蛇床子素对机械性脑损伤小鼠的抗炎抗凋亡作用研究

目的研究蛇床子素(osthole,Ost)对小鼠机械性脑损伤后细胞凋亡及炎症细胞浸润的影响。方法建立针刺伤小鼠机械性脑损伤模型,随机分为假手术组、模型组、蛇床子素10、20、30 mg·kg-1治疗组。主要检测各组小鼠脑组织含水量;RT-PCR法检测皮层损伤灶凋亡因子Bax,Bcl-2,活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3(Caspase-3)mRNA的表达变化;免疫组织化学染色法检测损伤灶周围中性粒细胞(MPO)及小胶质细胞(Iba-1)浸润情况以及Caspase-3阳性细胞表达情况。结果蛇床子素20,30 mg·kg-1治疗组能够明显降低脑组织含水量;提高Bax/Bcl-2比值,降低凋亡因子Caspase-3 mRNA表达;蛇床子素30 mg·kg-1治疗组能够明显减少大脑皮层损伤灶周围中性粒细胞及小胶质细胞的浸润,并且明显减少凋亡细胞数量。结论蛇床子素对开放性脑损伤的小鼠具有一定的治疗作用,可能是通过减少炎症细胞浸润,并且减少细胞凋亡发挥治疗作用。     

蛇床子素对AD大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨蛇床子素对AD大鼠海马神经元凋亡的影响.方法 采用侧脑室注射Aβ25-35制作AD大鼠模型,并以不同剂量的蛇床子素进行干预,应用HE染色、TUNEL法染色和免疫组化法染色,观察蛇床子素对AD模型大鼠海马神经元凋亡、凋亡相关蛋白表达的影响.结果 对照组极少见凋亡细胞,Bcl-2和Bax蛋白表达极少;模型组视野内凋亡细胞与对照组比较明显增多,Bcl-2和Bax蛋白表达增多,且Bax蛋白表达升高幅度更大;与模型组相比,蛇床子素组凋亡细胞数减少,Bcl-2蛋白表达增多,Bax蛋白表达减少,Bcl-2/Bax比值升高.结论 蛇床子素调节AD大鼠海马凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达,升高Bcl-2/Bax比值,具有抗凋亡、保护海马神经元的作用,这可能是其改善学习记忆障碍作用的机制之一.     

蛇床子素减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退

目的观察蛇床子素对脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退的作用,并初探其可能的作用机制。方法 40只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组及蛇床子素组。阳性药组、蛇床子素组分别每日1次灌胃布洛芬、蛇床子素40 mg.kg-1,连续12 d,假手术组、模型组灌胃等体积的生理盐水,3 d后侧脑室注射脂多糖诱导大鼠的神经炎症模型,制模后d 5开始Morris水迷宫检测大鼠的空间记忆能力,连续5 d。Morris水迷宫检测结束后,处死大鼠,HE染色观察大鼠海马神经元损伤情况,real time RT-PCR法测定海马肿瘤坏死因子α(Tnf-α)、白细胞介素-1β(Il-1β)、诱导型一氧化氮合酶(Nos2)及环氧合酶-2(Cox-2)的mRNA表达。结果侧脑室注射脂多糖后,大鼠在定向航行实验中的逃避潜伏期显著增加(P<0.05),空间探索实验中的校正逃避潜伏期缩短(P<0.05),海马神经元明显受损,且海马Tnf-α、Il-1β、Nos2及Cox-2的mRNA表达增加(P<0.05);然而,蛇床子素及布洛芬明显缩短了大鼠的定向航行实验中的逃避潜伏期(P<0.05),延长了空间探索实验中的校正逃避潜伏期(P<0.05),减轻了海马神经元损伤,且降低海马Tnf-α、Il-1β、Nos2及Cox-2的mRNA表达。结论蛇床子素可减轻脂多糖诱导的大鼠学习记忆减退及海马神经元损伤,其机制与抑制炎症相关基因的mRNA表达有关。     

