自由基、炎症与衰老

<正>自由基(free radicals)是生命科学的研究热点,1956年美国的Harman[1]将辐射化学中的自由基概念引入生物领域,提出了著名的自由基学说(free radial theory)。活性氧(reactive oxygen species,ROS)是机体内最常见的自由基。人体的自由基以氧自由基为主。过量的自由基诱发机体氧化反应,可损害机体的组织和细胞,进而导致     

低氧条件下共培养体系中肺动脉内皮细胞经Notch1/Jagged1信号通路调控肺动脉平滑肌细胞的增殖

目的探讨低氧条件下细胞共培养体系中肺动脉内皮细胞经由Notch1/Jagged1信号通路调控肺动脉平滑肌细胞的增殖。方法建立Transwell共培养体系,将肺动脉内皮细胞(PAEC)和平滑肌细胞(PASMC)分别接种于下室和上室,PAEC经DAPT(Notch信号阻断剂)或(和)S iR-NA-Jagged1预处理后,与PASMC共同置入自动常压缺氧孵箱进行低氧处理。根据PAEC是否行DAPT、Jagged1小RNA干扰预处理进行实验分组:常氧时PAEC与PASMC共培养对照组(N)、低氧时PAEC与PASMC共培养组(H1)、低氧时DAPT(终浓度10μmol/L)预处理PAEC与PASMC共培养组(H2)、低氧时S iRNA-Jagged1预处理PAEC与PASMC共培养组(H3)、低氧时DAPT加S iRNA-Jagged1预处理PAEC与PASMC共培养组(H4)。用3H-TdR掺入法检测PAEC和PASMC增殖情况,RT-PCR检测PAEC中Notch1、Jagged1 mRNA表达水平。结果低氧时各组PAEC和PASMC的3H-TdR掺入量明显高于常氧共培养对照组(均P<0.01);与H1组比较,...     

肝脏老化与临床

衰老（aging）是自然界一切生命由遗传因素和内外环境因素相互作用下的生物学过程,是机体功能退行性下降及紊乱的综合变化。与其他脏器一样,在机体生长发育成熟以后,肝脏从形态结构到功能都发生了一系列退化即老化。本文就肝脏老化的表现及其临床意义进行综述。     

抗衰老的新靶点：SIRT6

衰老是机体组织、器官结构与功能随年龄增长而发生的退行性变化,受到体内与体外许多因素（遗传、精神、环境污染等）的共同影响。生物体的衰老和长寿由遗传和环境因素的双重相互作用决定,通常认为环境因素的影响是随机的,而对环境作出反应的能力是遗传因素决定的。鉴于世界各国人口老龄化加剧的趋势和老龄化医疗开支的持续增加,延缓衰老、促进老年人健康与长寿成为当今世界各国亟待解决的重要课题。     

核因子-κB调控老年大鼠脾淋巴细胞凋亡及淫羊藿总黄酮对其影响

目的探讨核因子-κB（nuclearfactor—kappaB，NF-κB）对老年大鼠脾淋巴细胞凋亡的调控作用及淫羊藿总黄酮（epimedium total flaonoids，EF）对老年大鼠脾淋巴细胞凋亡的调控作用是否通过NF—κB实现。方法分别给予老年大鼠模型NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷（PDTC）和EF干预，提取大鼠脾淋巴细胞，用流式细胞仪检测细胞凋亡，Westem blot检测P65蛋白表达，电泳迁移率（electrophoretic mobility shift assay，EMSA）检测NF-κB的活性。结果老年大鼠脾淋巴细胞凋亡率比青年大鼠高（P〈0．01），PDTC使老年大鼠的凋亡率更高，而EF使老年大鼠的凋亡率降低，与老年组相比有显着性差异（P〈0．05），且EF能拮抗PDTC诱导老年大鼠胆淋巴细胞凋亡。与青年大鼠相比老年大鼠脾淋巴细胞P65蛋白表达显著下调（P〈0．01），而使用EF的老年大鼠组P65蛋白表达明显上调，表明EF诱导P65高表达。老年大鼠脾淋巴细胞NF-κB的活性弱于青年大鼠（P〈0．01），而PDTC处理组的NF—κB活性最低与老年大鼠组相比差异明显（P〈0．01），EF干预组的NF-κB的活性最强，与老年大鼠组相比差异非常显著（P〈0．01）。相关分析表明，淋巴细胞NF—κB活性与细胞凋亡率呈负相关（r=-0．57，P〈0．01）。结论NF-κB通过抑制淋巴细胞凋亡而参与老年大鼠免疫衰老调控过程；EF可能通过提高NF-κB的活性和诱导P65高表达来抑制淋巴细胞凋亡从而延缓免疫衰老进程。     

