剧烈运动引起肾功能异常变化的初步研究

目的　了解剧烈运动对肾功能影响。方法　用尿沉渣流式细胞仪 (UF 10 0 )、放射免疫等方法 ,测定45名健康男女学生剧烈运动前后尿红细胞 (RBC)、白细胞 (WBC)、管型 (Cast)、上皮细胞 (EC)、结晶 (X’TAL)、病理管型 (P .Cast)、小圆上皮细胞 (SRC)、总蛋白 (PRO)、白蛋白 (Alb)、α1 微球蛋白 (α1 MG)、β2 微球蛋白 (β2 MG)、视黄醇结合蛋白 (RBP)、N 乙酰 β D氨基葡萄糖苷酶 (NAG)及电导率等指标 ,以评价剧烈运动前后肾功能变化情况。结果　剧烈运动前后及休息后男生尿RBC、WBC、Cast、EC差异有显著性 (P <0 .0 1) ;女生剧烈运动后尿Cast差异有显著性 (P <0 .0 1) ;男女生尿X’TAL、P .Cast、PRO、SRC、Alb、α1 MG、β2 MG、RBP及NAG剧烈运动后显著增加 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,而电导率运动前后无明显变化 (P >0 .0 5 )。结论　剧烈运动会导致肾功能异常变化。     

使用AMP2000-U对Fast-Read10三种计数方式的扫描结果比较

目的使用Fast-Read10板进行尿沉渣计数时,通过AMP 2000-U对三种不同计数方式的扫描结果进行比较,选择最佳计数方式.方法选择50份尿常规显微镜检阳性标本,分别用三种计数方式测定标本中的红细胞、白细胞数目,将同一份标本取得的三个结果进行配对t检验,并与UF-100的结果比较.结果 (1)选取每个中格内靠左下角小角进行计数的第一种方式与选取每个中格内四个不同角的小格进行计数的第二种方式的计数结果无显著差异(P＞0.05).(2)第三种方式选取每个中格中央任一小格进行计数的结果与前两种计数方式比较有差异(P＜0.01).(3)第三种计数方式的计数结果与UF-100的计数结果无显著差异(P＞0.05).结论三种计数方式计数尿沉渣的结果不一致;计数每个中格中央小格尿沉渣的计数方式与UF-100结果一致,比较可靠.     

抗α-胞衬蛋白多肽抗体在干燥综合征诊断中的意义

目的　α 胞衬蛋白是干燥综合征 (SS)患者涎腺中的一种较特异的自身抗原。本研究利用合成的α 胞衬蛋白多肽 ,通过酶联免疫吸附 (ELISA)法检测患者血清中α 胞衬蛋白多肽抗体 ,以了解该多肽抗体在SS诊断中的意义。方法　①固相法合成α 胞衬蛋白多肽 ;②以α 胞衬蛋白多肽作为包被抗原 ,应用ELISA分别检测原发性SS患者 74例 ,继发性SS患者 15例 ,系统性红斑狼疮(SLE)患者 4 1例 ,类风湿关节炎 (RA)患者 4 4例和正常人 5 9名血清中抗α 胞衬蛋白多肽抗体。结果　α 胞衬蛋白多肽抗体在原发性SS、继发性SS的阳性率分别为 73%和 4 0 % ,而在SLE、RA及正常人分别为 19 5 %、2 9 5 %和 3 8%。抗α 胞衬蛋白多肽抗体对原发性SS诊断的敏感性为 73% ,特异性为 88 7%。α 胞衬蛋白多肽抗体在原发性SS患者中的阳性率 (73% )明显高于继发性SS、SLE、RA患者及正常人 (P <0 0 1)。与正常人相比 ,SLE及RA患者的α 胞衬蛋白多肽抗体的阳性率亦明显升高(P <0 0 5 ) ,但在SLE与RA之间差异无显著性 (P >0 0 5 )。α 胞衬蛋白多肽抗体可能与SS患者的病情程度及预后有关。结论　①抗α 胞衬蛋白多肽抗体对原发性干燥综合征的诊断具有参考意义 ,是与SS的病变过程有关的主要自身抗体之一。②α 胞衬蛋白多肽抗体与SS患者的     

雌激素受体基因多态性与女性类风湿关节炎相关性的研究

目的分析雌激素受体(ER)基因XbaⅠ和PvuⅡ酶切多态性在女性类风湿关节炎(RA)中的分布,探讨其与人类白细胞抗原(HLA)-DRβ1*04基因亚型、类风湿因子(RF)以及RA患者临床表现的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术,对81例女性RA患者和146名女性正常对照者的ER基因(XbaⅠ、PvuⅡ位点)进行分型,并计算基因分布频率。分析患者的HLA-DRβ1*04基因亚型、RF以及临床表现与ER基因多态性之间的关系。结果女性RA患者的ER基因X、P基因频率均明显高于健康对照组,ER基因的XX和PP基因亚型的阳性率分别高于正常对照组(P<0.05)。而RA患者的xx基因亚型的阳性率明显低于健康对照组(P<0.05)。RA患者XXPP基因型的阳性率明显高于健康对照组,而xxpp基因型的阳性率明显低于健康对照组(P<0.05)。携带PP基因型的RA患者HLA-DRβ1*04基因亚型的阳性率明显升高(P<0.05)。ER基因中pp基因型、XXpp和xxPP基因型的患者关节受累数明显增高(P<0.05)。结论女性RA患者ER基因的X和P的基因频率表达明显增高。ER基因酶切多态性分析中,XX、PP及XXPP基因型可能与女性RA的易感性相关。PP基因型可能与HLA-DRβ1*04基因有一定的相关性,pp基因型、XXpp和xxPP基因型可能与RA关节病变的程度相关。     

