蛇床子素可促进体外培养神经干细胞的增殖

背景：神经干细胞具有自我更新和多向分化潜能,但正常情况下,神经干细胞数目太少,且大部分处于静息状态,促进其增殖是神经干细胞治疗神经退行性疾病的关键。目的：观察蛇床子素对体外培养的神经干细胞增殖作用的影响,分析其促进增殖能力的作用机制。方法：体外培养神经干细胞,在增殖培养基中培养至第3代,加入不同浓度的蛇床子素（10,50和100μmol/L）作用24 h用CCK-8法检测细胞活力,再培养3,5,7 d后测量神经球半径,用免疫荧光组化法计数Ki67阳性细胞数目;再培养3 d后利用RT-PCR技术检测神经干细胞中Notch 1、Hes 1和Mash 1基因表达的情况。结果与结论：与正常组比较,50,100μmol/L的蛇床子素具有明显促进神经干细胞增殖能力的作用,100μmol/L作用最为显著,可引起Notch 1基因、Hes 1基因上调表达,对Mash 1基因基本无影响,说明蛇床子素对体外培养的神经干细胞具有促进增殖作用,其作用机制可能与激活Notch信号通路上的Notch 1、Hes 1基因有关。     

蛇床子素可促进体外培养神经干细胞的增殖

背景：神经干细胞具有自我更新和多向分化潜能,但正常情况下,神经干细胞数目太少,且大部分处于静息状态,促进其增殖是神经干细胞治疗神经退行性疾病的关键。 目的：观察蛇床子素对体外培养的神经干细胞增殖作用的影响,分析其促进增殖能力的作用机制。 方法：体外培养神经干细胞,在增殖培养基中培养至第3代,加入不同浓度的蛇床子素 (10,50和100 μmol/L)作用24 h用CCK-8法检测细胞活力,再培养3,5,7 d后测量神经球半径,用免疫荧光组化法计数Ki67阳性细胞数目;再培养3 d后利用RT-PCR技术检测神经干细胞中Notch 1、Hes 1和 Mash 1基因表达的情况。 结果与结论：与正常组比较,50,100 μmol/L的蛇床子素具有明显促进神经干细胞增殖能力的作用,100 μmol/L作用最为显著,可引起Notch 1基因、Hes 1基因上调表达,对Mash 1基因基本无影响,说明蛇床子素对体外培养的神经干细胞具有促进增殖作用,其作用机制可能与激活Notch信号通路上的Notch 1、Hes 1基因有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

蛇床子素对机械性脑损伤小鼠的治疗作用研究

目的:研究蛇床子素对机械性脑损伤模型小鼠的治疗作用。方法:利用针刺法在小鼠大脑人字缝前2 mm、中线左侧2 mm建立小鼠机械性脑损伤模型。小鼠随机分为假手术组、模型组和蛇床子素10,20和30 mg·kg-1治疗组。用HE染色法观察各组在7 d之后的大脑皮层结构;酶联免疫检测试剂盒(ELISA)法检测损伤部位的IL-6和TNF-α炎症因子表达情况;免疫组织化学染色法检测大脑皮层及海马区神经元的数量;利用免疫荧光染色法检测凋亡的神经元数量。结果:10,20和30 mg·kg-1蛇床子素治疗组均能够改善损伤的大脑皮层结构;对IL-6和TNF-α炎症因子的表达有明显的抑制作用;显著增加大脑皮层及海马区神经元的数量;明显减少神经元的凋亡。结论:蛇床子素对机械性脑损伤的小鼠具有一定的治疗作用,可能是通过抑制炎症因子的表达和减少神经元的凋亡等。     

人参总蛋白的酶解及氨基酸含量测定

目的:比较人参蛋白酶解前后成分的变化,以探讨人参蛋白在体内发挥作用的最终活性物质。方法:采用胃蛋白、胰蛋白酶及双酶(胃蛋白酶与胰蛋白酶联合)水解人参蛋白,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)检测蛋白及多肽含量,采用高效液相色谱(HPLC)分析氨基酸组成。结果:SDS-PAGE检测结果显示,人参蛋白经胃蛋白酶水解后,仅出现分子量5000左右的高浓度、低分子量蛋白条带;经胰蛋白酶水解后,出现多条蛋白带,但浓度较水解前低;经双酶水解后,蛋白条带显示与胃蛋白酶接近。HPLC检测结果显示,人参蛋白经胃蛋白酶、胰蛋白酶及双酶水解后,氨基酸种类变化不大,含量明显减少。结论:人参蛋白酶解后转变为多肽及少量氨基酸。     

蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y细胞的保护作用

目的:研究蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y细胞的作用,以探讨其可能的作用机制。方法:体外培养SH-SY5Y细胞,并转染APP595/596基因,体外构建研究Aβ致病作用的细胞模型。采用CCK-8法检测细胞存活率;检测LDH评价细胞的损伤程度;流式细胞术检测细胞凋亡;用RT-PCR和Western blot法检测β-分泌酶(又称β位点APP裂解酶1,β-site APP cleaving enzyme 1,BACE 1)的mRNA及蛋白的表达;采用免疫荧光细胞化学和Western blot法检测Aβ的表达。结果:蛇床子素对转染APP595/596基因的SH-SY5Y神经细胞有保护作用,可增加细胞的存活率,降低LDH的释放,抑制细胞的凋亡,减少BACE1的mRNA与蛋白的表达,抑制Aβ的生成。结论:蛇床子素可保护转染APP595/596基因的SH-SY5Y神经细胞,其保护机制可能与减少BACE l的mRNA与蛋白表达有关。     

蛇床子素对颅脑损伤模型小鼠的神经保护作用

目的:研究蛇床子素对颅脑损伤模型小鼠的神经保护作用。方法:开颅钻孔以复制小鼠颅脑损伤模型。实验分为假手术(等容蒸馏水)组、模型(等容蒸馏水)组和蛇床子素高、中、低剂量(30、20、10 mg/kg)组,复制模型成功1 h后ip给药,每天1次,连续14 d。在复制模型12 h与3、7、14、21 d后对小鼠进行神经功能缺损评分;在复制模型7、14 d后进行HE染色,显微镜下观察脑组织损伤面积;在复制模型24、72 h后测定小鼠脑组织中髓过氧化物酶(MPO)活性;在复制模型7 d后,采用免疫组化法测定小鼠脑组织匀浆中脑源神经生长因子(BDNF)、神经营养因子(NT)3的表达。结果:复制模型成功3、14、21 d后,蛇床子素高、中剂量组小鼠神经功能缺损评分降低;复制模型成功7 d后,蛇床子素高剂量组小鼠神经功能缺损评分降低。复制模型成功7 d后,蛇床子素高剂量组小鼠脑组织损伤面积减小;复制模型成功14 d后,蛇床子素高、中剂量组小鼠脑组织损伤面积减小。复制模型成功24、72 h后,蛇床子素高剂量组小鼠脑组织中MPO活性减弱。复制模型成功7 d后,蛇床子素高、中剂量组小鼠脑组织中BDNF、NT-3表达增强。以上差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:蛇床子素对颅脑损伤模型小鼠神经具有一定保护作用,其机制为改善小鼠神经功能、促进伤口愈合,抑制炎症因子的产生及促进神经营养因子表达。