右美托咪定对减轻 APP/PS1小鼠海马区炎性因子分泌及细胞凋亡的作用

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对APP/PS1转基因小鼠海马区抗炎抗凋亡的作用,并探讨其可能的机制.方法 2018年3月至2019年3月,将APP/PS1小鼠采用随机数字表法分为模型组(TG)、DEX低、高剂量组(TG+10、20μg/kg DEX,每天腹腔注射1次,连续4周)和4-苯基丁酸(PBA)阳性对照组(TG+400 mg/kg PBA,每天腹腔注射1次,连续4周),另取野生型C57BL/6小鼠作为对照组(WT);水迷宫检测各组小鼠的学习与记忆能力;Nissl染色各组小鼠海马区神经细胞的数量;TUNEL检测各组小鼠海马区凋亡细胞数;ELISA检测各组小鼠海马区白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白的表达;WB法检测海马区B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase-3)的表达;WB法检测小鼠海马区内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和内质网应激蛋白(CHOP)的表达.结果 与TG组比较,PBA和DEX明显提高APP/PS1小鼠的学习与记忆能力;增强海马区神经元的数量并减少神经细胞的凋亡;显著降低IL-1β、IL-6及TNF-α蛋白的浓度;抑制Bax/Bcl-2和裂解的caspase-3的表达;降低GRP78和CHOP的蛋白表达.结论 DEX对APP/PS1小鼠海马区炎症因子分泌以及细胞凋亡有一定的减轻作用,可能是通过抑制海马区内质网应激来发挥治疗作用.     

橙皮苷对高脂高糖诱导胰岛 β 细胞损伤的保护作用

目的探讨橙皮苷(hesperidin,HSD)对于高脂高糖诱导小鼠胰岛β细胞损伤的保护作用及机制。方法HSD预处理后,高脂高糖处理MIN6细胞。CCK-8法、Hoechst 33258荧光染色法检测MIN6细胞增殖与凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2的表达;RT-PCR检测炎症因子TNF-α、IL-1β的表达;ELISA检测小鼠胰岛的胰岛素分泌功能。结果高脂高糖培养抑制MIN6细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低Bcl-2/Bax比值,增加炎症因子TNF-α、IL-1β的表达并且抑制了小鼠胰岛的胰岛素分泌;当HSD预处理后,MIN6细胞活力增加,Bcl-2/Bax比值增加,炎症因子TNF-α、IL-1β的表达有不同程度的降低,小鼠胰岛的胰岛素分泌增加。结论HSD减少了高脂高糖诱导的小鼠胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡和炎症因子分泌,改善小鼠胰岛素分泌。     

天麻多糖对脂多糖诱导抑郁小鼠的作用及机制研究

摘要：目的:探究天麻多糖（GEPs）对脂多糖（LPS）诱导抑郁小鼠的作用及机制。方法:将56只C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、GEPs低、中、高剂量组(50, 100, 200 mg·kg-1)、氟西汀对照组(2.6 mg·kg-1)及圣·约翰草对照组(145.6 mg·kg-1),每组8只。各组预给药2周,第15天除正常对照组腹腔注射生理盐水外,其余各组腹腔注射LPS(1 mg·kg-1)建立抑郁模型。24 h后采用行为学实验评价GEPs对LPS诱导抑郁小鼠的改善作用,尼氏染色观察海马CA3区神经元变化,RT-PCR检测海马中细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β） mRNA水平。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠水平运动得分降低（P<0.01）,游泳不动时间增加（P<0.05）,海马中TNF-α和IL-1βmRNA水平升高（P<0.01）,海马CA3区尼氏体变小且数量减少,染色变浅。与模型组比较,GEPs低、中剂量组、氟西汀组以及圣·约翰草组水平运动得分增加（P<0.05或P<0.01）;GEPs 3个剂量组、氟西汀组以及圣·约翰草组游泳不动时间缩短（P<0.05或P<0.01）;GEPs 3个剂量组、圣·约翰草组TNF-α和IL-1βmRNA水平下降（P<0.01）;各给药组尼氏体数量均有所增加,体积变大,染色变深。结论:GEPs可以改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为,其潜在作用机制可能与降低海马中细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达、改善海马神经元功能有关。     

