旋毛虫肌幼虫p45cDNA的克隆及鉴定

目的本研究根据GenBank中旋毛虫45kDa抗原基因的序列设计引物,采用PCR技术从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因p45cDNA,并克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希氏菌NovaBlue后测序分析。获得827bp的p45cD-NA。该序列与GenBank中的旋毛虫p45基因序列相比共有1个核苷酸发生改变,二者的同源性为99%,其编码蛋白质由268个氨基酸组成,与45kDa抗原的同源性为99%。将p45cDNA克隆到原核表达载体pET28a并转化至表达菌BL21star（DE3）后,经IPTG诱导表达出约30kDa的重组蛋白。Western-blot检测表明,p45重组蛋白可以被旋毛虫感染猪血清识别,具有良好的抗原性。     

旋毛虫感染早期小鼠肠道病理变化及免疫调节相关细胞因子表达的研究

目的 探究旋毛虫感染早期如何诱导肠道病理变化及免疫调节相关细胞因子表达情况。方法 通过苏木素伊红染色方法观察旋毛虫感染BALB/c鼠早期4个关键时间节点肠道病理学变化,采用电化学发光免疫分析法(Meso Scale Discovery,MSD)检测感染早期肠系膜淋巴结相关细胞因子表达情况。结果 肠道病理学结果表明,肠粘膜增厚,嗜酸性粒细胞浸润,数量明显增多。MSD结果显示,感染后6 h肠系膜淋巴结Th1型细胞因子(IL-2)表达水平显著降低,其他细胞因子无显著变化;感染后3 d至6 d,Th1型细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4、IL-10)表达水平均显著升高,呈Th1 / Th2混合型免疫应答。结论 旋毛虫感染后6 h至6 d肠道炎症随感染时间延长加重,感染后6 h Th1型免疫应答受到抑制,随后旋毛虫通过诱导机体产生以Th2型为主的混合型免疫应答,实现旋毛虫在机体内的长期寄生。     

动物性食品中的有害元素与人体健康

动物性食品由于具有营养十富、种类多、加工及制作方法多、风味独特等优点而深受人们的喜爱。近年来,由于环境污染日益加重,由此而带来的食品化学污染问题越来越突出,尤其是其中的有害元素,由于种类多、污染面广、对人体危害较大而受到人们的普遍关注。     

免疫学试验监测麻风复发的初探

麻风化疗后监测复发,是评价疗效和控制该病传播的主要途径。在细菌繁殖的初期,尚无明显复发症状时,仅靠每年一次的临床、细菌检查难以发现复发。为建立有效的疗后监测法,用适合现场的血清学试验和麻风菌素试验,对潍坊地区8县1658例麻风治愈者进行复发监测的前瞻性研究,以探讨免疫学试验监测复发的预测性。以PGL抗体(+),麻素反应(-)为复发危险因素,经筛检发现27例。其中危险组复发率为11％(23/210),对照组为0.28％(4/1447),相对危险度为39.5。筛检的结果反映了治愈者的免疫学状态,即愈后随时间推移,抗体逐渐消退和细胞免疫逐渐建立。MB治愈者PGL—IgM水平与麻素反应强度的负相关性提示,结合两指标不仅可反映机体免疫系统对麻风菌的清除力,而且为两指标结合筛检危险对象提供了理论依据。在27例复发中,多数复发时PGL—IgM水平已较高。监测中发现的7例复发,除PB复发外,余者在复发症状出现前1年半至2年半之间,已有PGL—IgM升高或持续升高。因此,对愈后时间较长、IgM水平较高,但无明显复发症状者,应予重点监测,观察PGL—IgM的动态变化。为提高监测PB复发的敏感性和可靠性,何合用PCR以协助早期诊断。     

Ligasure血管闭合系统痔切除优越于传统式痔切除的临床分析

疼痛和出血一直是痔切除术要解决的主要问题.Ligasure血管闭合系统是一种新型组织凝血设备,国外及一些国内一级城市已成功的将Ligasure应用到痔切除术中,明显优越于传统式使用刀片或电刀痔切除术,取得了良好的止血和疼痛减轻效果.现将我院2009年1月-2009年12月共收治268例痔患者分两组治疗:一组为Ligasure血管闭合系统痔切除;另一组为传统式使用刀片或电刀痔切除.     

人兽共患带科绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂研究进展

丝氨酸蛋白酶抑制剂是一类能抑制丝氨酸蛋白酶活性的蛋白超家族,通过抑制宿主蛋白酶活性协助寄生虫感染宿主。本文从丝氨酸蛋白酶抑制剂空间结构与分类、丝氨酸蛋白酶抑制剂与宿主机体免疫应答间的作用机制及当前人兽共患带科绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂相关研究进展等方面进行阐述,为人兽共患带科绦虫及其中绦期幼虫感染引发疾病诊断、药物治疗靶点和疫苗候选分子筛选等提供参考。     

原核表达HPV16 L1蛋白ELISA方法检测血清抗体

目的:从感染人乳头瘤病毒(HPV)的新鲜宫颈癌组织中扩增HPV16型晚期蛋白L1基因全长,构建原核表达载体,表达并纯化蛋白用于ELISA检测。方法:根据基因序列设计一对特异引物,用PCR的方法从宫颈癌组织DNA中获得L1基因,以pet28a为载体构建表达质粒,IPTG诱导表达蛋白,DEAE及葡聚糖凝胶分离纯化目的蛋白,将蛋白包被平底96孔板用于ELISA检测。结果:从宫颈癌临床标本克隆到HPV16型L1蛋白编码序列,其原核表达产物纯化后可用于ELISA检测。结论:成功获得人有抗原性的HPV16L1蛋白,可用于ELISA检测。