男性冠心病患者介入治疗前后外周血平滑肌前体细胞数量的变化

目的:观察比较正常人与冠心病患者外周血平滑肌前体细胞（SPCs）数量的差异,以及冠心病患者在经皮冠脉介入治疗（PCI）前后外周血中SPCs数量的变化。方法: 将研究对象分为3组:稳定型心绞痛（SAP）组、不稳定型心绞痛(UAP)及正常对照组(NC)。SPCs以CD14和CD105双阳性确定,利用流式细胞仪双色分析技术筛选各组在PCI术前、术后即刻、术后72 h SPCs占外周血有核细胞的百分比。结果: PCI术前,外周血中SPCs数量在SAP组为（0.20±0.13）%、UAP组为（0.28±0.18）%,均明显高于NC组［（0.12±0.10）%］（均P<0.01）,UAP组外周血中SPCs数量明显高于SAP组（P<0.01）。UAP组外周血中SPCs的数量在PCI术后72 h较术前明显增加［（0.34±0.25）% vs. （0.28±0.18）%,P<0.01］。结论: 外周血中SPCs数量的变化及PCI对外周血SPCs数量的影响可能与冠心病的临床类型有关。     

成人外周血平滑肌祖细胞的体外培养

背景:外周血平滑肌祖细胞具有向平滑肌细胞分化的能力.目的:探索体外分离培养成人外周血平滑肌祖细胞的方法及其生长分化特性.方法:采用密度梯度离心法分离获得成人外周血单个核细胞,培养12 d后,应用流式细胞仪鉴定分析平滑肌祖细胞并分选纯化,继续培养诱导分化.采用倒置显微镜观察平滑肌祖细胞的形态变化,免疫荧光染色法观察其α-肌动蛋白的表达,同时应用Western blot法检测调宁蛋白、平滑肌肌球蛋白重链的表达情况.此外,观察平滑肌祖细胞的生长特性,绘制生长曲线.结果与结论:成人外周血单个核细胞诱导培养4 d时开始出现细胞集落,12 d时细胞呈明显梭形.流式细胞仪分析显示,CD14和CD105双阳性的平滑肌祖细胞占贴壁细胞的(71.8±7.2)%.分选纯化的平滑肌祖细胞培养到28 d呈旋涡状生长.间接免疫荧光染色显示,α-肌动蛋白表达呈阳性.Western blot检测显示,调宁蛋白和平滑肌肌球蛋白重链分别于14,21 d开始表达,并逐渐增加.生长曲线表明,细胞生长至第6天进入对数生长期,第12天后进入平台期.提示通过对外周血单个核细胞的诱导培养,可以获得大量的平滑肌祖细胞.它能稳定增殖,并可进一步分化为平滑肌细胞.     

成人外周血平滑肌祖细胞的体外培养

背景：外周血平滑肌祖细胞具有向平滑肌细胞分化的能力。目的：探索体外分离培养成人外周血平滑肌祖细胞的方法及其生长分化特性。方法：采用密度梯度离心法分离获得成人外周血单个核细胞,培养12d后,应用流式细胞仪鉴定分析平滑肌祖细胞并分选纯化,继续培养诱导分化。采用倒置显微镜观察平滑肌祖细胞的形态变化,免疫荧光染色法观察其α-肌动蛋白的表达,同时应用Westernblot法检测调宁蛋白、平滑肌肌球蛋白重链的表达情况。此外,观察平滑肌祖细胞的生长特性,绘制生长曲线。结果与结论：成人外周血单个核细胞诱导培养4d时开始出现细胞集落,12d时细胞呈明显梭形。流式细胞仪分析显示,CD14和CD105双阳性的平滑肌祖细胞占贴壁细胞的（71.8±7.2）%。分选纯化的平滑肌祖细胞培养到28d呈旋涡状生长。间接免疫荧光染色显示,α-肌动蛋白表达呈阳性。Westernblot检测显示,调宁蛋白和平滑肌肌球蛋白重链分别于14,21d开始表达,并逐渐增加。生长曲线表明,细胞生长至第6天进入对数生长期,第12天后进入平台期。提示通过对外周血单个核细胞的诱导培养,可以获得大量的平滑肌祖细胞。它能稳定增殖,并可进一步分化为平滑肌细胞。     