蛇床子素通过Wnt/β-catenin信号通路促进转染APP基因的神经干细胞分化为更多神经元且减少神经元凋亡

目的通过转染APP基因于神经干细胞,研究蛇床子素对其增殖和分化能力的影响,及对神经元凋亡的影响,并研究其机制。方法体外建立阿尔茨海默病的神经干细胞模型,利用免疫组化染色法,研究蛇床子素对转染APP基因的神经干细胞增殖和分化能力的影响;通过CCK-8法检测神经干细胞存活率;Hoechst 33258法检测神经元凋亡情况;RT-PCR法检测GSK-3β和β-catenin mRNA的表达变化情况;Western blot法检测GSK-3β和β-catenin蛋白的表达变化情况。结果与APP组相比,蛇床子素组的神经干细胞增殖能力提高了10.24%;分化为神经元的能力提高了6.74%。与APP组相比,蛇床子素组神经干细胞的存活率明显提高;神经元凋亡明显减少;RT-PCR和Western blot结果显示,蛇床子素可抑制GSK-3β基因和蛋白的表达,促进β-catenin基因和蛋白的表达。结论蛇床子素可促进转染APP基因的神经干细胞的增殖,可促进其分化为更多的神经元,并减少神经元凋亡,可能与通过激活Wnt/β-catenin信号通路有关系。     

亚甲蓝对机械性脑损伤小鼠的神经保护作用及其机制研究

目的 探讨亚甲蓝对小鼠机械性脑损伤的影响及其作用机制.方法 将50只SPF级C56BL/6雄性小鼠,体质量范围为20～25 g,采用随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=10)、机械性脑损伤组(SWI组,n=10)、亚甲蓝组(MB组,n=10)、核转录因子κB(NF-κB)抑制剂组(PDTC组,n=10)、亚甲蓝联合NF-κB抑制剂组(MB+PDTC组,n=10).利用针刺伤建立小鼠机械性脑损伤模型,MB组腹腔注射亚甲蓝1 mg/kg治疗.时间损伤严重程度(NSS)评分评价小鼠神经功能变化;原位末端转移酶标记(TUNEL)检测脑内神经细胞凋亡情况;苏木精-伊红(HE)染色观察病理损伤情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠脑组织中白细胞介素(IL)-1β,IL-6,肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测小鼠脑组织中小胶质细胞(Iba-1)、星形胶质细胞(GFAP)表达;Western blotting检测各组大鼠脑内NF-κB p65,Iκ-α及p-IκB-α蛋白表达水平.结果 与SWI组相比,MB组小鼠神经功能明显改善;MB能够明显减少神经细胞凋亡;MB能减轻病理损伤;MB组脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α水平均降低;小鼠脑组织Iba-1、GFAP蛋白明显减少;同时,NF-κB p65、p-IκB-α蛋白表达降低,IκB-α蛋白表达升高;但是给予NF-κB抑制剂后,MB的治疗作用被抑制.结论 亚甲蓝能有效改善针刺伤导致的神经功能障碍,抑制神经细胞凋亡及神经炎症,其作用机制可能与抑制NF-κB信号通路有关.     

