不同菌量感染大鼠尿路对尿道上皮组织CNF1、CD36蛋白表达水平的影响

目的探讨尿路致病性大肠埃希菌(UPEC)的量与尿路感染模型大鼠尿道上皮组织细胞毒性坏死因子(CNF)1蛋白及CD36蛋白表达水平的关系。方法将50只6~8周龄雌性SD大鼠作为研究对象,随机选取10只作为对照组,其余40只用于感染不同梯次的UPCE建立尿路感染模型,分别为10^1CFU组、10^2CFU组、10^3CFU组和10^4CFU组,每组10只。感染5 d后,定量大鼠尿道上皮组织与尿液菌量,qRT-PCR检测CNF1 mRNA和CD36 mRNA水平,Western印迹检测CNF1蛋白和CD36蛋白表达水平。结果各组尿道上皮组织和尿液菌量均有显著差异(P<0.05),在10^1CFU组、10^2CFU组、10^3CFU组和10^4CFU组中,尿道上皮组织和尿液菌量依次升高,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组、10^1CFU组、10^2CFU组、10^3CFU组和10^4CFU组中,CNF1和CNF1 mRNA表达水平依次升高,CD36和CD36 mRNA表达水平依次降低,两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。尿道上皮组织和尿液菌量与CNF1表达呈正相关(P<0.05),与CD36表达呈负相关(P<0.05)。结论感染大鼠尿路菌量越高,其尿道上皮组织菌量、尿液菌量和CNF1表达越高,CD36表达越低,尿道感染可能与高菌量影响CNF1和CD36表达相关。     

标本放置时间对白细胞介素-6水平稳定性的影响

目的探讨血清中白细胞介素(IL)-6随放置时间的延长的变化规律。方法选取急性白血病、原发性肝癌、冠心病患者血清标本30例,即刻分离血清后室温放置,在0、2、6、12、18h分别测定IL-6浓度,并与10例健康对照进行比较。结果各组IL-6初始水平分别为肝癌组(43.96±15.87)μg/L、冠心病组(42.17±10.34)μg/L、急性非淋巴细胞白血病组(94.43±20.32)μg/L、急性淋巴细胞白血病(64.53±6.06)μg/L与健康对照组(2.71±0.38)μg/L,差异均有统计学意义(P0.05);各组血清标本随放置时间的延长,其IL-6水平有一定的变化规律,0~2h内IL-6水平较稳定,差异无统计学意义(P0.05);6h及以后与各组IL-6初始水平比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论各组血液离心后室温放置2h内,IL-6水平稳定,而随放置时间的延长,IL-6水平变化大,故临床检测IL-6需在2h内完成,才能保证检测结果真实可靠。     

牡蛎过敏原Cra g 1的二级结构及其B细胞和T细胞表位分析

目的分析牡蛎过敏原Cra g 1的二级结构及其B、T细胞表位,为探索基于抗原表位的免疫治疗奠定基础。方法从Uniprot数据库中获得牡蛎过敏原Cra g 1的氨基酸序列,通过DNA Star Protean软件,采用Garnier-Robson方法和Chou-Fasman方法分析其二级结构;采用Kyte-Doolittle法、Karplus-Schulz法、Emini法、Jameson-Wolf法综合分析Cra g 1主要的B细胞抗原表位。使用SYFPEITHI和NetMHC-Ⅱ在线网站分析T细胞抗原表位。结果牡蛎过敏原Cra g 1的二级结构主要为α-螺旋,其B细胞表位接近覆盖Cra g 1氨基酸全序列;而T细胞优势表位位于第89～103、108～122、129～143位肽段。结论本研究分析牡蛎过敏原Cra g 1的B、T细胞优势表位,为日后Cra g 1的基础免疫学研究,如疫苗的研制、诊断试剂的制备和其抗原性改造等提供了理论依据。     

肝素结合蛋白与1，25－二羟维生素 D3在 COPD急性加重期患者血清中的表达及意义

目的：探讨肝素结合蛋白（HBP）与1,25－二羟维生素D3[1,25－（OH）2D3]在慢性阻塞性肺疾病（ COPD）急性加重期（ AECOPD）患者血清中的表达水平及临床意义。方法选择82例COPD患者,其中AECOPD 48例,COPD稳定期34例,使用酶联免疫吸附试验测定1,25－（OH）2D3、HBP,同时检测血清降钙素原（PCT）、超敏C反应蛋白（ hs－CRP）及白细胞计数（ WBC）等资料,并同步行肺功能及相关检查。结果 AECOPD患者HBP水平为（74.15±13.24）ng／mL,明显高于COPD稳定期患者的（51.57±10.22）ng／mL,其1,25－（OH）2D3水平为（14.85±5.32）ng／mL明显低于COPD稳定期患者的（19.46±6.52）ng／mL,差异均有统计学意义（P＜0.01）,血清PCT、hs－CRP及WBC在AECOPD患者中的水平均高于COPD稳定期患者,肺功能各项指标均明显低于COPD稳定期患者,患者血清1,25－（OH）2D3与肺功能指标呈正相关,HBP水平与肺功能指标呈负相关。结论血清1,25－（ OH）2 D3、HBP可作为AECOPD的辅助诊断指标,并提示血清1,25－（ OH）2 D3、HBP在COPD气道炎症及重塑中可能具有重要作用。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期HBP与CD64的表达及意义

