芳香烃羟化酶活性与苯并[a]芘中间代谢产物生成关系的研究

100mg香烟烟油,多氯联苯诱导大鼠肝S_9组分中芳香烃羟化酶代谢B[a]P为3-OH-B[a]P的活性分别升高约40,20倍,而代谢B[a] P生成6-OXY-B [a]P自由基产物却仅由多氯联苯诱导的S_9组分作用中才被观察到。     

“SARS”治疗应加强自由基损伤防治

SARS (severeacuterespiratorysyndrome)———严重急性呼吸综合征 ,亦称“传染性非典型肺炎”———infectiousatypicalpneumonia ,强烈的传染性 ,使其在数月时间已席卷全球 3 0余个国家和地区 ,患病人数逾万 ;2 0 0 3年 4月 16日 ,WHO正式宣布其病原为冠状病毒属 (coronavirus)的新毒株 ,并将之命名为SARS病毒[1] 。目前虽采取远比其他病毒感染更为全面的对症支持措施 ,死亡率仍居高不下 ,WHO估计会超过 15 % ,我国调查报告数字为 3 7%～ 13 2 % ,香港地区 60岁以上患者病死亡率高达 43 % [2 ] ,提示在临床治疗上仍有值得商榷改进…     

胰腺癌相关免疫原性膜抗原的筛查和鉴定

目的 应用蛋白质组学技术筛查、鉴定胰腺癌相关免疫原性膜抗原.方法 培养、提取并纯化胰腺癌细胞株SW1990的膜蛋白,将膜蛋白通过双向凝胶电泳(2-DE)进行分离,平行的3块2-DE凝胶分别行考马斯亮蓝染色和免疫印迹杂交.收集并纯化临床上66例胰腺癌和24例慢性胰腺炎患者血清中的IgG,分别与膜蛋白2-DE平行凝胶进行免疫印迹杂交.应用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱分析杂交阳性蛋白位点,并经肽指纹库鉴定.应用RT-PCR、实时荧光定量PCR(real-time PCR)、Western blot方法对筛查出的膜抗原进行验证,并比较不同胰腺癌细胞株、正常胰腺组织中目的 膜抗原的基因及蛋白表达水平的差异.结果 胰腺癌细胞株SW1990膜蛋白与胰腺癌患者血清IgG免疫印迹杂交共出现9个阳性点,与同慢性胰腺炎IgG杂交所出现的2个阳性点无重复,经质谱分析鉴定出电压依赖性离子通道(VDAC)2可能是有潜力的候选膜抗原.经RT-PCR和real-time PCR验证,VDAC2基因在胰腺癌细胞株SW1990、AsPc、P3中均有表达.Western blot实验结果表明,VDAC2在胰腺癌细胞株中的蛋白表达明显高于正常胰腺组织.结论 胰腺癌细胞膜蛋白VDAC2可能是具有免疫原性的胰腺癌相关膜抗原,其基因在胰腺癌细胞株SW1990、AsPc、P3中均有表达,并且在胰腺癌细胞株中的蛋白表达水平明显高于正常胰腺组织.     

心肌代谢及细胞功能的核磁共振波谱（NMRS）研究

多年来,研究心肌的代谢、心肌的机械功能以及他们之间的相互关系是心血管生理、病理学家以及临床工作者最感兴趣的课题。在早期许多研究工作在离体条件下通过分析心脏灌流液;通过研究各种外界刺激后心肌细胞线粒体的提取物以及通过各种物理或化学因素作用后心肌组织学的变化进行的。由于受技术条件的限制对整体的研究是非常困难的。但是随着核     

用小型猪研究心肌缺血再灌注损伤的机制

应用小型猪在体心脏缺血再灌注(IR)模型,探讨心肌IR损伤机制。发现心肌IR后有下列变化:①心肌细胞内钙、钠增多,钾减少。②心肌细胞膜流动性降低及冠状窦静脉血化学发光增强,间接显示自由基产生增多。③白细胞激活后产生氧自由基的反应增强,提示白细胞可能参与IR损伤机制。     

绿茶提取物清除单线态氧的作用及抗脂质过氧化效应

光敏化剂玫瑰红光照后产生单线态氧(~1O_2),以N,N-二甲基-4-亚硝基苯胺(DM-NA)被漂白作用测定~1O_2的产生及清除。绿茶提取物(GTE)可以清除光敏氧化反应系统产生的~1O_2,在起始阶段作用更显著,随GTE浓度增加清除作用加强。新配制的GTE溶液清除~1O_2的效果较陈旧溶液为佳。GTE可以防护单线态氧造成的红细胞膜及微粒体脂质过氧化作用,达到一定浓度时可以完全抑制丙二醛的产生。     