山茱萸环烯醚萜苷对创伤性脑损伤模型大鼠脑内炎症反应的影响

目的：观察创伤性脑损伤模型大鼠在山菜萸环烯醚萜苷（cornus iridoid glycosides,CIG）治疗后脑组织中炎症反应尤其是炎性细胞因子的变化,以探讨CIG的脑保护作用及其机制。方法：SD大鼠灌胃给予不同剂量的CIG（30、60、120mg·kg^-1·d^-1）,连续7d;用自由落体打击（Feeney法）造成大鼠创伤性脑损伤模型,继续给药,分别于伤后24、72h取脑;用HE染色法观察大脑皮层的形态学变化,用免疫组织化学法检测炎性细胞因子TNF—α、IL-1β的表达,并对其免疫反应阳性细胞的数量和面积进行图像分析和统计学分析。结果：HE染色显示模型组大脑皮层病理形态改变严重,CIG治疗组的病理改变与模型组相比明显减轻。免疫组织化学法发现,TNF-α、IL-1β阳性细胞主要分布在挫伤灶的周围,模型组TNF-α、IL-1β表达水平明显高于假手术组,伤后24、72h都持续高表达。CIG治疗组TNF-α、IL-1β表达水平比模型组明显降低,且有一定的剂量依赖性,尤其以伤后72hCIG的抑制作用更加显著。结论：CIG可能通过抑制炎性细胞因子的表达,减轻炎症反应,从而发挥对创伤性脑损伤后的脑保护作用。     

益智仁挥发油抗帕金森模型小鼠黑质神经元凋亡的作用研究

目的:研究益智仁挥发油对帕金森(PD)模型小鼠黑质致密部尼氏小体、酪氨酸羟化酶(TH)表达的影响和神经元凋亡的对抗作用。方法:实验分为6组,即正常对照(等容生理盐水)、模型(等容生理盐水,ig生理盐水第6天起同时复制模型,连续7d,每天1次)、司来吉兰(10mg·kg-1,ig司来吉兰第4天起同时复制模型,连续7d,每天1次)和益智仁挥发油高、中、低剂量(2.5、0.833、0.278mL·kg-1,ig益智仁挥发油第6天起同时复制模型,连续7d,每天1次)组。ip1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)复制C57BL小鼠PD模型。采用尼氏染色法观察尼氏小体表达;SABC免疫组化染色法观察益智仁挥发油对TH表达的影响;TUNEL染色法检测黑质神经元凋亡。结果:与正常对照组比较,模型组小鼠黑质神经元的尼氏小体、TH表达阳性细胞数明显减少,神经元凋亡显著增加;与模型组比较,益智仁挥发油高、中剂量组小鼠黑质神经元内尼氏小体显著增多;益知仁挥发油高、中、低剂量组TH表达阳性细胞数显著增多,而凋亡细胞数量显著减少。结论:益智仁挥发油能对抗PD模型小鼠黑质神经元细胞凋亡。     

阿魏酸对痴呆小鼠脑内胶质细胞活化与炎性细胞因子表达的影响

目的:探究阿魏酸(FA)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠脑内炎症与胶质细胞活化及细胞因子表达的影响,揭示阿魏酸对小鼠大脑的保护作用及其机制。方法:将50只昆明种小鼠随机分为假手术组、AD模型组、FA低、中和高3个剂量组。采用脑定位向小鼠右侧海马CA1区注射1μL Aβ1-40建立AD模型,造模成功后第3天开始给药,阿魏酸低、中、高剂量组分别按20.0、40.0、80.0mg·kg-1剂量灌胃,假手术与模型组灌胃等体积生理盐水,用药时间为30 d。实验结束后,处死动物,剖取各组小鼠大脑,采用免疫荧光方法观察大脑皮层区GFAP的表达,用ELISA法测定脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量。结果:与假手术组相比,AD模型组小鼠大脑皮层区GFAP阳性细胞表达明显增多(P<0.01),且大脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量显著升高(P<0.01、P<0.01、P<0.01);与模型组相比,阿魏酸3个剂量组小鼠皮层区域GFAP阳性细胞表达均明显减少(P<0.01),且大脑组织中IL-1β、IL-6和TNF-α含量也相应地减少(P<0.01、P<0.01、P<0.01)。结论:阿魏酸可能是通过抑制Aβ1-40对神经细胞的毒性和诱导小胶质细胞活化,使得胶质细胞合成的炎性细胞因子含量减少,进而减轻痴呆大脑组织中炎症的形成,从而达到治疗或改善AD患者的临床症状的目的。     

