MicroRNA在感染性疾病相关肿瘤中作用的进展

MicroRNA（miRNA）是一类近年来新发现的非编码小RNA分子,广泛存在于动物、植物和病毒中。通过与靶mRNA3＇端非翻译区完全或不完全互补配对,调控靶基因的表达或翻译,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动,其表达失调会导致疾病的发生。本文就miRNA在感染性疾病相关肿瘤中的作用研究进行简要综述。     

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测宫颈癌血清中miR-21的表达

摘要：目的：建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR法检测宫颈疾病患者血清中miR-21的表达水平,探讨miR-21在宫颈癌临床监测中的意义。 方法：设计miR-21、U6茎环逆转录引物和PCR扩增引物,以U6为内参,用实时荧光定量PCR检测32例不同宫颈疾病患者血清中miR-21表达水平。 结果：建立的实时荧光定量PCR法能特异地检测血清中的miR-21扩增信号,熔解曲线单一,产物特异。宫颈癌患者血清中miR-21水平明显高于子宫肌瘤、宫颈炎等其他良性宫颈疾病（P<0.05）,而宫颈癌患者手术切除后血清中miR-21水平明显下降（P<0.05）。 结论：SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR是一种快速简便、敏感性高、特异性好的检测方法,对宫颈癌早期诊断、分子分期和预后判断有很好的应用前景。     

血清miR-21在糖尿病肾病中的诊断价值

 目的：评价血清miR-21对糖尿病肾病的诊断价值,探讨糖尿病肾病诊断的分子标志物。方法：对25例糖尿病肾病患者、25例II型糖尿病患者A［尿微量白蛋白（UmAlb）＜1429 mg/L］、25例II型糖尿病患者B（UmAlb＞1429 mg/L）、25例糖尿病肾病引发的尿毒症患者及25例正常对照组的血清标本进行总RNA提取,并进行miR-21的实时荧光定量PCR检测,分析血清miR-21相对表达量与相关临床指标的关系,评估血清miR-21对糖尿病肾病的诊断效能。结果：miR-21在糖尿病肾病患者血清中的相对表达量显著低于正常对照组、糖尿病A组及B组,同时显著高于尿毒症组(均P＜001),糖尿病肾病患者血清miR-21水平与胱抑素C、UmAlb、UmAlb/尿肌酐呈显著负相关（P<001,P<005,P<005)。经logistic回归及ROC曲线分析,血清miR-21在糖尿病肾病患者与正常对照组、糖尿病A组、糖尿病B组、糖尿病A组＋正常对照组、糖尿病B组＋正常对照组和糖尿病A组＋糖尿病B组中诊断糖尿病肾病的曲线下面积（AUC）为0848(95%CI：0737~0959)、0896(95%CI：0812~0980)、0782(95%CI：0641~0922)、0838(95%CI：0743~0933)、0796(95%CI：0675~0917)和0808(95%CI：0704~0911),敏感性和特异性分别为800%和720%、720%和880%、720%和840%、760%和770%、760%和820%、700%和860%;在4组人群中诊断糖尿病肾病的AUC为0845(95%CI：0752~0939),敏感性和特异性分别为760%和773%。结论：血清miR-21可作为糖尿病肾病的分子诊断标志物。     

Taqman探针实时荧光定量PCR检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平及其临床意义

 目的:运用Taqman探针实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）检测肝脏疾病患者血清中miR-122的表达水平并探讨其临床意义。方法:设计miR-122及U6 snRNA的茎环引物和Taqman探针,运用Taqman探针实时荧光定量PCR检测27例肝癌术前(HCC)患者、15例乙型肝炎（hepatitis B）患者、15例丙型肝炎（hepatitis C）患者、15例正常对照者（HC）、11例肝癌术后（PHCC）患者及10例肝癌术后复发（recurrence）患者血清中miR-122的表达水平,并分析miR-122与肝脏疾病相关标志物的关系。结果:Taqman探针实时荧光定量PCR方法能检测血清中miR-122的表达。HCC、hepatitis B、hepatitis C及recurrence患者血清中miR-122的表达水平均高于HC和PHCC患者（P<0.05）, hepatitis C患者血清miR-122表达水平高于HCC、hepatitis B和recurrence患者（P<0.05）,但HCC、hepatitis B和recurrence患者血清miR-122的表达水平无明显差异（P>0.05）,PHCC患者血清miR-122的表达水平比HCC和recurrence患者低（P<0.05）。血清乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）阳性和(或)乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者（P<0.05）。血清丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）阳性患者血清miR-122的表达水平高于阴性者（P<0.05）。血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）与miR-122的表达水平有正相关性（r=0.34,P<0.05）。血清甲胎蛋白（AFP）≥400 μg/L组血清miR-122的表达高于AFP＜400 μg/L组（P<0.05）。结论: Taqman探针实时荧光定量PCR适用于检测血清miR-122的表达水平。在HCC、hepatitis B、hepatitis C及recurrence患者血清中miR-22均有不同程度的增高,尤其是hepatitis C患者,且PHCC患者血清miR-122表达下降,复发后升高。血清miR-122的表达与肝脏疾病的某些指标有关,提示血清miR-122可作为肝脏疾病,特别是肝癌早期诊断、手术疗效及预后判断的新指标。     

用巢氏PCR检测防止香港型地中海贫血漏诊

目的探讨经α-地中海贫血基因诊断试剂盒检测为-α3.7/αα(右向缺失,静止型)的样本中是否携带anti4.2片段,以判断是否存在漏诊的香港型地中海贫血(HKαα)。方法设计HKαα和anti4.2片段的引物,用巢式PCR检测50例-α3.7/αα样本中是否存在anti4.2片段,并结合平均红细胞体积(MCV)及血红蛋白A2(HbA2)比较分析。结果巢式PCR结果表明,50例-α3.7/αα样本中存在8例为HKαα型,漏诊率为16%;且HKαα携带者的MCV明显高于-α3.7/αα携带者,差异有统计学意义(t=7.04,P0.05)。结论巢式PCR可鉴别HKαα与-α3.7/αα携带者,提高其检出率。     

MicroRNA在感染性疾病相关肿瘤中作用的进展

MicroRNA(miRNA)是一类近年来新发现的非编码小RNA分子,广泛存在于动物、植物和病毒中。通过与靶mRNA3'端非翻译区完全或不完全互补配对,调控靶基因的表达或翻译,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化等生命活动,其表达失调会导致疾病的发生。本文就miRNA在感染性疾病相关肿瘤中的作用研究进行简要综述。