血塞通联合刺五加治疗脑供血不足临床疗效观察

目的观察血塞通联合刺五加治疗脑供血不足临床疗效。方法将40例脑供血不足患者分为治疗组和对照组。治疗组20倒采用血塞通注射液300mg，刺五加注射液20ml静脉滴注，1次／d，共14d，对照组20例采用血塞通注射液300rag，胞二磷胆碱注射液0．5g静脉滴注，1次／d，共14d。结果两组药物有效率比较，治疗组明显优于对照组（P〈0．01）。结论血塞通联合刺五加治疗脑供血不足疗效肯定。     

高糖对成人外周血平滑肌祖细胞功能的影响

目的观察不同浓度葡萄糖对体外培养成人外周血平滑肌祖细胞（smooth muscle progenitor cells,SPCs）增殖、迁移和黏附能力的影响。方法采用密度梯度离心法从健康成人外周血获取单个核细胞,培养12d后,采用流式细胞仪对诱导扩增的SPCs进行分析鉴定并分选纯化。间接免疫荧光染色法观察SPCs培养到第28天后人平滑肌细胞特异性肌动蛋白（a-SMA）的表达情况。收集培养第12天的SPCs,随机（补充具体的随机方法？）分为5组并给予不同浓度葡萄糖干预：对照组（5．5mmol／L）,11 mmol／L组,22mmol／L组,44mmol／L组和渗透压对照组（5．5mmol／L葡萄糖加38mmol／L甘露醇）。分别用噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTY）比色法．Transwell小室迁移实验以及黏附能力测定实验检测各组干预6d后SPCs增殖、迁移和黏附能力的变化。此外,培养SPCs8d,期间用22mmol／L葡萄糖分别干预0、2、4、8、d,观察各组细胞增殖、迁移和黏附能力的变化。结果与对照组相比,高糖各组均能明显促进外周血SPCs的增殖、迁移和黏附能力,其中22mmol／L葡萄糖组的影响最为显著,44mmol／L葡萄糖组的促进作用有所下降。用22mmol／L葡萄糖分别干预SPCs0、2、4、8d,其增殖、迁移和黏附能力随着作用时间延长而增强,以干预8d组最显著。结论高糖能在一定范围内增强外周血SPCs的增殖、迁移、黏附能力,随着浓度增加和时间延长,作用更明显。推测长期高血糖通过促进SPCs的功能参与受损血管过度修复．引起部分心血管疾病的发生发展。     

成人外周血平滑肌祖细胞的体外培养

背景：外周血平滑肌祖细胞具有向平滑肌细胞分化的能力。 目的：探索体外分离培养成人外周血平滑肌祖细胞的方法及其生长分化特性。 方法：采用密度梯度离心法分离获得成人外周血单个核细胞,培养12 d后,应用流式细胞仪鉴定分析平滑肌祖细胞并分选纯化,继续培养诱导分化。采用倒置显微镜观察平滑肌祖细胞的形态变化,免疫荧光染色法观察其α-肌动蛋白的表达,同时应用Western blot法检测调宁蛋白、平滑肌肌球蛋白重链的表达情况。此外,观察平滑肌祖细胞的生长特性,绘制生长曲线。 结果与结论：成人外周血单个核细胞诱导培养4 d时开始出现细胞集落,12 d时细胞呈明显梭形。流式细胞仪分析显示,CD14和CD105双阳性的平滑肌祖细胞占贴壁细胞的(71.8±7.2)%。分选纯化的平滑肌祖细胞培养到28 d呈旋涡状生长。间接免疫荧光染色显示,α-肌动蛋白表达呈阳性。Western blot检测显示,调宁蛋白和平滑肌肌球蛋白重链分别于14, 21 d开始表达,并逐渐增加。生长曲线表明,细胞生长至第6天进入对数生长期,第12天后进入平台期。提示通过对外周血单个核细胞的诱导培养,可以获得大量的平滑肌祖细胞。它能稳定增殖,并可进一步分化为平滑肌细胞。