剂量依赖性下降(P0.05);将神经干细胞分泌的外泌体加入凋亡组(CoCl_2浓度为400μmol/L)神经元后,神经元活力升高(P0.05),凋亡率下降(P0.05)。结论:神经干细胞分泌的外泌体能抑制低氧状态下神经元的凋亡并促进存活。     

自噬相关基因ULK1在外阴鳞癌中的表达及临床意义

目的 研究白噬相关基因ULK1在外阴鳞癌中的表达及其与外阴鳞癌临床病理特征和预后的关系.方法 收集48例外阴鳞癌组织和20例正常外阴组织,采用免疫组织化学法检测标本中ULK1的表达,分析其表达与外阴鳞癌患者临床病理特征之间的关系,并对外阴鳞癌患者进行随访以探讨ULK1表达与患者预后的相关性.结果 ULK1在正常外阴组织中表达率为80.0％,明显高于外阴鳞癌组织中的表达率(54.2％),差异有统计学意义(P=0.046).ULK1表达情况与外阴鳞癌患者FIGO分期(P=0.017)、肿瘤浸润深度(P=0.028)及淋巴结转移状况(P=0.017)显著相关.ULK1表达阳性患者的生存率明显优于表达阴性的患者(P=0.010).Cox回归模型多因素分析结果显示,ULK1表达是与患者生存时间相关的独立预后因素(P=0.041).结论 ULK1在外阴鳞癌中表达下降,且与患者FIGO分期、肿瘤浸润深度及淋巴结转移状况相关,可作为判断外阴鳞癌预后新的生物学标志物.