白细胞介素-10对实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的:探讨外源性IL-10对实验性肝纤维化大鼠肝星状细胞Col-Ⅰ和Col-Ⅲ mRNA表达的影响.方法:60只清洁级SD雄性大鼠,随机分为生理盐水对照组(N组,8只)、CCl4组(C组,28只)和IL-10干预组(I组,24只)3组,于造模第7周和第11周分别随机选取一批大鼠,分离肝星状细胞并提取总RNA,以半定量RT-PCR方法检测各组Col-Ⅰ和Col-Ⅲ mRNA表达的水平.结果:随着肝纤维化的进展,C组Col-Ⅰ和Col-Ⅲ mRNA的表达增加并呈增强趋势(与N组比较,P＜0.01;与第7周比较,Col-ⅠP＜0.01;Col-Ⅲ P＜0.05).造模第7周,Ⅰ组Col-Ⅲ mRNA的表达量低于C组(P＜0.01);造模第11周,两种胶原Ⅰ组的表达量均进一步下降(与C组比较,P＜0.01;与第7周比较,Col-ⅠP＜0.05;Col-ⅢP＜0.01),与正常组差异无显著性意义(P＞0.05).结论:随着肝纤维化进展,肝星状细胞内Col-Ⅰ和Col-Ⅲ mRNA的表达增加,外源性IL-10能显著降低两者的表达.     

外源性转化生长因子β1对大鼠原代肝星状细胞活化的影响

目的:探讨大鼠原代肝星状细胞(HSC)体外培养过程中,不同时期外源性转化生长因子β1(TGF-β1)对其活化的影响及相关因素的变化.方法:分离大鼠原代HSC,于无包被的塑料培养板上分别培养2,3,4,5,6,7 d时予TGF-β15 μg/L处理24 h,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,应用Western blot法检测处理前后细胞α-肌动蛋白(α-SMA)的变化,及活化过程中TGF-β1Ⅱ型受体(TβR-Ⅱ)的表达.结果:HSC在体外培养过程中,不同培养时间对TGF-β1的刺激活化作用反应不同.TGF-β1处理后,对培养2,3,4,5 d HSC的活化有促进作用,以对培养第3天的细胞作用最明显,其α-SMA表达增加78.05%,而培养6,7 d的HSC的形态和α-SMA变化不明显.培养第7天的HSC比培养第3天的细胞TβR-Ⅱ表达增高(3.30±0.83 vs 1.55±0.38,P＜0.05).结论:TGF-β1对处部分活化状态中某阶段细胞的活化具有促进作用.完全活化的细胞对TGF-β1的刺激活化作用不敏感,原因与TβR-Ⅱ的表达量无关.     

肝硬化患者肝功能失代偿状况与门脉管径的关系

目的:探讨肝硬化患者肝功能失代偿状况、食管静脉曲张程度与门脉主干内径及脾静脉内径的关系。方法:对100例肝硬化失代偿期患者进行肝功能Child-pugh分级,内镜检查判断食管静脉曲张程度,彩色多谱勒B超检测门静脉主干内径及脾静脉内径。结果:肝功能分级越差,门静脉与脾静脉的内径越大(P<0.05),且随着门静脉及脾静脉内径增大,食管静脉曲张程度亦加重(P<0.05)。结论:门静脉及脾静脉内径能间接体现门静脉高压的程度,继而反映肝功能失代偿状况。     

TIMP-1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的作用

目的　探讨TIMP 1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性IL 10抗肝纤维化作用的可能机制。方法　 60只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ,8只 )、CCl4组 (C组 ,2 8只 )和IL 10干预组 (Ⅰ组 ,2 4只 ) ,建立下常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第 11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉原位灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的TIMP 1mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养贴壁后HSC的TIMP 1蛋白表达情况。结果　各组均检出TIMP 1的mRNA表达 ;造模第 7周 ,C组与I组的TIMP 1mRNA表达均高于N组 (P <0 .0 1) ,I组低于C组 (P <0 .0 1) ;造模第 11周 ,I组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,C组TIMP 1的表达水平较第 7周进一步增加 (P <0 .0 1) ,而I组有所下降 (P <0 .0 5 )。免疫细胞化学法检测各组TIMP 1的蛋白表达变化与mRNA表达变化一致。结论　TIMP 1随着大鼠肝纤维化进展表达逐渐升高 ,IL 10通过抑制TIMP 1的表达 ,起抗纤维化作用     

白细胞介素-10对肝星状细胞增殖及表达Fas/Fas配体的影响

研究拟通过观察外源性血小板衍生生长因子(PDGF)和白细胞介素-10(IL-10)干预后肝星状细胞(HSC)增殖及凋亡相关基因Fas/FasL表达的变化,进一步探讨PDGF致纤维化和IL-10抗肝纤维化的机制。     