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者中性粒细胞CD64与肝素结合蛋白(HBP)的表达及意义。方法收集2013年7月至2014年11月该院慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者200例作为研究对象,其中COPD稳定期100例,AECOPD 100例。使用流式细胞术及免疫荧光法测定CD64,酶联免疫吸附试验测定HBP,同时检测血清降钙素原(PCT)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)及白细胞计数(WBC),评价HBP与CD64对AECOPD的诊断价值。AECOPD患者同时送检痰液进行细菌培养,送检鼻拭子进行PCR呼吸道病毒检测明确病因,比较不同病原体所致AECOPD的HBP与CD64的水平差异。结果 AECOPD患者HBP与CD64水平分别为(86.84±38.91)ng/mL、(6.85±2.82)MFI,明显高于COPD稳定期患者的(56.24±24.58)ng/mL、(3.32±1.09)MFI,差异均有统计学意义(P0.01)。细菌感染与混合感染AECOPD患者HBP与CD64水平均明显高于病毒感染及非感染的AECOPD患者,差异均有统计学意义(P0.01)。HBP与CD64对细菌感染AECOPD的敏感性均在85%以上,特异性在90%以上,明显高于混合感染及病毒感染AECOPD。结论 HBP与CD64可作为AECOPD的辅助诊断指标。     

慢阻肺急性加重期感染病原菌分布与机体免疫功能检测及其临床意义北大核心CSCD

目的探讨慢阻肺急性加重期(AECOPD)患者感染病原菌分布及机体免疫功能变化,并分析其相关危险因素。方法 2016年9月-2017年11月在本院呼吸内科住院的AECOPD患者100例,于入院第2、3、4 d留痰标本行病原学检查;采集患者外周静脉血,采用流式细胞术检测树突状细胞亚群水平;采用罗氏Cobas c 501生化分析仪测定免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白A(IgA);使用肺功能仪检查患者的肺功能;采用多因素Logistic回归分析法分析AECOPD发生危险因素。实验设同期体检的健康者100例作对照。结果 100例AECOPD患者痰培养细菌阳性68例,阳性率68.00%。共分离出细菌68株,其中革兰阴性菌43株(占63.24%),革兰阳性菌25株(占36.76%)。与对照组比较,AECOPD中的GOLDⅠ、Ⅱ、Ⅲ-Ⅳ组患者血FEV1百分比、FEV1/FVC比值及IgM、IgA、IgG水平均显著降低(均P<0.05),mDCs和pDCs百分比及mDCs/pDCs比值均显著升高(均P<0.05)。且随着病情的加重,FEV1百分比、FEV1/FVC比值及IgM、IgA、IgG水平持续下降(均P<0.05),mDCs和pDCs百分比及mDCs/pDCs比值持续升高(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,年龄、有慢性疾病史、导管留置和住院时间长均是慢阻肺患者细菌感染的独立危险因素。结论 AECOPD患者肺功能、免疫功能均与病情的严重程度相关,年龄、合并慢性疾病、住院时间及导管留置等为AECOPD发生的危险因素,可为临床诊断及治疗提供参考。     

冠心病患者CRP、SAA、PCT、IL-6水平与冠状动脉粥样硬化的相关性研究

目的观察冠心病患者冠状动脉粥样硬化发生情况,分析血清C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、降钙素原(PCT)、白细胞介素-6(IL-6)水平与冠状动脉粥样硬化的相关性。方法选择该院2017年3月至2019年3月收治的60例冠心病患者作为研究组,参照Gensini积分评分标准评估冠心病患者冠状动脉粥样硬化程度,根据Gensini积分将研究组患者分为轻度硬化组、中度硬化组及重度硬化组。另选择同期于该院接受健康体检的30例健康者作为健康对照组。检测全部研究对象血清CRP、SAA、PCT、IL-6水平,分析冠心病患者血清生化指标水平与冠状动脉粥样硬化的相关性。结果60例冠心病患者均存在不同程度的冠状动脉粥样硬化,轻度硬化、中度硬化、重度硬化患者分别为21、19、20例。重度硬化组血清CRP、SAA、PCT、IL-6水平高于中度硬化组、轻度硬化组、健康对照组(P<0.05),中度硬化组以上指标水平高于轻度硬化组、健康对照组(P<0.05),轻度硬化组以上指标水平高于健康对照组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,冠心病患者Gensini积分与血清CRP、SAA、PCT、IL-6水平呈正相关(r=0.905、0.857、0.828、0.827,P<0.05)。结论冠心病患者血清CRP、SAA、PCT、IL-6水平随着冠状动脉粥样硬化程度的加重而升高,以上指标可能参与了冠心病患者冠状动脉粥样硬化的发生、发展,可考虑将其用于冠心病患者早期冠状动脉粥样硬化的评估,指导疾病的早期防控与治疗。     

苦参碱逆转外排泵系统AcrAB-ToIC介导的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对替加环素的耐药性

目的 评估苦参碱对由外排泵AcrAB-TolC介导的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌对替加环素耐药的影响并探究其逆转耐药性的相关调控机制。方法 使用棋盘稀释法，分别设置阴性对照组、阳性对照组、替加环素组、苦参碱组、联合用药组；培养24 h后，酶标仪测定吸光度，记录各药物组的最低抑菌浓度(MIC)、计算抑菌率和部分抑菌浓度指数(FIC);取各药物组MIC对应孔和阳性对照孔，使用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测AcrAB-TolC外排泵系统调控基因AcrB、MarA、RamA、AcrR的表达情况。结果 与单用替加环素或苦参碱相比较，替加环素与苦参碱联合应用能更明显的抑制外排泵系统AcrAB-TolC介导的替加环素耐药的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的生长(P<0.05),替加环素与苦参碱的药理主要表现为协同或相加作用；联合用药下，替加环素与苦参碱的MIC值均明显降低，替加环素的MIC均能恢复至替加环素敏感MIC值；苦参碱单独或联合作用后，AcrAB-TolC外排泵RamA、AcrB表达明显降低(P<0.05),AcrR基因表达明显升高(P<0.05)。结论 苦参碱能下调耐碳...