不同耐药表型肺炎克雷伯菌生物膜形成能力与RyhB基因的关联性

目的探讨呼吸道感染分离的不同耐药表型肺炎克雷伯菌(KP)生物膜形成能力与RyhB基因的相关性及其临床意义。方法收集2018年10月2019年10月该院呼吸道感染分离的46株KP,检测菌株的耐药性,构建KP体外感染模型并通过结晶紫染色法定量检测KP生物膜形成能力;采用PCR法扩增RyhB基因。结果46株KP根据耐药谱分为4个耐药表型,耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)6株(占13.0%),产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌(ESBLsKP)18株(占39.1%),多重耐药肺炎克雷伯菌(MDRKP)13株(占28.3%),高毒力肺炎克雷伯菌(HvKP)9株(占19.6%)。科室来源排名前3为重症监护室11株(占23.9%),呼吸科8株(占17.4%),神经外科7株(占15.2%)。CRKP生物膜形成能力低于产ESBLsKP、MDRKP(P<0.05);HvKP生物膜形成能力低于产ESBLsKP、MDRKP(P<0.05);CRKP与HvKP生物膜形成能力比较差异无统计学意义(P=0.802);产ESBLsKP与MDRKP生物膜形成能力比较差异无统计学意义(P=0.466)。产ESBLsKP和MDRKP存在特异性条带,CRKP和HvKP不存在特异性条带。不同耐药表型与RyhB基因表达的交互作用与生物膜形成能力有关,且RyhB基因阴性表达时,会导致生物膜形成能力下降。结论该院的产ESBLsKP和MDRKP有较强的生物膜形成能力并容易携带RyhB基因,RyhB基因正调控KP生物膜的合成。     

vIL-10逆转录病毒载体构建及在鼠成纤维细胞中的表达

目的：探讨ｖＩＬ１０的免疫抑制作用，为应用ｖＩＬ１０进行免疫基因治疗打基础。方法：用基因重组技术将ｖＩＬ１０ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，并用脂质体法导入包装细胞ＰＡ３１７，取其上清感染小鼠成纤维细胞ＮＩＨ３Ｔ３。结果：经筛选获得抗Ｇ４１８的ＮＩＨ３Ｔ３阳性克隆，用ＲＴＰＣＲ，ＥＬＩＳＡ方法检测到ｖＩＬ１０的表达，用３ＨＴｄＲ法检测到ｖＩＬ１０对ＭＬＲ的抑制作用。结论：构建ｖＩＬ１０逆转录病毒表达载体并转染小鼠成纤维细胞，初步证实ｖＩＬ１０具有免疫抑制作用。     

1351例支原体培养结果分析

目的：通过对1351例支原体培养结果分析，更好地指导临床医生合理用药，以免滥用抗生素，造成耐药菌株产生。方法：采用法国生物梅里埃Biomerieux公司生产的支原体IST试剂盒，按说明书操作。结果：对1351例就诊患者做支原体培养检查，共检出支原体阳性452株（33．4％）。其中解脲脲原体357株（26．4％），人型支原体95株（7．0％），357株解脲脲原体对6种抗生素的敏感率分别为：强力霉素（43．3％），交沙霉素（81．5％），氧氟沙星（45．4％），红霉素（18．8％），四环素（31．4％），原始霉素（47．1％）。95株人型支原体对6种抗生素的敏感率分别为：强力霉素（44.2%)，交沙霉素（72.6%)，氧氟沙星（40％），红霉素（23．2％），四环素（30．5％），原始霉素（46．3％）。结论：支原体的检出率高，对抗生素的敏感率低，并均有不同程度的耐药株出现，应引起高度重视。     

逆转录病毒介导的vIL-10表达对小鼠MLC和心脏移植存活期的影响

【目的】探讨逆转录病毒介导的病毒白介素 10 (vIL 10 )基因表达对小鼠混合淋巴细胞培养 (MLC)反应和心脏移植存活期的影响。【方法】将vIL 10cDNA克隆到逆转录病毒载体pLXSN ,取vIL 10重组逆转录病毒上清加入BABL/c和CBA/J混合淋巴细胞中培养 ,液闪测量。在新生CBA/J小鼠心脏移植时 ,将vIL 10上清 10 μL(10 0 0pfu)注入移植心脏内 ,观察其对心脏移植存活期的影响。【结果】vIL 10抑制小鼠混合淋巴细胞反应 (MLR) ,其抑制效应随vIL 10病毒上清的增加而增加 ,逆转导病毒介导的vIL 10表达使小鼠心脏移植存活期从 (11± 1)d延长至 (2 8± 3)d (P <0 0 1)。【结论】逆转录病毒介导的vLL- 10表达抑制小鼠MLR ,使小鼠心脏移植存活期明显延长。     

大鼠腹膜透析液和腹膜表层中磷脂含量

用Folch液提取大鼠腹膜透析液和腹膜表层中的磷脂,用比色方法作定量测定,用高效薄层层析法分析其组分,取大鼠用25mL含4．25％葡萄糖透析液透析4h后,透析液中磷脂含量为0．1219711mg,腹膜表层磷脂含量为1．1206972mg,透析液中磷脂酰胆碱占665,溶血磷脂酰胆碱和鞘磷脂为29％,磷脂酰肌醇为4．5％。腹膜表层中磷酯酰胆碱占47％,溶血磷脂酰胆碱和鞘磷脂为20．6％,磷脂酰肌醇为6．3％,磷酯酰丝氨酸为17．1％,磷脂酰乙醇胺8．9％。结果表明（1）大鼠腹膜表层含有较多磷脂。（2）大鼠透析液中磷脂酰胆碱含量与鞘磷脂＋溶血磷脂酰胆碱含量的比例和腹膜表层中一致,但腹膜表层中另有较多的磷脂酰丝氨酸及磷脂磷酰乙醇胺。（3）大鼠透析液中的磷脂可能主要是从腹膜表层中洗脱下来的。     