干燥综合征特异性α-胞衬蛋白的抗原表位筛选及鉴定

目的：筛选和鉴定干燥综合征特异性α-胞衬蛋白（α-Fodrin）的抗原表位.方法：采用蛋白质计算机分析软件预测α-胞衬蛋白的抗原决定簇,设计8条重叠蛋白片段序列,应用GST融合表达系统原核表达该系列融合蛋白.通过Western blot实验检测融合蛋白片段的抗原性,并对抗原性片段以外的序列片段进行融合表达和检测,最终确定抗体所识别的部位.结果：8条重叠融合蛋白片段均有抗原性,最小片段以外序列的表达片段检测不具有抗原性.结论：α-胞衬蛋白的第1～59位氨基酸是其抗原表位区域,为进一步研究α-胞衬蛋白在干燥综合征中的作用机制和应用奠定了基础.     

类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库的构建

目的构建类风湿关节炎(RA)滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选和鉴定RA特异性基因的研究奠定基础。方法取确诊RA患者的滑膜组织,用Trizol试剂提取总RNA,Oligotex离心柱分离mRNA,电泳检测其质量,逆转录合成双链cDNA,经末端修平、接头连接、酶切后去除过多接头,收集>300bp的cDNA片段,与T7Select10-3载体连接,体外包装并扩增得到类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库。最后,通过铺平板滴度测定及PCR技术鉴定文库质量。结果所构建原始文库重组克隆数为2×107pfu,扩增滴度8.9×1010pfu/ml。PCR法检测片段插入率为90%,插入片段在300～2000bp之间。文库噬菌体裂解液PCR扩增得到BiP基因片段。结论成功构建了高质量的RA滑膜T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步RA自身抗原的筛选奠定了基础。     

人内质网分子伴侣BiP的克隆、表达及其在RA患者血清抗体检测中的作用

以类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜组织文库cDNA为模板,用PCR方法扩增得到1965 bp人内质网分子伴侣BiP的全长cDNA,将其克隆入OmicsLinkTM表达载体pReceiver-B01a,构建重组表达质粒pReceiver-B01a-BiP。重组表达质粒导入大肠杆菌BL-21(DE3)菌株中诱导表达目的蛋白,表达产物以Ni+-NTA agarose层析柱纯化。SDS-PAGE和免疫印迹法(Western blot)分析发现,表达产物以可溶性蛋白和包涵体形式共同存在,表达量约占菌体蛋白总量的20%~30%。相对分子质量约为80000,纯度达到电泳级。经免疫印迹法鉴定,获得的BiP重组蛋白可以与RA患者血清反应,检测的抗BiP抗体在RA患者血清中的阳性率为75.4%(49/65),明显高于系统性红斑狼疮(systemic lupus erythe-matosus,SLE)患者14.6%(7/48)、原发性干燥综合征(primary Sj gren’s syndrome,pSS)患者7.3%(4/55)及正常人0%(0/71)(P<0.01)。表明,经原核表达获得的BiP全长蛋白,RA患者血清抗体可以很好结合,有望应用于临床血清学诊断。     

激光氧液治疗小儿腹泻病疗效观察

腹泻病是儿科常见病,我院儿科病区于1996年4月至1998年《月共收治住院腹泻病患儿141例,其中81例使用激光氧液治疗另6o例为对照组。经临床观察,统计学处理,激光氧液治疗组效果显著,现分析报道如下。1资料与方法1,1一般资料本组141例,l、）L腹泻病,男86例,女55例。人院时病程在1～3天有95例,在《天以上有46例。年龄在2个月至3岁共131例;4岁以上10例。所有患儿j实泻病的诊断均符合“中国腹泻病诊断治疗方案”的诊断依据’“’。（）大使性状有改变;呈稀便、水样便、站液便或脓血便、（）大便次数比平时增多。其中巩例大便次数在3～9次／d。其…     

pH、电导率对尿沉渣流式细胞仪检测红细胞的影响

UF-100结合流式细胞术与电阻抗法定量测定尿液中的有形成分，检测结果的精确度明显优于镜检法，临床上应用越来越广泛。UF-100不仅能对尿中红细胞进行计数，而且能分析红细胞的性质，有助于鉴别肾小球源性与非肾小球源性血尿。但许多因素影响尿液红细胞的数量与性质，为此我们配制了“模拟血尿标本”，在体外初步评价了pH、电导率及潴留时间对UF-100检测红细胞的影响，现报告如下。     

地拉卓干预APS IgG诱导血液单核细胞组织因子活性的实验研究

 目的 探讨药物地拉卓(dilazep)对抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome,APS)患者血清IgG诱导单核细胞组织因子(tis-sue factor,TF)表达及其抑制机制。方法 将纯化的APS血清IgG以及地拉卓等药物与新鲜分离的外周血单核细胞培养一定时间,加入外源性因子Ⅶa和Ⅹ,通过因子Ⅹa的生成情况,判断单核细胞表面IF活性;利用TF primers,采用TaqMan PCR方法,观察单核细胞TF mRNA表达情况。结果　地拉卓呈量效递增性抑制APS IgG诱导单核细胞TF活性表达,但并非影响APS IgG诱导单核细胞TF mRNA表达。腺苷受体拮抗剂--茶碱(theophylline)可中和地拉卓的这一抑制效应。结论　地拉卓通过腺苷受体途径,在转录后水平干预APS IgG对单核细胞TF活性的诱导。提示某些阻止单核细胞TF活性的药物可望成为治疗APS的新突破。