小凹蛋白1在棕榈酸酯诱导肝细胞脂质沉积中的作用

目的探讨小凹蛋白1（CAV1）在棕榈酸酯（PA）诱导HepG2细胞脂质沉积中的作用及其机制。 方法通过慢病毒载体构建过表达CAV1的HepG2细胞株,以空载体病毒转染组作为阴性对照组,每组细胞分别加入10%脱脂BSA和0.3mMPA处理24 h后,用油红染色观察各组细胞内脂质沉积,GPO-PAP酶法检测甘油三酯(TG)含量,qPCR检测PGC1α,sirt3的mRNA表达水平。 结果PA处理可以显著增加HepG2细胞内脂质沉积（P<0.01）;与对照组相比,过表达CAV1可以显著减少细胞内脂质沉积（P<0.05）,显著上调PGC1α,sirt3的mRNA表达水平（P<0.05）。 结论CAV1可能通过上调PGC1α-sirt3通路抑制PA诱导的HepG2细胞脂质沉积。     

全程导师制在住院医师规范化培训中的应用现状分析

汇总中国知网全文数据库及万方数据库创库至2019年12月31日发表的关于全程导师制在住院医师规范化培训中实施情况的文献,总结该制度在住院医师规范化培训中的开展情况及效果评价。     

沉默小窝蛋白1对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响

目的探讨小窝蛋白1(Cav1)对棕榈酸作用下的胰岛β细胞存活的影响。方法通过慢病毒载体构建Cav1沉默的小鼠胰岛素瘤NIT-1细胞株和小鼠原代胰岛(Cav1-shRNA组),以空载体病毒组作为对照组(Ctrl-shRNA),并设空白对照组,各组均分别加入脱脂牛血清白蛋白和棕榈酸(0.5 mmol/L)处理24 h及48 h,通过四甲基偶氮唑蓝比色法及Hoechst33342/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞活性及细胞凋亡,实时荧光定量PCR、Western blot检测凋亡相关的mRNA及蛋白表达水平。结果采用t检验和单因素方差分析法进行统计学分析。结果与对照组比较,棕榈酸处理组的细胞存活率显著下降(0.89±0.10比0.24±0.04,t=13.49,P<0.01),P18、P19的mRNA和蛋白表达均上调(1.00±0.09比1.30±0.04、1.00±0.04比1.37±0.13,t=5.28、4.71,均P<0.05;0.87±0.04比1.48±0.05、1.02±0.06比1.41±0.07,t=16.50、7.33,均P<0.01);含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-6、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平明显上调(1.00±0.04比1.57±0.08、1.01±0.15比1.57±0.20、1.02±0.19比1.57±0.09,t=11.04、3.88、4.53,均P<0.05),蛋白表达也明显上调(0.86±0.10比1.28±0.11、0.69±0.01比0.86±0.06、0.70±0.02比1.18±0.01,t=4.89、4.84、37.18,均P<0.01)。而Cav1-shRNA+棕榈酸组细胞存活率较Ctrl-shRNA+棕榈酸组显著上升(0.53±0.10比0.26±0.08,t=4.71,P<0.01),P19的mRNA和蛋白表达均下调(1.53±0.18比0.66±0.04、1.48±0.05比0.70±0.02,t=8.17、25.09,均P<0.01);Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9和Caspase-12的mRNA表达水平下调(1.82±0.11比1.03±0.07、1.43±0.24比0.42±0.15、1.41±0.22比0.51±0.18、1.45±0.18比0.42±0.13,t=5.48~10.49,均P<0.01),蛋白表达也下调(0.99±0.14比0.63±0.11、0.90±0.14比0.62±0.04、0.90±0.02比0.60±0.04、1.30±0.01比0.65±0.04,t=3.50~27.31,均P<0.01)。结论Cav1沉默可以通过影响胰岛β细胞Caspase家族,促进其增殖、减少棕榈酸作用下的β细胞凋亡,保护脂毒性下胰岛β细胞活性。