香菇多糖对荷瘤小鼠肝组织的干扰素和超氧化物歧化酶mRNA表达

目的：研究香菇多糖（LNT）对荷瘤小鼠肝组织中干扰素（IFN）和超氧化物歧化酶（SOD）基因（mRNA）转录的影响。方法：生长正常的C57BL／6小鼠，左腋皮下接种S180细胞，接种48h后，分荷瘤组，荷瘤加低LNT组（浓度为5mg/kg)，荷瘤加高LNT组（浓度为30mg/kg)及对照组，每组4只，连续给药6d后，进行断颈处死，剖取瘤体称理记录和提取鼠肝组织总mRNA斑点杂交。结果：LNT对S180肉瘤的生长有较明显的抑制作用，而5mg/kg和30mg/kg两种剂量的LNT均能提高IFN和SDOmRNA的表达量，且前者作用稍强于后者（P＜0．05）。结论：LNT能提高荷瘤小鼠肝组织IFN和SOD的mRNA表达。     

天然免疫中一种新的抗原识别蛋白:Toll及Toll类受体家族

天然免疫系统是防御微生物感染的第一道防线。近年来的研究发现在天然免疫应答过程中 ,抗原的识别是由Toll蛋白受体家族所介导的 ,具有种属特异性。Toll蛋白家族的受体可识别病原性微生物的保守分子 ,并与信号传导途径相偶联 ,激活大量与免疫应答相关的编码基因 ,最终导致一系列免疫应答的产生     

092 T细胞活化机理的新发现--免疫突触

T细胞的活化一直以来就是免疫学家们研究的重点,近几年来,又提出了免疫突触这一新的概念.在T细胞和抗原递呈细胞间的微米空间内形成免疫突触,通过此结构,T细胞抗原受体和主要组织兼容性复合物发生相互作用引起免疫反应.     

γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物的制备及其生物活性

目的研究一种低毒性的顺铂复合物:γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物(γ-PGAasp-CDDP),考察其体外性质和体内毒性,并探讨可能的作用机制。方法γ-聚谷氨酸与天冬氨酸发生酰胺化反应制备γ-聚谷氨酸-天冬氨酸复合物,核磁共振对其结构进行表征;化学法制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物;常规方法检测该复合物稳定性;透析法研究药物缓释效果;MTT法检测复合物体外抗肿瘤细胞活性;流式细胞仪检测其对细胞凋亡的作用;小鼠体内实验检测其体内毒性。结果成功制备γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物,顺铂的有效结合率达30%;该复合物在常温中性环境下稳定;30h时顺铂的累计释放率达到30%;细胞实验表明复合物对Bcap-37(人乳腺癌细胞)和BEL7404(人肝癌细胞)具有显著的杀伤作用,小鼠体内实验表明该复合物的毒性比游离顺铂低。结论γ-聚谷氨酸天冬氨酸-顺铂复合物仍然保留了游离顺铂的生物活性,在杀伤肿瘤细胞、引起细胞凋亡的同时,大大降低了体内毒副作用,其作用机制可能与实体瘤组织的高通透性、滞留效应(EPR效应)以及药物缓释作用有关,因此该复合物具有潜在的临床应用价值。     

日本血吸虫模拟虫卵抗原表位的筛选和鉴定

目的　通过噬菌体肽文库技术探索可用于诊断日本血吸虫病的模拟虫卵抗原。　方法　用日本血吸虫虫卵单克隆抗体 6 B12作“诱饵”,采用生物淘金法从噬菌体 15 -肽文库中经过 3轮筛选 ,有效地富集与 6 B12有亲和力的噬菌体肽克隆。随后采用 EL ISA、竞争 EL ISA、Western blotting等检测方法 ,从 4 0 0个单克隆化的噬菌体株中得到 13株与 6 B12有特异性、高亲和力反应的噬菌体克隆。　结果　对噬菌体所携带的外源 DNA片段序列测序结果表明 ,13株噬菌体所携带的外源多肽序列完全相同。该噬菌体多肽抗原包被酶标板经 EL ISA方法对血吸虫病患者及健康人血清Ig G抗体检测结果表明 ,两者有显著性差异。　结论　噬菌体多肽模拟抗原有可能替代天然抗原用于血吸虫病诊断     

