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目的:通过对比实验,找出一条成本低、纯度高的重组人内皮抑素(rhEndostatin)纯化工艺路线。方法:将rhEndostatin包涵体裂解后用缓冲液稀释至不同尿素(Urea)浓度,上分子筛层析;再将含2-巯基乙醇(2-ME)和不含2-ME的样品分别上分子筛层析;将所得蛋白样品电泳,测定活性,比较结果。结果:使用不含Urea和2-ME的缓冲液所得样品纯度、活性、回收率均很好。结论:用不含Urea和不含2-ME的纯化方法是最佳工艺路线。 相似文献
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目的 构建白喉杆菌染色体整合质粒,建立使外源基因置换白喉毒素基因的方法。方法 PCR方法,寡核苷酸合成方法及其他分子克隆技术。结果 使用以上方法准确制备了所需特定碱基序列位置的2个与白喉毒素基因相关的染色体同源片段,插入pG host5后又引入转录终止子和抗生素抗性基因,从而产生具有可接入外源基因并与白喉杆菌染色体进行双交换同源重组能力的质粒pLB23。用此质粒对白喉杆菌PW8进行了染色体整合,获得了其遗传变异株。结论 所构建的整质粒能够用于白喉杆菌染色体的同源重组,实验为将外源基因引入白喉杆菌染色体进行表达奠定了基础。 相似文献
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