氯胺酮减轻小鼠脑缺血再灌注损伤的炎性反应与NF-κB信号通路相关性研究

摘要：目的:探讨氯胺酮减轻小鼠脑缺血再灌注损伤的炎性反应与核转录因子κB（NF-κB）信号通路相关性。方法:将75只昆明小鼠随机分为5组:假手术（Sham）组、脑缺血再灌注损伤（I/R）组、氯胺酮低(50 mg·kg-1ketamine-L)、高(100 mg·kg-1,ketamine-H)剂量组和尼莫地平(15 mg·kg-1,nimodipine)组,每组15只。除Sham组外,其余各组小鼠建立脑缺血再灌注模型。术后第3天,ketamine-L、ketamine-H和nimodipine组小鼠分别按相应剂量连续腹腔注射给药14 d,1次/d,Sham组和I/R组给予等体积生理盐水。各组小鼠在第1,7,14天进行神经功能缺失体征评分;水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力; TTC染色法测定各组小鼠脑梗死体积;苏木精-伊红染色（HE）染色观察各组小鼠脑组织病理变化;酶联免疫法检测各组小鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-10（IL-10）的含量;蛋白质印迹法（Western Blot）检测各组小鼠脑组织中NF-κB p65的表达;免疫组化法测定各组小鼠脑组织中NF-κB p65阳性细胞的表达情况。结果:与I/R组比较,ketamine-L组、ketamine-H组和nimodipine组小鼠各时间点的Longa评分显著降低（P<0.05或P<0.01）;学习时间和记忆时间显著缩短（P<0.05或P<0.01）;脑梗死体积显著减小（P<0.01）;血清中TNF-α、IL-6含量显著降低,IL-10的含量显著增加（P<0.05或P<0.01）; NF-κB p65蛋白表达明显降低（P<0.05或P<0.01）; ketamine-H组和nimodipine组小鼠脑组织中NF-κB p65阳性细胞表达明显降低（P<0.05或P<0.01）。nimodipine组、ketamine-H组与ketamine-L组相比,以上各指标差异均有统计学意义（P<0.05）。Sham组小鼠海马区神经元细胞排列整齐,细胞结构完整,层次分明,无细胞核固缩现象; I/R组小鼠海马区神经元细胞排列紊乱,细胞体积明显缩小,大量细胞有核固缩现象,且胞浆减少; ketamine-L组、ketamine-H组和nimodipine组小鼠海马区神经元细胞排列较规则,细胞损伤程度较轻,部分细胞有体积缩小、细胞核固缩等现象。结论:氯胺酮通过影响NF-κB信号通路、降低TNF-α、IL-6及升高IL-10的含量来实现内源性保护作用,这可能与减轻炎症反应有关。     

芹黄素纳米脂质体改善血管性痴呆小鼠学习记忆功能的实验研究

摘要：目的:研究芹黄素纳米脂质体对于血管性痴呆小鼠学习及记忆功能的影响及其作用机制。方法:薄膜蒸发结合超声分散法制备芹黄素纳米脂质体并对其进行质量性状表征。采用夹闭双侧颈总动脉建立小鼠Va D模型,60只实验小鼠随机分为4组:假手术组、模型组、芹黄素溶液组(50μg·kg-1)及芹黄素纳米脂质体组(50μg·kg-1),每组15只,分别尾静脉给予相应形式的药物干预,连续给药4周,每周3次。采用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习及记忆能力,HE染色考察海马组织神经元形态,Western Blot及ELISA分别检测小鼠脑组织Aβ蛋白表达及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）含量考察芹黄素对于Va D学习记忆影响的作用机制。结果:制备的载药纳米脂质体形态圆整,分散均匀,稳定性好,粒径为（95.7±1.3） nm,包封率高达（85.73±2.31）%。与假手术组相比,模型组小鼠第4和第5天的平均逃避潜伏期、小鼠海马组织TNF-α及IL-1β含量、Aβ表达显著升高,平台穿越次数及停留时间显著降低（P<0.05）;与模型组相比,芹黄素溶液组和芹黄素纳米脂质体组小鼠第4和第5天的平均逃避潜伏期、小鼠海马组织TNF-α及IL-1β含量、Aβ表达显著降低,平台穿越次数及停留时间显著升高（P<0.05）;且芹黄素溶液组和芹黄素纳米脂质体组间差异有统计学意义（P<0.05）。模型组小鼠海马组织出现明显的神经元固缩、排列不规则,而芹黄素纳米脂质体组小鼠海马组织神经元细胞排列整齐,形态及大小均匀,接近假手术组水平。结论:应用载药纳米脂质体包载芹黄素能够增加药物透过血脑屏障的效率,从而使芹黄素能够通过减少脑内Aβ蛋白蓄积,抑制脑内的炎症反应,发挥神经元保护作用,改善血管性痴呆小鼠模型学习及认知功能。     

