阿德福韦耐药乙型肝炎病毒株的快速检测和动态观察

目的设计PCR联合限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）快速检测HBV阿德福韦耐药变异（rtN236T）的方法以及观察阿德福韦耐药毒株的动态变化情况。方法7例乙型肝炎患者在阿德福韦单药治疗过程中出现病毒突破或应答不完全。对其系列血清标本的HBVDNA逆转录酶部分区域进行直接或克隆后测序，设计和应用PCR—RFLP方法对rt236位点的变异情况进行检测。采用Hamming距离法计算HBV部分逆转录酶区域的基因多样性。结果l例患者出现rtA18IV变异，3例为rtN236T变异。建立了基于限制性内切酶DraI或HpaI的PCR—RFLP方法检测rtN236T变异：可以检测至少10％的弱势毒株，特异性为100％。在病毒突破前8个月可以检测到耐药毒株；该耐药毒株后来成为优势毒株。1例患者停用阿德福韦3个月后野生毒株取代耐药毒株重新成为优势株。1例患者在病毒突破后继续服用阿德福韦，rtN236T突变被一个新的突变株（rtN236V）替代。拉米夫定耐药患者的HBV逆转录酶有更明显的基因多样性。结论建立了PCR—RFLP快速检测rtN236T变异的方法；阿德福韦耐药毒株可以表现为不同的转化过程。     

自然杀伤细胞在肝脏疾病中的作用

自然杀伤（NK ）细胞是1975年发现的一类胞内含有大颗粒的淋巴细胞,广泛分布于机体的淋巴样和非淋巴样的组织内,具有免疫防御与免疫监视的功能。NK细胞具有独特的表型,在各种器官中的频数从高到低依次为肺、肝、外周血、脾、骨髓、淋巴结、胸腺,功能受组织微环境影响明显,主要通过肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）介导的细胞毒性作用和分泌细胞因子清除病原体和抑制肿瘤发生。当前,NK细胞在肝脏疾病中的作用研究获得了较大的进展。如肝脏 NK 细胞与外周NK细胞相比,可分泌更多的细胞杀伤因子,发挥更强的抗肿瘤作用［1］;慢性 HCV 感染及利用 IFN-α治疗时,肝脏NK细胞可被活化,从而控制肝炎和肝纤维化;同时,慢性HCV感染或长期酒精摄入也可削弱肝脏NK细胞的杀伤作用而致病。本文总结了NK细胞作为潜在的肝脏疾病治疗靶标,在肝内抗病毒、抗纤维化、抗肿瘤作用研究中的最新进展。     

可溶性CD163对慢加急性肝功能衰竭短期预后的预测价值

目的探索可溶性CD163（sCD163）在不同肝脏疾病谱中的水平,以及对慢加急性肝功能衰竭短期预后的预测价值。方法前瞻性纳入慢性乙型肝炎、肝硬化及慢加急性肝功能衰竭患者作为学习队列,检测血清CD163水平;回顾性纳入连续的慢加急性肝功能衰竭患者验证sCD163水平对慢加急性肝功能衰竭的28 d生存期的预测。结果纳入171例患者进入学习队列。慢加急性肝功能衰竭患者sCD163高于慢性乙型肝炎或者肝硬化患者。sCD163水平与血清总胆红素（Rs=0.6199,P〈0.01）、凝血酶原时间国际标准化率（Rs=0.5751,P〈0.01）正相关,与外周血红细胞计数（Rs=-0.2194,P=0.0232）、纤维蛋白原水平（Rs=-0.3898,P〈0.01）负相关。sCD163水平（HR=2.601,P=0.01）与肝性脑病（HR=5.003,P〈0.01）是28 d生存率的独立预测因素,模型具有较好的预测能力（曲线下面积=0.83,P〈0.01）,并在回顾性队列中得到验证。结论血清sCD163水平是预测慢加急性肝功能衰竭短期预后的优良候选指标。     

血浆置换治疗肝功能衰竭临床研究

目的 观察血浆置换治疗肝功能衰竭的疗效.方法 148例患者在内科综合治疗的基础上给予血浆置换治疗,观察临床疗效和并发症发生情况,监测治疗前后肝功能生化指标的变化情况.结果 148例患者经血浆置换治疗后临床症状有不同程度缓解,有效率为62.2%(92/148);临床症状无好转48例;死亡8例.治疗后TBil、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、PT均低于治疗前,白蛋白和PTA均高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01).早期患者临床好转率为85.7%均高于中期的59.5%和晚期的38.0%,差异有统计学意义(P<0.05).连续3次以上(包含3次)血浆置换的患者TBil下降幅度为65.93%高于连续3次以下的43.49%,差异有统计学意义(P<0.01).148例患者共进行血浆置换治疗436次,出现不良反应58次(13.30%).结论 血浆置换治疗肝功能衰竭疗效明显,连续多次治疗对降低TBil效果更好,治疗早、中期肝功能衰竭最为适宜.     