肝细胞中HBV X基因的表达及其共培养的肝星状细胞的增殖和迁移

目的:研究乙型肝炎病毒X(hepatitis B virus X,HBV X)基因在乙型肝炎病毒致肝纤维化中的作用.方法:构建HBV X基因真核表达载体pHBV-X-IRES2-EGFP,将其转染人肝细胞HL-7702后分成2组,一组经G418筛选出稳定表达HBVX基因的肝细胞株(L02/x),另一组予瞬时转染48 h(L02/48x).Real-time PCR、Western blot鉴定2组细胞HBV X基因的表达.与转染空质粒和未转染的肝细胞组对照,将L02/x和L02/48x细胞分别与肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)共培养36 h,并检测各组HSCs增殖和迁移情况.结果:Real-time PCR和Western blot实验显示,转染pHBV-X-IRES2-EGFP载体的L02/x和L02/48x细胞均有HBV X基因的表达.与转染空质粒和未转染的肝细胞组对照,与L02/x和L02/48x细胞共培养的HSCs的增殖和迁移均显著增多.结论:HBV X基因在肝细胞中的表达可以促进HSCs发生增殖和迁移,从而在乙型肝炎病毒致肝纤维化过程中起重要作用.     

肝病患者LN,PCⅢ,Ⅳ-C及PLD变化的意义

目的探讨慢性肝病患者血清LN，PCⅢ，Ⅳ－C及PLD变化的临床意义．方法慢性肝病患者99例，其中慢性HBV感染30例，肝硬变40例，肝癌29例及正常对照30例进行研究.血清LN，PCⅢ及Ⅳ－C含量用放射免疫测定，血清PLD采用生化比色法测定.结果肝硬变及肝癌患者血清LN，PCⅢ，Ⅳ－C，PLD均显著高于正常组及慢性HBV感染织（P均＜0．01），慢性HBV感染织PCⅢ也较正常组为高（P＜0．01），肝硬变患者血清PCⅢ，Ⅳ－C含量较肝癌组增高（P＜0.05）．肝硬变组各指标单项检测阳性率为PCⅢ＞LN＞Ⅳ－C＞PLD，联合检测以PCⅢ＋LN阳性率为高.肝硬变、肝癌与HBV感染单项指标检测结果存在部分重叠．结论LN，PC-Ⅲ，Ⅳ－C及PLD检测有助于肝硬变患者的临床诊断及慢性HBV感染的趋势判断；PCⅢ＋LN联合检测可提高肝硬变诊断的特异性．     

白介素-10对实验性肝纤维化的影响

目前已证实 ,许多细胞因子与肝纤维化形成关系密切。本研究采用外源性白介素 10 (ＩＬ 10 )干预纤维化大鼠 ,观察干预前后大鼠血浆转化生长因子 β1(ＴＧＦ β1)和肿瘤坏死因子 α(ＴＮＦ α)水平及组织学变化 ,探讨ＩＬ 10抗肝纤维化的作用机制 ,为临床治疗肝纤维化提供一条新途径。一、材料与方法1.材料 :雄性清洁级ＳＤ大鼠 95只 ,体重 140～ 180 ｇ ,随机分成 3组 ,正常对照组 (Ｎ组 ) 2 1只 ,肝纤维化组 (Ｃ组 ) 39只 ,ＩＬ 10干预组 (Ｅ组 ) 35只 ,按常规饲养条件 [温度(2 2± 2 )°Ｃ ,湿度 (5 5± 5 ) % ,人工照明 12ｈ ,自由取食…     

15-LOX-1基因表达对胃癌细胞增殖的抑制作用

目的研究15-LOX-1基因对人胃癌细胞增殖的影响。方法通过脂质体介导瞬时转染15-LOX-1基因于培养的胃癌细胞株（AGS）中，以转染空载体pcDNA3．1（＋）的细胞及未转染质粒的细胞作为对照；用RT—PCR和Westernblot检测人胃癌细胞的15-LOX-1mRNA及蛋白表达；倒置显微镜观察转染前后AGS形态变化；用MTT法比较转染前后AGS的增殖水平，流式细胞术检测转染后AGS细胞周期的变化。结果胃癌细胞系巾未检测到15-LOX—1mRNA和蛋白的表达，转染后的AGS表达有15-LOX—1的mRNA及蛋白。转染重组质粒绀细胞增殖显著低于未转染组及空质粒转染组（P〈0．05），转染后AGS细胞G0／G1期细胞明显增加，S期细胞明显减少，与未转染组及空质粒转染组相比均有显著性差异（P〈0．05）。结论15-LOX-1基因能抑制胃癌细胞的增殖，为进一步探讨胃痛的发病机制及治疗提供实验依据。