基因芯片检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性研究

目的　研究基因芯片在检测结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药性中的应用。方法根据与利福平和异烟肼耐药相关的 4条基因上的 11个位点的 30种单核苷酸多态性设计制作芯片 ,用芯片检测结核分枝杆菌的基因突变 ,从而判断其耐药性。结果　用基因芯片在 110株异烟肼耐药株中检测出 85株 (73 3% ) ,在 30株异烟肼敏感株中检测出 2 2株 (73 3% ) ,在 94株利福平耐药株中检测出 77株 (81 9% ) ,在 4 6株利福平敏感株中检测出 4 0株 (87 0 % )。芯片检测结果与部分样本的测序结果完全相符。结论　用DNA芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性具有较高的特异性和敏感性 ,该法快速、精确 ,可以应用于结核分枝杆菌耐药性的检测。     

聚谷氨酸天冬氨酸顺铂复合物的体内毒性和抑瘤活性

目的:研究聚谷氨酸天冬氨酸顺铂复合物(PGA-Asp-CDDP)的体内毒性和抑瘤活性。方法:采用透析法、MMT法、昆明鼠和BALB/c裸鼠SMMC-7721肝癌模型检测PGA-Asp-CDDP的缓释作用,细胞毒性,体内毒性和抑瘤活性。结果:PGA-Asp-CDDP的10 h时顺铂累计释放率为32%,与人肝癌细胞SMMC-7721孵育72 h的IC50为(45.5±10.3),累计给药为12 mg·kg-1时体内毒性显著下降,并且对肝癌模型有显著抑瘤效果(P<0.01)。结论:聚谷氨酸天冬氨顺铂复合物有望成为治疗肝癌的一种安全有效的药物。     

通用型免疫-聚合酶链反应系统的建立及应用

目的构建基因探针，建立通用型免疫－聚合酶链反应（ＰＣＲ）系统，检测极微量抗原抗体。方法以聚乙烯亚胺（ＰＥＩ）作交联剂，构建成ＳＰＡ－ＤＮＡ基因探针，直接把生物素（Ｂｉｏ）与ＤＮＡ连接构建成Ｂｉｏ－ＤＮＡ基因探针，应用于免疫－ＰＣＲ中，分别对抗原抗体进行检测分析。结果建立了通用型抗体抗原免疫－ＰＣＲ检测系统。分别用于人血清蛋白（ＨＳＡ）抗体抗原检测，ＨＳＡ抗体检测的最高稀释度可达１１０９，ＨＳＡ抗原检测极限可达１０－１０ｍｇ／ｍｌ，分别比类似条件下的酶联免疫吸附测定灵敏度高１０５和１０６倍。结论建立的免疫－ＰＣＲ系统灵敏度高，可用于各种极微量抗原抗体的检测。     

随机肽库技术在肿瘤导向治疗中的应用

目前肿瘤导向治疗的临床效果尚不理想 ,关键的问题在于缺乏高效导向性的载体系统。而用肿瘤治疗中的目标受体从随机肽库中筛选出相应结合肽 ,并对其结构进行分析 ,得到该目标受体的模拟配体 ,并利用其与目标受体有强亲和力的特性可以将药物定向地输送到肿瘤细胞 ,改善治疗的效果。通常应用的随机肽库为噬菌体肽库。噬菌体肽库由于具有表型与基因型的统一 ,可以大量扩增 ,并能用于蛋白质二级结构的研究 ,而且操作方法具有快速、有效、简便等特点 ,从而在医学和生物学的基础理论研究和实际应用中都有非常广泛的用途     

基因芯片技术及其在药学研究领域中的应用

目的 论述基因芯片技术的概念和基本过程，及其在药学领域中的应用。方法 主要利用近期资料，论述基因芯片技术的背景、基本概念、基本过程；及其在药学领域中的应用、研究状况、发展背景和当前存在的问题。结果 基因芯片技术目前国内外都取得了较大的进展，该技术可用于基因表达、基因诊断、药物筛选、给药个体化分析、病原体致病机制及抗药性研究、中药物种分类鉴定等等，有巨大的产业化发展前景。结论 我国也应加快基因芯片技术研究，克服困难，早日和各国一道进入生物信息时代。