紫草素调节HIF-1α/NLRP3信号通路对蛛网膜下腔出血大鼠神经功能损伤的影响

目的 探究紫草素调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路对蛛网膜下腔出血(SAH)大鼠神经功能损伤的影响。方法 大鼠随机分为假手术组、模型组、YC-1(HIF-1α抑制剂,5 mg/kg)组、紫草素低剂量组(4 mg/kg)、紫草素高剂量组(25 mg/kg)、紫草素高剂量(25 mg/kg)+AG1(HIF-1α激活剂,10 mg/kg)组,每组15只。采用颈内动脉刺破法制备SAH模型。采用Zea-Longa评分法评估6组大鼠神经功能;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和IL-1β水平;HE染色观察大鼠海马组织形态学变化,TUNEL染色法检测海马神经元凋亡率;伊文思蓝染色检测血脑屏障通透性;商品化试剂盒检测大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(MDA)、丙二醛(CAT)水平,Western blot检测大鼠脑组织Bax、Bcl-2、HIF-1α、NLRP3蛋白表达。结果 假手术组大鼠海马神经元形态结构正常;与假手术组相比,模型组大鼠海马神经元有大量水肿、结构模糊,有细胞核溶解,变型...     

藏红花素预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤保护作用及机制研究

目的 研究藏红花素预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 采用四动脉阻断法复制全脑缺血再灌注大鼠模型;藏红花素低、中、高剂量组分别于术前7 d开始1次/d ip给予10、20、40 mg/kg藏红花素,另设假手术组、模型组和尼莫地平（阳性药,1 mg/kg）组。测定脑电图恢复时间和翻正反射恢复时间;术后24 h评卒中指数和神经功能缺失评分;干湿比重法测定脑组织含水量;伊文氏蓝法检测血脑屏障（BBB）通透性;HE染色法行大脑皮层神经元病理学检查并进行病变分级;末端标记法（TUNEL）观察皮层神经元凋亡状况并计算凋亡指数;生化分析法测定氧自由基（ROS）、丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性;酶联免疫吸附法（ELISA）测定白介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF-α）、IL-6、干扰素-γ（IFN-γ）水平。结果 与模型组比较,藏红花素中、高剂量或尼莫地平预处理均明显缩短全脑缺血性脑损伤大鼠脑电图恢复时间和翻正反射恢复时间,降低卒中指数和神经功能缺失评分,抑制脑组织含水量升高和伊文氏蓝渗入,抑制缺血大脑皮层神经元病理性形态结构改变和病变等级的升高,抑制缺血大脑皮层神经元凋亡、降低凋亡指数,抑制ROS、MDA含量升高和SOD、CAT活性降低,抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ含量升高,差异均具有统计学意义（P<0.05、0.01）。结论 藏红花素预处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤具有保护作用,机制可能与抑制氧化应激损伤和抑制炎症级联反应有关。     