拉米夫定耐药患者临床指标变化特点

目的:观察拉米夫定治疗过程中发生耐药的慢性乙肝患者的临床特点.方法:分析在我科接受拉米夫定治疗的247例慢性乙肝患者的临床资料及治疗过程中肝功能及HBV DNA水平的变化,并对发生YMDD变异的患者临床特点进行总结.结果:247例患者中有42例发生YMDD变异,其中有28例患者出现肝炎突发,36例患者出现:HBV DNA反跳,但发生YMIDD变异后平均HBV DNA水平仍低于治疗前(P＜0.05),谷丙转氨酶(ALT)水平与治疗前相比无明显差异(P＞0.05).结论:拉米夫定长期治疗过程中慢性乙肝患者耐药性的产生及由此引发的部分患者肝功能和病毒水平的反跳应引起临床医生的密切关注.     

非肝硬化门静脉高压症1例报告

<正>1病例资料患者女性,36岁,因"脾大30余年,反复呕血、黑便30年,再发1月余"于2018年4月12入本院。患者30余年前自检发现脾大,未予处理。1988年因呕血至当地医院行脾脏切除术(具体报告不详),予药物、输血等对症治疗后好转。1988-2014年期间有反复呕血、黑便,约1～2次/年,外院胃镜提示食管静脉曲张,予药物、输血等对症治疗后好转。近1个月来反复出现黑便     

严重急性呼吸道综合征临床表现和诊断

严重急性呼吸道综合征(severe acute respiratory syn-drome,SARS)是一种新出现的急性传染病。目前仍在世界范围特定区域(主要是医疗单位)内流行,主要包括亚洲、欧洲和北美洲。目前已经证实,一种新的冠状病毒(coronavirus)是引起SARS的原因。国内外多家实验室已经证明,SARS相关的冠状病毒(也称SARS病毒)是一单股正链RNA病毒,全长约29 000个碱基,可能来源于动物,目前有关SARS病毒的进一步研究正在进行中。现已证实,SARS的主要传染源是急性期患者,经飞沫传播,也可经密切接触传播,尚可能存在其他的和环境有关的传播途径。目前知道,人群普遍易感,但发病人群以成人为主,可能和在公共场所活动有关。下面主要就SARS的临床表现和诊断进行综述,主要的     

SARS冠状病毒多聚酶基因临床检测方法的建立

目的 分析SARS冠状病毒广东株多聚酶基因片段的异质性。建立RT-PCR检测SARS冠状病毒的方法，为SARS的快速诊断提供依据。方法 合成针对SARS冠状病毒多聚酶基因区段的特异性引物，从广东省SARS病人及疑似病人标本中提取RNA，经反转录和巢氏PCR扩增出相应大小的DNA片段。对这些片段克隆后进行DNA序列分析，并将序列与SARS冠状病毒和其他已知冠状病毒进行同源性分析。结果 从多例SARS病人痰、咽拭子或血液标本中得到RT-PCR阳性片段，随机选取其中8例经克隆和DNA序列分析证实均为SARS冠状病毒序列(同源性100％)，而所有阴性参照标本RT-PCR均为阴性。克隆片段BNll09与已知冠状病毒在核苷酸和氨基酸水平进行分析显示，该片段与牛冠病毒(bovinecoronavirus，BCV)和鼠肝炎病毒(murine hepatitis virus，MHV)同源性最高，在氨基酸水平上同源性高达75％。结论 SARS冠状病毒多聚酶基因片段BNll09的保守性极强，适合建立RT-PCR法检测SARS冠状病毒。     

核苷类似物治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎完全应答患者的病毒学特点

目的探讨核苷类似物（NA）治疗达到完全应答（CR）的HBeAg阳性CHB患者与非活动性HBsAg携带者（IAgCs）之间HBV病毒学特点的异同。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）以及部分PCR产物直接测序法对175例慢性HBV感染者进行HBV基因分型以及PC/BCP基因区变异检测,包括经NA治疗1年以上、达到CR的117例CHB患者（治疗组）和58例未行抗病毒治疗的IAgCs（对照组）。结果治疗组中1例A型、44例B型、16例C型,对照组中33例B型、10例C型、2例D型、1例基因型不明,两组的基因型构成比无统计学差异（P〉0.05）;治疗组BCP区A1762T/G1764A检出率显著低于对照组（9.8%vs 41.4%,P〈0.01）,PC区G1896A检出率亦明显低于对照组（14.0%vs 72.4%,P〈0.01）。结论NA治疗达到CR的HBeAg阳性CHB患者PC/BCP变异检出率低于IAgCs。