CRP和WBC联合检测在儿童急性呼吸道感染中的应用价值

目的探讨C-反应蛋白（CRP）N定和白细胞（WBC）计数在儿童急性呼吸道感染中的应用价值。方法选取该院儿科住院的急性呼吸道感染患儿230例,其中细菌感染组130例,病毒感染组50例,肺炎支原体感染组50例,并以50例健康体检儿童作为对照组,分别检测外周血的CRP和WBC。结果细菌感染组的CRP阳性率明显高于WBC的阳性率。各感染组的CRP和WBC阳性率,细菌感染组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）,病毒感染组与对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）,肺炎支原体感染组与对照组相比,CRP阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）,WBC阳性率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论CRP和WBC联合检测对儿童急性呼吸道感染类型的鉴别有重要价值。     

897例泌尿系感染主要病原菌耐药性分析

目的 通过对引起泌尿系感染的主要病原菌进行耐药性分析,了解本院泌尿系感染病原菌的分布及对抗菌药物的耐药情况,从而更好地配合临床医生合理用药.方法 收集897例患者尿液行中段尿培养,按<全国临床检验操作规程>进行检测分析[2].结果 检出尿中细菌数高于104～105CFU/ml有424例,阳性率47.3%.其中革兰氏阴性菌308株(72.6%),以大肠埃希菌为主(232株).阳性菌116株(27.4%),以表皮葡萄球菌为主(68株).232株大肠埃希菌对8种抗生素的耐药性分别为:环丙沙星52.2%,阿米卡星4.3%,头孢曲松26.3%,左氧氟沙星27.6%,氨苄西林89.2%,头孢唑啉48.7%,头孢哌酮-舒巴坦3.0%,头孢他啶18.5%.68株表皮葡萄球菌对8种抗生素的耐药性分别为:头孢哌酮-舒巴坦2.9%,阿米卡星5.9%,复方新诺明38.2%,左氧氟沙星17.6%,青霉素75.0%,苯唑西林42.6%,克林霉素61.8%,红霉素44.1%.结论 长时间和较频使用的抗生素会导致耐药性的产生,提示在选择使用抗生素时必须慎重,防止滥用[1].     

腺病毒载体介导的大鼠DNA多聚酶β重组体的构建及其在PC12细胞中的表达

【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT—PCR获取大鼠DNA多聚酶β（POLβ）的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连人穿梭质粒pAdTrack—CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒（pAd—polp）和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ cDNA序列完全一致，同源重组检测时30个克隆中有8个含目标条带。DNA序列正确的POLβ重组腺病毒质粒转染293细胞后，感染Ad—polβ的293及PC12细胞荧光显微镜下可见绿色荧光，重组腺病毒Ad—polβPCR鉴定含目标条带，Ad—polβ感染PC12细胞Western Blot检测到POLβ蛋白表达。【结论】成功构建了大鼠DNA多聚酶β的腺病毒重组体并在PC12细胞中表达     

泌尿系感染主要病原菌耐药性分析

目的 通过对引起泌尿系感染的主要病原菌耐药性分析，能更好地配合临床医生合理用药。方法 收集518例就诊患者行中段尿培养，按《全国临床检验操作规程》进行检测分析^[1]。结果 检出尿中细菌数高于10^4～10^5CFU／ml有240例，阳性率46．3％。其中革兰氏阴性菌177株(73．8％)；以大肠埃希菌为主(133株)阳性菌63株(26．2％)；又以表皮葡萄球菌为主(39株)。133株大肠埃希菌对8种抗生素的耐药性分别为：环丙沙星51．9%;阿米卡星8．3%;复方新诺明75．2%；四环素81．2%；氨苄西林88．0％；头孢唑啉48．9％；泰能3．8％；氨曲南14．3％。39株表皮葡萄球菌对8种抗生素的耐药性分别为：环丙沙星7．7％，阿米卡星5．1％，复方新诺明23．1％，四环素35．9％，青霉素76．9％，苯唑西林41．0％，克林霉素25．6％，红霉素41．0％。结论 长时间和较频的使用抗生素会导致耐药性的产生，提示在选择抗生素时必须慎重，防止滥用。     

逆转录病毒介导的vIL—10表达对小鼠MLC和心脏移植存活？…

目的：探讨逆转录病毒介导的病毒白介素１０（ｖＩＬ－１０）基因表达对小鼠混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）反应和心脏移植存活期的影响。方法：将ｖＩＬ－１０ ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ，取ｖＩＬ－１０重组逆转录病毒上清加入ＢＡＢＬ／ｃ和ＣＢＡ／Ｊ混合淋巴细胞中培养，液闪测量。在新生ＣＢＡ／Ｊ小鼠心脏移植时，将ｖＩＬ－１０上清１０μＬ（１０００ｐｆｕ）注入移植心脏内，观察其对心脏移植存活期的影响。结