竹节参总皂苷改善高脂饮食诱导的小鼠睾丸生殖功能障碍

目的探讨竹节参总皂苷(saponins of Panax Japonicus,SPJ)改善高脂饮食诱导的小鼠睾丸生殖功能障碍的作用及机制。方法采用血球计数板于光镜下进行精子计数,伊红Y染色法检测精子存活率;苏木精伊红(HE)染色法检测小鼠睾丸组织形态;TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡;Western blot法检测睾丸组织内p-NF-κB及其下游炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的蛋白表达水平;免疫荧光法检测睾丸巨噬细胞数量。结果 SPJ可减轻高脂饮食小鼠的体质量,提高睾丸和附睾的质量及其指数,提高精子存活率和精子数量,改善生精小管形态并减轻生精细胞的凋亡,明显下调p-NF-κB、TNF-α和IL-1β的蛋白表达水平,减少睾丸巨噬细胞的数量。结论 SPJ对高脂饮食小鼠睾丸生殖功能障碍有明显改善作用,其机制可能与减轻巨噬细胞浸润,抑制NF-κB通路介导的睾丸炎症有关。     

布托啡诺减轻老年大鼠胫骨骨折术后认知功能障碍的作用机制研究

摘要：目的:探讨布托啡诺通过调节大麻素2型受体（CB2R）表达,减轻大鼠胫骨骨折术后认知功能障碍的作用。方法:48只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、布托啡诺低(50μg·kg-1)、高(100μg·kg-1)剂量组,每组12只。模型组、布托啡诺低、高剂量组大鼠行开放性胫骨骨折手术;布托啡诺低、高剂量组大鼠于术后第1天开始尾静脉注射相应药物（注射体积1 ml/100 g）,正常对照组和模型组大鼠尾静脉注射等体积生理盐水,1次/d,连续给药2周,给药周期结束后检测逃避潜伏期、经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间,TUNEL染色观察大鼠海马组织形态学,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法测定海马组织CB2R mRNA和蛋白水平;酶联免疫吸附法测定海马组织白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平。结果:正常大鼠海马组织结构正常,神经元排列整齐;模型组大鼠海马组织神经元排列紊乱,可见明显凋亡细胞,炎症细胞浸润;布托啡诺干预后,海马结构趋于正常,神经元凋亡减少,炎症细胞浸润减少。与正常对照组比较,模型组、布托啡诺低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、海马组织CB2R mRNA和蛋白水平、IL-2、TNF-α水平升高,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间降低（P<0.05）;与模型组比较,布托啡诺低、高剂量组大鼠逃避潜伏期、海马组织CB2R mRNA和蛋白水平、IL-2、TNF-α水平降低,经过原平台位置的次数、原平台象限停留的时间升高,且两个剂量组间差异有统计学意义（P<0.05）。结论:布托啡诺可改善胫骨骨折术后认知功能障碍大鼠认知缺陷,其机制可能与布托啡诺降低大鼠海马组织CB2R mRNA和蛋白表达进而抑制CB2R通路的激活有关。     

芹菜素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后TLR4/NF-κB表达的影响及神经保护作用

目的探究芹菜素对局灶性缺血再灌注后脑组织Toll样受体4(TLR4)、核转录因子κB(NF-κB)的表达和神经细胞凋亡的影响及神经保护作用。方法采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(90 min)再灌注(24 h)模型。将70只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组和芹菜素(10、25 mg·kg-1)组。观察芹菜素对神经功能缺损评分及梗死体积的影响,HE染色检测脑组织形态学改变,采用免疫组化法检测缺血核心区皮质和海马CA1区TLR4、NF-κBp65的表达,透射电镜观察缺血核心区皮质和海马CA1区神经元超微结构改变,ELISA法检测血清中TNF-α、IL-6浓度,TUNEL染色检测细胞凋亡。结果与模型组比较,芹菜素组能明显改善大鼠神经缺损症状,缩小梗死体积,减轻鼠脑病理形态学改变,减少TLR4、NF-κBp65阳性细胞表达,减少血清中TNF-α、IL-6的释放及细胞凋亡数(P<0.05,P<0.01)。结论芹菜素对局灶性缺血大脑能产生神经保护作用,降低神经细胞凋亡,其机制可能与抑制脑组织内TLR4、NF-κB表达有关。     

