一种简单快速制备动物线粒体DNA的方法

目的探索通过核质分离的方法制备mtDNA。方法利用TritonX 100等非离子型去污剂能溶解除核被膜以外的所有细胞膜的特点 ,通过适当离心 ,分离细胞核/细胞质来获取mtDNA。结果所得mtDNA样品纯度产率较高 ,且无核DNA污染。结论此方法简单快速 ,方法重复性好 ,值得推广应用。     

非小细胞肺癌线粒体基因组大片段缺失突变研究

目的 明确mtDNA 4 977 bp大片段缺失在肺癌组织、癌旁正常组织及非癌患者肺组织中的分布频率,探讨mtDNA 4 977 bp大片段缺失与肿瘤的关系.方法 采用长距离PCR方法对37例肺癌组织和相应的癌旁正常组织、20例非癌患者正常肺组织mtDNA 4 977 bp缺失进行了检测.结果 肺癌组织、癌旁正常肺组织及非癌患者正常肺组织中均检测出存在有线粒体DNA 4 977 bp片段缺失.37例肺癌组织标本中有20例(54.1%)检测到4 977 bp缺失,37例相应的癌旁肺组织22例(59.5%)有缺失, 其中8例在肺癌组织中未显示而却在癌旁正常组织检测到缺失,20例非癌患者正常肺组织中也有6例出现 4 977 bp片段缺失.线粒体DNA 4 977 bp缺失与年龄、吸烟因素有关.结论 线粒体DNA 4 977 bp缺失并非肺癌特异性突变,在癌变过程中不太可能起重要的作用,而可能仅仅是肿瘤发生发展过程中环境和遗传因素作用的反映.     

线粒体基因组不稳定性与肿瘤

基因组不稳定性(genome instability,GI)是肿瘤细胞的主要特征,它在肿瘤的发生和发展过程中起重要作用.GI可发生在不同水平,从单核苷酸、微卫星、基因、染色体结构性成分直至整条染色体,其主要表现为各种类型的异常改变:如单核苷酸突变、微卫星不稳定性、基因组拷贝数的改变和基因的扩增、重排、缺失等等.     

解偶联蛋白2和缺氧诱导因子1α在肺癌组织中的表达

目的 检测临床肺癌组织中解偶联蛋白2的表达与分布,并分析其与缺氧诱导因子1α在肺癌发生的关系.方法 通过荧光定量PCR方法检测肺癌和癌旁正常组织中解偶联蛋白2与缺氧诱导因子1α的表达,同时应用免疫组织化学、Western blot方法检测解偶联蛋白2在肺癌和癌旁正常组织中的表达.结果 荧光定量PCR方法检测,肺癌组织中解偶联蛋白2与缺氧诱导因子1αmRNA的表达约是癌旁正常组织的3倍,Western blot方法检测,解偶联蛋白2在肺癌组织中的表达量约是癌旁正常组织的2倍;免疫组织化学方法检测,解偶联蛋白2主要在细胞质中表达,在肺癌组织中的表达量明显高于癌旁正常组织,且癌细胞的恶化程度与解偶联蛋白2的含量呈正相关.结论 解偶联蛋白2与缺氧诱导因子1α在人肺癌组织中均有高表达,但两者无明显相关性.     

原发性非小细胞肺癌中线粒体DNA含量变化的研究

背景与目的已有的研究表明:线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)突变和拷贝数的改变和肿瘤有着密切联系;大多数实体性肿瘤中mtDNA拷贝数有明显降低。本研究旨在探讨线粒体基因组含量的改变和原发性非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的关系。方法通过实时荧光定量PCR,对肺癌及相对应的癌旁肺组织mtDNA的含量进行精确定量(拷贝数/细胞)。结果肺癌组织mtDNA的平均拷贝数/细胞为395±125,而相对应的正常肺组织为733±196,前者明显低于后者(P<0.001)。肺癌mtDNA含量的改变与患者性别、年龄、是否吸烟及肿瘤的病理类型无关(P>0.05)。结论 mtDNA含量的改变与NSCLC的发生发展密切相关,同时也可能影响其治疗和预后。     

布地奈德联合异丙托溴铵雾化吸入对围手术期肺癌合并中重度COPD患者的临床应用研究

目的研究布地奈德联合异丙托溴胺雾化吸入对肺癌合并中重度COPD患者,行胸腔镜肺叶切除围手术期肺功能保护的应用价值。方法将92例合并中重度COPD、拟接受胸腔镜肺叶切除术的患者随机分为两组,研究组患者围手术期给予布地奈德联合异丙托溴胺雾化吸入治疗并加常规基础治疗(氧疗、辅助排痰、呼吸康复训练),对照组患者接受常规治疗,观察并比较两组患者入院时、术前及术后的肺功能指标。结果研究组患者术前经持续3天的雾化治疗后,第一秒用力呼气量(FEV_1%)、用力肺活量(FVC)、气道峰流速(PEF)及动脉氧分压(PaO_2)均较入院时显著提高(74.59±12.22 vs 62.90±13.84,3.50±0.69 vs 2.98±0.88,52.11±5.50 vs 41.67±7.23,86.18±6.80 vs 73.21±8.38),两组术后PaO_2下降,PaCO_2升高,血气分析结果显示研究组术后指标优于对照组(78.67±6.06 vs 75.23±7.24,39.10±5.47 vs 41.88±5.16),差异均有统计学意义(P0.05)。研究组术后痰上清液中炎症因子(IL-6、IL-8)水平显著低于术前和对照组术后(P0.05),对照组手术前后IL-6和IL-8水平无统计学差异。实验组患者术后疼痛及肺部感染率均低于对照组,并显著减少了平均住院日。结论围手术期布地奈德联合异丙托溴胺雾化吸入可以有效保护肺癌合并COPD患者的肺功能,值得推广。