雷帕霉素靶蛋白反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

目的构建雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的反义RNA真核表达载体，观察其对血管平滑肌细胞（VSMC）功能的影响。方法提取人VSMC总RNA，逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）扩增mTOR基因cDNA序列，经pGEM-T载体克隆后双酶切，将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1，转染VSMC，Westernblot法检测反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响，流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果经RT-PCR获得664bp产物，T载体克隆后，酶切确定该片段为mTOR基因cDNA，进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR，测序证明序列正确后转染VSMC，证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达，转染72h的mTOR蛋白产物表达抑制率达82％，S期细胞由15％降低为7％，凋亡细胞增至9％。VSMC增殖过程在Gx／Go期→S期受阻。结论成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体。     

纳米粒子包载反义雷帕霉素靶蛋白基因转染对移植静脉内膜增生的影响

目的观察纳米粒子包载的反义雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响。方法应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物（PLGA）和聚乙烯醇（PVA）包载mTOR基因。建立自体静脉移植模型，随机分成转基因组、空载体组、对照组。转基因组移植静脉转染纳米粒子包载的反义mTOR基因，空载体组单纯转染纳米粒子包载的空载体，对照组不予特殊处理。分别于移植3、7、14、28d取材，常规苏木素．伊红（HE）、Verhoeff染色，检测mTOR基因的mRNA及蛋白产物表达的变化，TUNEL法观察血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡的动态变化。结果转基因组内膜中mTOR基因的mRNA及蛋白产物表达明显减少（P〈0．01）；转基因组内膜增生程度在术后7、14、28d较其他组明显减少（P〈0．01）；转基因组凋亡细胞明显增多（P〈0．01）。结论纳米粒子可以作为基因载体，反义mTOR基因的表达能够抑制移植静脉内膜的增生，促进VSMC凋亡。     

HD-91-Ⅱ型肝病治疗仪治疗非酒精性脂肪肝1例

1　病历介绍患者 ,男 ,32岁 ,身高 1.72cm ,体质量 6 5kg ;因乏力、右上腹不适 3个月来我院就诊。患者于 2 0 0 3年 8月出现乏力、右上腹不适 ,伴口苦、纳差等。于当地县医院查血脂TC 5 .2mmol/L、TG 6 .0 3mmol/L ,肝功能正常 ,HBV -M阴性 ,B超示 :脂肪肝。给予脂必妥等降脂治     

急性肠系膜上静脉血栓形成的诊治分析

回顾性分析我科收治的46例急性肠系膜上静脉血栓形成（ASMVT）临床资料，探讨ASMVT的临床特点、诊断和治疗.ASMVT的早期症状与体征不符．极易误诊。本组手术治疗24例．保守治疗22例．死亡7例，死亡率为15％．B超、CT及肠系膜血管造影是诊断ASMVT的主要手段。早期无腹膜炎体征的病人可行抗凝、溶性保守治开；已出现腹膜炎体征．呕吐物、排泄物为血性或腹穿抽出血性渗出物是剖腹探查指征.术中、术后均应采取系统的抗凝、溶栓治疗．     

坚持科学发展观创建平安和谐医院

1以人为本,培育平安和谐医院环境1.1开展综合评价,消除医疗过程中的不安全不和谐隐患一是合理用药评价。建立不当处方点评公示制度,对门诊住院所有处方的用药情况,从目的性、针对性、价格高低     

反义mTOR基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响

目的:观察反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因转染对移植静脉内膜增生的影响。方法:聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)和聚乙烯醇(PVA)包载制备纳米级粒子混合物。建立自体静脉移植模型,随机分成转基因组、空载体组、对照组。转基因组转染纳米粒子包载的反义mTOR基因,空载体组转染纳米粒子包载的空载体,对照组不予特殊处理。分别于术后3、7、14、28d取材,常规HE、弹力纤维VG染色,RT-PCR、免疫组织化学染色、Western blot检测mTOR基因的mRNA及蛋白的变化,TUNEL法观察血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的动态变化。结果:转基因组内膜中mTOR蛋白产物表达较其他组明显减少(P<0.05);转基因组内膜增生程度在术后7、14、28d较其他组明显减少(P<0.01);转基因组凋亡细胞较其他组明显增高(P<0.05)。结论:反义mTOR基因的表达能够有效抑制自体移植静脉内膜的增生,促进VSMC的凋亡。     

急性肠系膜静脉血栓形成与MTHFR基因C677T突变的相关性研究

目的：探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) 基因C677T 突变在急性肠系膜静脉血栓形成(AMVT)发病中的意义。 方法：采用高效液相色谱法测定63例AMVT患者和128名健康对照者血浆的同型半胱氨酸(Hcy)水平, 放射免疫法测定血浆叶酸浓度；应用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性方法进行MTHFR C677T 基因多态性分析, 并进行基因型及等位基因频率的计数。 结果：AMVT组和对照组血浆Hcy水平分别为(23.5±8.8) μmol/L和(12.7±6.9) μmol/L, 差异有统计学意义(P＜0.01)。Hcy水平与叶酸呈负相关(AMVT组：r=-0.42, P＜0.01；对照组：r=-0.39, P＜0.01)。MTHFR C677T TT基因型在AMVT组的分布频率为33.3 %, 高于对照组的17.2 %, 差异有统计学意义(χ2=6.31, P＜0.05)。结论：血浆Hcy水平升高是AMVT形成的危险因素之一。MTHFR C677T多态性中TT基因型可能是AMVT形成的一个重要遗传风险因子。     

桂枝汤加减治疗荨麻疹

1 临床资料本组10例均为门诊病人,其中男4例,女6例;年龄最大者52岁,最小者7岁;病程最短者5天,最长者2个月。 2 治疗方法方药:桂枝9g,白芍9g,炙甘草6g,生姜9g,大枣12枚。加减:瘙痒较重者加蝉蜕9g,防风10g,白蒺藜10g;风团鲜红者加生地12g,赤芍10g;风团苍白者加当归10g,三七粉3g(冲服)。 3 治疗效果本组病人全部治愈。服药5剂以下治愈者3例,10例以下治愈者5例,20剂以下治愈者2例。     

检验“危急值报告制度”在医疗安全管理中的重要性

随着医院管理年的不断深入,医疗安全越来越受到重视,因此生命危急值制度的建立,是防范医疗纠纷、医疗过错的前题。要根据医院的实际情况制定检验危重值项目、界限值,建立危急值报告程序,以适合医院医疗安全管理的需要。     

核因子-κB在大鼠腹主动脉瘤发病过程中的表达研究

目的 观察核因子-κB(NF-κB)在大鼠腹主动脉瘤(AAA)发病过程中的变化规律.方法 采用灌注法制备大鼠AAA模型,实验组采用猪胰弹力酶灌注,对照组采用生理盐水灌注,免疫组织化学法观察NF-κB的阳性变化,计算机图像分析仪分析其变化规律.结果 与对照组相比,实验组AAA形成明显,与之相对应的NF-κB于术后7 d表达至高峰状态,并持续至14d才逐渐衰减.结论 NF-κB的表达变化与AAA的发生发展过程相吻合.说明NF-κB可能在介导AAA的形成中发挥作用.