艾地苯醌对帕金森病小鼠行为学改善的作用及其机制

目的 研究艾地苯醌对于1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）诱导的帕金森病小鼠行为学改善的作用及可能的机制。方法 将小鼠分为对照组,模型组,艾地苯醌高、低剂量组。除对照组外,其余组别连续1周注射20 mg·kg^-1的MPTP诱导小鼠帕金森病,低剂量组小鼠每日给予艾地苯醌5 mg·kg^-1,高剂量组小鼠每日给予艾地苯醌10 mg·kg^-1,模型组给予等体积的生理盐水,连续干预14 d,对照组小鼠常规饲养。小鼠行为学实验采用旷场实验、爬杆实验、转轮实验、游泳实验、悬挂实验。免疫组化法检测小鼠黑质酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）的表达,Nissl染色检测小鼠中脑蛋白合成能力,MDA、SOD试剂盒检测小鼠黑质氧化损伤的水平,TUNEL染色检测小鼠黑质神经元的凋亡,免疫荧光法检测小胶质细胞IBA-1的表达,Western blot检测小鼠黑质中Bax、Bcl-2、caspase-9的表达。RT-QPCR检测线粒体DNA拷贝数mt-ND1以及线粒体DNA复制关键转录因子POLG1、POLG2、TFAM的mRNA表达水平。ELISA法检测小鼠外周血中炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达水平。结果 模型组小鼠的运动能力相比对照组显著下降,且平衡感受到严重影响。艾地苯醌干预后,小鼠行为学得到显著改善,相比模型组具有显著性差异（P<0.05）。相比对照组,模型组小鼠黑质中TH、SOD的表达显著下调（P<0.05）、神经元凋亡率和MDA、IBA-1的水平显著上调（P<0.05）,外周血中炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的表达水平显著上调（P<0.05）,Bax、caspase-9表达上调,DNA拷贝数以及相关转录因子表达下调。与模型组相比,艾地苯醌可以提高黑质中TH和SOD的表达,下调黑质中神经元凋亡率、IBA-1的表达以及外周血炎症因子水平,下调凋亡相关蛋白Bax、caspase-9,上调Bcl-2的表达,提高DNA的拷贝数和相关转录因子的表达。结论 艾地苯醌可以改善帕金森病小鼠的行为学,其机制和抗氧化应激损伤、抑制线粒体凋亡信号、改善线粒体损伤有关。     

银杏叶提取物对血管性痴呆小鼠大脑皮层生长抑素及胆囊收缩素表达的影响

目的 观察银杏叶提取物(EGB)对血管性痴呆(VD)小鼠大脑皮层生长抑素(SS)和胆囊收缩素(CCK)表达的影响,探讨EGB对VD的改善作用.方法 复制VD小鼠模型,利用Y-迷宫检测VD模型小鼠学习记忆能力及不同剂量EGB治疗组的改善作用,实时定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测各组动物大脑皮层中生长抑素和胆囊收缩素mRNA的变化,免疫组织化学方法研究不同剂量EGB对VD小鼠大脑皮层生长抑素和胆囊收缩素阳性神经元数量的影响.结果 各试验组小鼠均比对照组小鼠Y-迷宫学习记忆训练次数明显增多(P＜0.05),高低剂量EGB治疗组迷宫学会次数与模型组相比明显减少,且高剂量治疗组减少更明显(P＜0.05).VD模型组小鼠大脑皮层生长抑素和胆囊收缩素mRNA转录水平与对照组相比显著下调,高低剂量EGB治疗组与VD模型组相比显著上调(P ＜0.05);VD模型组小鼠大脑皮层生长抑素和胆囊收缩素阳性神经元数量与对照组相比显著减少,高低剂量EGB治疗组与VD模型组相比显著增多(P＜0.05).结论 EGB通过增加大脑皮层中生长抑素和胆囊收缩素的表达,对VD小鼠的学习记忆能力可起到一定的改善作用.