mmu_circ_0001033过表达慢病毒载体的构建与鉴定

目的构建环状RNA mmu_circ_0001033慢病毒表达载体,作为在低氧性肺动脉高压功能学实验研究的基础。 方法首先设计引物将目的基因片段从原质粒上扩增下来,通过引物两端所含无缝克隆识别位点将其重组到酶切后的过表达载体上;将连接产物转入制备好的细菌感受态细胞,而后将其单克隆菌落送测序公司进行测序鉴定。其次通过PCR产物跑胶和测序验证成环情况。最后用构建的重组表达载体和包装质粒共同转染293T细胞,包装慢病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,并测定滴度。 结果经过比对,重组克隆中插入片段序列与目的片段序列完全一致,表明质粒构建成功。PCR产物后经sanger测序确认环化位点处序列完全正确。将构建的过表达载体测序结果和质粒构建方案基因比对,重组克隆中插入片段序列与目的片段序列与预期完全一致,可实现转染质粒后目的基因的表达,PCR产物跑胶和测序结果表明mmu_circ_0001033成环成功。PCR产物跑胶和测序结果表明mmu_circ_0001033成环成功。最后通过比较RT-qPCR测定病毒滴度值为2.09×10⁸ TU/ml。 结论成功构建环状RNA mmu_circ_0001033慢病毒表达载体,能稳定转染293T细胞,可用于后续细胞实验。     

老年代谢综合征患者糖尿病患病情况及影响因素分析

目的探讨老年代谢综合征(MS)患者与糖尿病(DM)患病的关联性,为老年人DM的预测和防治提供依据。方法收集广州某干休所参加体检普查的57例老年MS患者(试验组)和57名正常老年人(对照组)的血糖指标数据,根据空腹血糖受损(IFG)和DM诊断标准,分析观察MS患者中DM患病情况及影响因素。结果试验组的总胆固醇、体质量指数、腰围、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血糖、血压水平均明显高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显低于对照组(P<0.05或P<0.01)。57例MS患者中,IFG患者9例(5.8%),DM患者8例(14%),与对照组比较,IFG和DM的发生率均有显著增加(P<0.01)。结论 MS为DM的危险因素,加强老年患者的饮食调节和药物降低血脂可能有利于减少DM的发生。     

衰老进程中大鼠淋巴细胞凋亡率的比较研究及淫羊藿总黄酮的干预作用

目的：比较研究衰老进程中各年龄段大鼠淋巴细胞凋亡率的差异及淫羊藿总黄酮（EF）对老年期细胞凋亡的干预作用。方法：选用SD大鼠脾脏分离的淋巴细胞为研究对象,用流式细胞方法,比较从出生后3天直到27月龄衰老进程中,各代表性年龄段的细胞凋亡率差异,并观察EF对老年过度细胞凋亡的影响作用。结果：刚出生3天组的凋亡率最低,随着增龄,细胞凋亡率逐渐升高,仅10月龄组例外,其凋亡率小于4月龄组,27月龄的细胞凋亡率最高。EF干预后,27月龄组的细胞凋亡率明显下降,介于10月龄与18月龄之间水平,以上差异均有显著统计学意义（P〈0.05～P〈0.001）。结论：在衰老进程中,大鼠淋巴细胞的凋亡率随增龄而逐渐升高,在老年大鼠存在过度凋亡现象,而EF可抑制老年淋巴细胞过度凋亡。     

基于低强度有氧训练对高龄老年人步行速度的影响研究

目的研究低强度有氧训练对高龄老年人步行速度的影响。方法选取2016年1月-2019年1月在复旦大学附属华东医院住院老年患者30例,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组15例。观察组采用低强度有氧训练,对照组采用康复宣教的常规步行训练,持续干预3个月。用起立行走试验(TUG)和10 m步行测试(10MWT),对2组干预前后步行能力进行评估。结果干预前,2组的TUG和10 MWT结果比较差异无统计学意义(P>0.05);干预后,观察组TUG和10MWT小于干预前(P<0.001),也均小于对照组干预后(P<0.05);而对照组干预前后TUG和10 MWT差异无统计学意义(P>0.05)。两组干预前后血压、心率未见明显变化。结论低强度有氧训练可有效地提高高龄老年人的步行速度,并且安全、可靠。