苯并[a]苗大鼠肝S_9代谢产物对人淋巴细胞SCE频率的影响

①苯并[a]芘经诱导的大鼠肝S_9代谢后,对淋巴细胞的SCE频率比未诱导及只注二甲基亚砜诱导者显著升高;②SCE频率升高与S_9中AHH活性有关但不完全一致,③各S_9对SCE 频率影响程度的剂量反应关系不同;④培养液中分别加100微升各S_9组分,大部分淋巴细胞生长被抑制,对照组则无显著影响。     

煤烟提取物致癌作用机制的研究

目的　从煤烟对细胞膜理化特性的影响 ,对DNA的损伤 ,诱导原癌基因表达方面研究其致癌作用机制。方法　利用 1,6 二苯基 1,3,5 己三烯 (DPH)和N 3芘 马来酰亚胺 (N 3P M)分别标记NIH3T3细胞膜脂和膜蛋白 ,不同剂量的煤烟作用后 ,通过其荧光偏振度的改变确定膜理化特性的变化 ;利用溴化乙锭 (EB)作荧光探针 ,通过DNA EB结合物荧光强度的变化确定基因组DNA损伤程度 ;利用地高辛标记的c myc癌基因作探针 ,运用斑点杂交的方法 ,检测c myc基因的表达情况。结果　不同剂量的煤烟作用后 ,能够引起膜脂流动性升高 ,膜蛋白运动度无显著变化 ,能够引起DNA的断裂损伤及c myc基因的高表达 ,且上述变化皆与剂量密切相关。结论　煤烟的诱变性与其对细胞膜、DNA及原癌基因的表达的影响密切相关。     

化疗对胰腺癌组织及细胞中BAG-3表达的影响

目的初步分析BAG- 3在胰腺癌抗凋亡及产生耐药特性中的作用。方法通过免疫组化方法检测术前化疗与未化疗患者手术切除的胰腺癌组织中BAG-3的表达水平；通过蛋白质印迹方法检测MIACaPa-2、PANC-1及SWl9903株细胞在化疗药物（5-FU50μg/ml、MMC0．5μg/ml及E-ADM1．5μg/ml）作用18h后BAG-3蛋白表达的差异。结果术前化疗患者的胰腺癌组织中BAG-3呈中强度阳性表达者的比率与术前未化疗患者相比有升高趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）。化疗药物处理后18h，3株胰腺癌细胞中BAG-3的表达水平与未经化疗药物处理的对照组相比明显升高（P〈0．05）。结论化疗可使胰腺癌细胞中BAG-3的表达升高，BAG-3的上调可能与胰腺癌对化疗产生耐药相关。     

H202 对大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞膜理化特性、脂质过氧化及基因组 DNA的影响

目的研究小剂量(100nmol/L)H2O2对大鼠肝卵圆细胞株WB-F344细胞膜理化特性、脂质过氧化及基因组DNA的影响.方法利用标记膜脂及膜蛋白质的荧光标记物1,6-二苯基-1,3,5-己三烯(DPH)和N-(3芘)马来酰亚胺[N-(3P)M]标记不同剂量H2O2作用及经H2O2多次作用后发生转化的WB细胞,通过测定其荧光偏振度确定膜理化特性的改变;以硫代巴比妥酸(TBA)法测定其脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量的变化;以及利用溴化乙锭(EB)作荧光探针,通过DNA-EB结合物荧光强度的变化确定其基因组DNA的损伤程度.结果小剂量(100 nmol/L)H2O2的一次作用可使膜蛋白运动度增加,膜脂流动性增大,MDA的含量增高;H2O2的多次作用使上述变化更为显著.大剂量(1 mmol/L)、中剂量(100μmol/L)的H2O2作用细胞后可直接损伤基因组DNA,小剂量H2O2的一次作用虽然不能直接损伤基因组DNA,但多次作用后却可使基因组DNA受损.结论 H2O2可诱使WB细胞膜理化特性发生改变,脂质过氧化产生及造成基因组DNA损伤,此可能与H2O2的致、促癌作用有关.